抗消毒剂型微生物培养基研究

二氧化氯、过氧乙酸、次氯酸钠及过氧化氢等消毒剂高浓度可以杀灭微生物,低浓度可以抑制微生物生长。在微生物检测中,要消除消毒剂的干扰,培养基的抗消毒剂指数必须控制在１２．０—２４.５之间。消毒剂解抑剂Ⅰ的抗消毒剂指数为 １２．０,对细菌和真菌生长无明显抑制作用,加入经改良和优化的普通培养基后,制得５种抗消毒剂型培养基,在灭菌前后和一年的保存期内,其抗消毒剂指数基本保持不变。当采用大样倾注平板法和液体大样法检测残留消毒剂的样品时,使用抗消毒剂型培养基检出细菌和真菌能力大大高于普通培养基。     

抗干扰微生物培养基的抗干扰性能研究

食品饮料中残留防腐剂、消毒剂和臭氧会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,当采用大样倾注平板法和液体大样法测定细菌和真菌总数及采用国标大肠菌群测定法测定大肠菌群MPN值时,使用抗防腐剂型、抗消毒剂型及抗臭氧型微生物培养基分别检测含有防腐剂山梨酸钾及苯甲酸钠、消毒剂二氧化氧和臭氧的样品,其检出细菌、真菌和大肠菌群的能力大大高于普通微生物培养基,与采用普通微生物培养基检测不合防腐剂、消毒剂及臭氧的样品中的细菌、真菌和大肠菌群的检出能力基本一致。     

抗干扰微生物培养基的抗干扰性能研究*

食品饮料中残留防腐剂、消毒剂和臭氧会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,当采用大样倾注平板法和液体大样法测定细菌和真菌总数及采用国标大肠菌群测定法测定大肠菌群MPN值时,使用抗防腐剂型、抗消毒剂型及抗臭氧型微生物培养基分别检测含有防腐剂山梨酸钾及苯甲酸钠、消毒剂二氧化氧和臭氧的样品,其检出细菌、真菌和大肠菌群的能力大大高于普通微生物培养基,与采用普通微生物培养基检测不合防腐剂、消毒剂及臭氧的样品中的细菌、真菌和大肠菌群的检出能力基本一致。     

抗防腐剂型微生物培养基研究

食品饮料中含有山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸及苯甲酸钠等防腐剂会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,把测定体系的抗防腐剂指数控制在８１．１～９４．５之间,可较好地消除防腐剂对微生物生长的抑制。防腐剂解抑剂Ⅲ的抗防腐剂指数为９２．３４,对细菌和真菌的生长无抑制作用,加入经改良和优化的普通培养基后,制得５种抗防腐剂型培养基,在灭菌前后和一年保存期内,它们的抗防腐剂指数基本保持不变。与普通培养基比较,当采用大样倾注平板法和液体大样法检测含有防腐剂的样品时,抗防腐剂型培养基可极大地提高样品中的细菌和真菌的检出率。     

抗防腐剂型微生物培养基研究*

食品饮料中含有山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸及苯甲酸钠等防腐剂会对其中的细菌和真菌的检出造成严重干扰,把测定体系的抗防腐剂指数控制在８１．１～９４．５之间,可较好地消除防腐剂对微生物生长的抑制。防腐剂解抑剂Ⅲ的抗防腐剂指数为９２．３４,对细菌和真菌的生长无抑制作用,加入经改良和优化的普通培养基后,制得５种抗防腐剂型培养基,在灭菌前后和一年保存期内,它们的抗防腐剂指数基本保持不变。与普通培养基比较,当采用大样倾注平板法和液体大样法检测含有防腐剂的样品时,抗防腐剂型培养基可极大地提高样品中的细菌和真菌的检出率。     

抗干扰微生物检测技术研究

在检测细菌、真菌和大肠菌群时,抗防腐剂型微生物培养基可消除样品中浓度为 ２．０ｇ／Ｌ（Ｋｇ）的山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸及苯甲酸钠的干扰;抗消毒剂型微生物培养基可分别消除１５０ｍｇ／ Ｌ二氧化氯、４００ｍｐ／ Ｌ过氧乙酸、７００ｍｇ／ Ｌ次氯酸钠及１８０ｍｐ／ Ｌ过氧化氢的干扰;抗臭氧型微生物培养基可以消除１０．０ｍｇ／Ｌ的臭氧和余氯的干扰。大样倾注平板法可以取５ｍＬ的样品,适用所有样品的检测;液体大样法可以取１００ｍＬ的样品,适用于所有样品的检测及增菌,特别适用于无色液体样品;最小近似数法可以检出次大样中     

抗臭氧型微生物培养基研究*

通常采用臭氧对水体进行灭菌,在臭氧与矿泉水混合后,当其浓度分别为０．１８３、０．３１１及０．５８４ｍｇ／Ｌ时,起始阶段臭氧分解速度较小,１．５￣５．５ｈ内其分解速度加快,至９．５ｈ后,在水中的臭氧浓度已降至０．０４０￣０．０６０ｍｇ／Ｌ,但要彻底分解则需２４ｈ以上。从抗消毒剂型微生物培养基基础上发展起来的抗臭氧型微生物培养基,在普通倾注平板法、大样倾注平板法、液体大样法和最小近似数法中,当检测含有     

CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体

【目的】用CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体,解决通用CAS琼脂平板法中十六烷基三甲基溴化铵对真菌和某些细菌的生长抑制问题。【方法】将改良的CAS检测培养基覆盖在长满菌落的无铁培养基上,生长抑制问题因微生物未与十六烷基三甲基溴化铵直接接触而解决。【结果】3株氢氧化细菌SDW-5、SDW-9和AaP-13均能产生单菌落,加入CAS检测培养基1 h后,菌落周围产生明显的铁载体晕圈。【结论】本方法成功解决了生长抑制问题,可以作为检测微生物铁载体的通用方法。     

培养真菌的试剂松膏和松膏培养基

松树针叶浸提物具有抑制细菌、放线菌等微生物的生长以及促进真菌生长的作用,作者在原工作基础上进一步研制出培养真菌的试剂松膏。按一定比例将松膏加入到培养基中,就可以抑制细菌等非目的微生物,并促进真菌的生长。因此,松膏是为配制选择性真菌培养基和真菌的一般培养用培养基而提供的试剂。     

快速尿菌计数培养盒的研究

该快速尿菌计数培养盒进行了４种选择性培养基功能试验,共试验２３种９７株细菌,Ｇ－菌１７种７２株,Ｇ＋菌４种１９株,真菌６株。结果表明４种培养基功能特异,即Ⅰ＃为菌落计数,Ⅱ＃只限Ｇ－菌生长,Ⅲ＃只限Ｇ＋菌生长,Ⅳ＃只限真菌生长。该法与微量加样器法进行对比检测１８４份尿菌标本,符合率９６．７％,与日本培养盒平行对比试验１２份,结果一致     

95例肺炎支原体快速液体培养阳性标本分析

目的:采用巢式PCR法(nPCR)及全自动微生物鉴定仪对肺炎支原体(MP)快速液体培养阳性标本进行分析,探讨MP快速培养假阳性情况及原因.方法:收集95例MP快速液体培养阳性标本,巢式PCR检测MP核酸,用全自动微生物鉴定仪检测导致培养假阳性的微生物.结果:95例MP快速液体培养阳性标本中,90例巢式PCR结果阴性,假阳性率94.7%;经全自动细菌鉴定仪鉴定,97.8%为真菌所致.结论:普通的敏感细菌在MP快速液体鉴定培养基中可以被有效抑制;真菌是引起的快速培养假阳性的主要原因.     

土壤微生物与腐植质

1.土壤细菌和真菌土壤里面有固体颗粒,颗粒与颗粒之间有孔隙;有水;有空气;有各种微生物所必需的养料.因此,土壤便成了微生物的天然培养基,里面生长着数不清的,各种各类的细菌、放线菌、真菌、藻类和原生动物. 这些土壤微生物之中,以细菌和真菌的数目最多,在土壤中的作用也最大.虽然每一类土壤,极可能同时含有细菌和真菌,但因环境条件的不同,总有一类微生物占优势.这,对于我们以后就要讲到的腐植质的形成     

天麻生长地土壤微生物群落的初步分析

目的考察天麻生长地局部微生物群落的生态特征,探索可能会影响天麻品质的土壤微生态因素。方法选择天麻采收期采集不同产地的野生和栽培天麻生长地土壤样本,主要采用平板稀释法检测土壤中真菌、细菌、放线菌总数及优势菌的构成状况,初步分析天麻生长地土壤微生物群落的组成状况。结果所采集天麻生长地土壤样本中,来自不同产地的野生天麻细菌总数和细菌／真菌比值明显低于栽培天麻（P〈0．05）,其他指标基本一致;野生天麻生长地局部土壤中优势菌的种类比栽培天麻复杂,且许多种类为非共有。结论不同产地野生和栽培天麻生长地土壤微生物的组成存在差异,可能是影响天麻品质的重要生态因子。     

自然界中难分离培养微生物的分离和应用*

采用在分离培养基中添加自然来源的抽提液,或加入一些特殊化合物,使其中处于Viable but non-culturable(VBNC)状态的微生物恢复其生长繁殖能力,从而得到分离。实验结果发现甜菜碱、丙酮酸钠、SOD以及过氧化氢酶可使分离到的微生物种类及菌落总数明显增加。还采用固液结合的方法来分离那些在普通平板培养基上不能形成肉眼可见菌落的那些微小菌落的微生物。采用这几种方法从4份土壤样品中共分离得到52株放线菌,103株细菌,17株真菌。对其中的放线菌和真菌进行了生物活性的测定,得到多株具有抗菌活性的微     

幽门螺杆菌L型培养基的研究

根据细菌Ｌ型的一般特点,以布氏肉汤为基础,利用正交试验方法和统计分析,研制出适合ＨＰ－Ｌ型生长的液体培养基,其成份包括：蛋白胨１％,胰蛋白陈１％,葡萄糖０．１％酵母粉０．２％,小牛血清１０％,Ｄ－蛋氨酸０．０２％,ＮａＣｌ１．５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１５ｍＭ,ＣａＣｌ２１０ｍＭ。ＨＰ－Ｌ型固体培养基则在此液体培养基的基础上,除去小牛血清另加０．８％琼脂和１５％羊血浆,ＨＰ－Ｌ型在此培养基上诱导成功,形成典型的“油煎蛋”菌落,在常规Ｓｋｉｒｒｏｗ平板上则不能生长。     

真菌玫瑰红钠培养基平皿计数验证法的改进

为了避免玫瑰红钠培养基平皿法计数验证时细菌在培养基上生长而干扰真菌计数的准确性这一问题,采用在该培养基中选加了0.08g/L、0.10g/L和0.12g/L三种不同浓度的氯霉素的方法。结果证实,在玫瑰红钠培养基中加入浓度为0.10g/L的氯霉素可完全抑制供试大肠杆菌CMCC(B)44102株的生长,但又不影响供试真菌如白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉CMCC(F)98003的培养生长。因此,在微生物限度检查时的玫瑰红钠培养基中加入氯霉素最适宜的有效浓度为0.10g/L。     

洁净区消毒剂杀菌性能验证

目的验证5种消毒剂的杀菌性能及消毒效果,为环境微生物控制的策略及实施提供依据。方法采用中和剂鉴定试验测定相应中和剂的中和效果,然后通过悬液定量杀灭试验测定消毒剂的杀菌效果和作用时间;最后通过载体定量杀灭试验测定消毒剂在最短有效作用时间下对不同载体表面微生物的杀灭效果。结果试验选取的中和剂对测试的消毒剂有良好的中和作用,中和剂及中和产物对测试微生物的生长无显著影响,可用于悬液定量杀灭试验及载体定量杀灭试验。悬液定量杀灭试验中,5种消毒剂对测试微生物均具有较高的杀灭作用,对细菌的杀灭对数值在4.26～6.44之间,对真菌的杀灭对数值在3.51～5.35之间,芽孢杆菌的杀灭对数值为4.21。载体定量杀灭试验中,消毒剂对细菌的杀灭对数值在4.25～5.65之间,对真菌的杀灭对数值在3.31～4.72之间,芽孢杆菌的杀灭对数值为3.61。结论 5种消毒剂对测试微生物的杀灭效果均符合标准规定,可用于洁净区的表面消毒灭菌。     

普通和稀释培养基研究太湖沉积物可培养细菌的多样性

采用普通牛肉汁培养基和 10倍稀释的普通牛肉汁培养基 (以下简称稀释培养基 )研究太湖沉积物中细菌多样性 ,发现在稀释培养基上生长的细菌数量普遍是在普通牛肉汁琼脂培养基上生长的细菌数量的 3～ 5倍。分离得到纯培养物的 16SrDNA部分序列 (5′端约 5 0 0bp)分析表明 ,不同培养基上生长的优势细菌类群存在差别 :普通培养基生长的细菌主要为γ_Proteobacteria(35. 1% ) ,其次为Actinobacteria(2 4 5 % )和Firmicutes(2 2 . 3% )等类群 ,其中大部分细菌与假单胞菌属 (Pseudomoas)、芽孢杆菌属 (Bacillus)和节杆菌属 (Archrobacter)细菌的系统关系密切 ;稀释培养基生长的细菌则主要为Actinobacteria(2 7. 1% )、Firmicutes(2 5 . 7% )、α_Proteobacteria(2 1. 4 % )和γ_Proteobacteria(15. 7% )等类群 ,与芽孢杆菌属 (Bacillus) (2 5. 7% )发育系统关系密切的细菌为优势属。研究结果表明同时采用两种培养基有助于从太湖沉积物中分离到更多种微生物。     

EG03菌剂对辣椒青枯病的防治效果及对根围土壤微生物群落的影响

EG03菌剂由多种抗青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)的拮抗细菌复配而成,田间施用能有效防治辣椒青枯病,平均防效达85.8%.采用稀释平板法、最大或然数(MPN)法以及Biolog微孔板培养系统研究了EG03菌剂对田间辣椒根围土壤微生物群落特征的影响.结果表明:EG03菌剂对根围土壤微生物群落的影响随时间变化而不同,施用后不同程度提高了真菌和芽孢杆菌的数量,并显著增加了自生固氮细菌的数量.根围土壤微生物群落平板每孔颜色平均变化率(AWCD)的变化随培养时间呈现典型的"S"型曲线,辣椒生长后期根围土壤AWCD值高于前期.6类碳源利用分析表明,EG03菌剂的施用在短期内会降低根围土壤微生物的碳源利用率,辣椒生长后期根围土壤中以糖类物质作为碳源的微生物占主导地位.微生物多样性指数分析发现,EG03菌剂施用前期会不同程度降低根围土壤微生物各项多样性指数,但施用后期会提高各项多样性指数,尤其在Simpson指数和McIntosh均匀度两项指标上差异显著.     

盐度对稀释平板法研究红树林区土壤微生物数量的影响

在使用稀释平板法分离潮间带红树林及其对照光滩土壤微生物以及计数时,多数情况下使用陈海水制作培养基和稀释水,很少考虑培养基和稀释水的盐度对最终计数结果的影响.使用稀释平板法研究了盐度对福建九龙江口红树林区与深圳福田红树林保护区土壤微生物平板计数的影响,结果表明培养基与稀释水盐度对微生物数量有明显的影响.统计分析显示细菌的海水稀释效果优于淡水,而放线菌与真菌则刚好相反(P<0.05,一个例外).海水不适合配制红树林区土壤微生物平板计数的培养基,从0～35,高盐度的平板培养基会降低微生物的数量,尤其是放线菌的数量,尽管培养基的盐度对真菌影响无规律,但细菌数量在低盐度时比在高盐度和不加氯化钠时要多.根据盐度效应,提出了稀释平板技术应用于潮间带的红树林及其相应光滩时的优化方法,认为细菌应该用海水作无菌稀释水,而放线菌和真菌则应用淡水作稀释水;包括光滩在内的红树林区土壤微生物分离与计数的培养基宜控制较低盐度范围.