冠心病合并糖尿病患者外周血巨噬细胞中脂质稳态与动脉粥样硬化指数的关联研究

摘要 目的：探究冠心病合并糖尿病患者外周血巨噬细胞中脂质稳态与动脉粥样硬化指数的关联机制。方法：2015年1月至2020年9月,筛选78名2型冠心病合并糖尿病患者,根据血糖变异度分为3组：A组、B组及C组。检测总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、空腹胰岛素（FINS）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）。评估动脉粥样硬化指数（AI）和冠状动脉狭窄程度,并分析其相关性及独立危险因素。结果：B组较A组TC、LDL-C和AI升高,HDL-C降低,B组较C组TC、LDL-C和AI降低,HDL-C升高（P<0.05）。B组较A组hs-CRP、FINS、TG值升高,B组较C组hs-CRP、FINS、TG值降低（P<0.05）。B组较A组HOMA-IR值升高,B组较C组HOMA-IR值降低（P<0.05）。B组较A组AI和冠脉Gensini评分值升高,B组较C组AI和冠脉Gensini评分降低（P<0.05）。Person线性相关分析显示：hs-CRP、TG、Gensini评分、HOMA-IR值与AI正相关（P<0.05）。在逻辑回归模型中,结果显示：hs-CRP、TG、Gensini评分、HOMA-IR值是AI的独立危险因素。结论：Gensini评分与AI呈正相关,且hs-CRP、TG、Gensini评分、HOMA-IR值AI的独立危险因素。     

军事飞行人员非酒精性脂肪肝病患者白细胞计数、C反应蛋白、尿酸与糖脂代谢、胰岛素抵抗和肝纤维化指标的相关性研究

摘要 目的：研究军事飞行人员非酒精性脂肪肝病（NAFLD）患者白细胞计数（WBC）、C反应蛋白（CRP）、尿酸（UA）与糖脂代谢、胰岛素抵抗和肝纤维化指标的相关性。方法：选择2018年7月至2021年12月期间海军青岛特勤疗养中心收治的100例NAFLD军事飞行人员作为NAFLD组,另取同期健康体检者90例作为对照组。检测并对比两组的WBC、CRP、UA、糖脂代谢、胰岛素抵抗以及肝纤维化相关指标,采用Pearson相关系数分析WBC、CRP、UA与糖脂代谢、胰岛素抵抗和肝纤维化指标的相关性。结果：NAFLD组的WBC、CRP、UA水平均明显高于对照组（P<0.05）。NAFLD组的空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹胰岛素（FINS）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平低于对照组（P<0.05）。NAFLD组的Ⅲ型前胶原肽（PC-Ⅲ）、层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）水平均明显高于对照组（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示, WBC、CRP、UA与TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、PC-Ⅲ、LN、HA、Col-Ⅳ均呈正相关,而与HDL-C呈负相关（P<0.05）; WBC、CRP、UA与FBG、FINS无显著相关性（P>0.05）。结论：军事飞行人员NAFLD患者体内WBC、CRP、UA明显升高,且与糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗和肝纤维化有关。     

lncRNA-ANRIL、PON1在冠心病血清中的表达及其临床意义

摘要 目的：研究非编码长链RNA ANRIL（lncRNA-ANRIL）和对氧磷酶1（PON1）在冠心病患者血清表达水平,并探讨其与冠心病患者临床意义。方法：选择2018年2月到2021年2月在我院接受治疗的冠心病患者70例作为研究组,同时随机选取同期在我院进行体检的健康志愿者70例作为对照组。比较两组患者血清lncRNA-ANRIL相对表达水平和PON1含量。采用Pearson法分析冠心病患者血清lncRNA-ANRIL相对表达水平和PON1含量与收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）以及低密度脂蛋白（LDL-C）间的相关性。采用多因素Logistic回归分析冠心病发生的影响因素。结果：（1）研究组患者SBP、DBP、TG、TC和LDL-C显著高于对照组,而HDL-C显著低于对照组（P<0.05）;（2）研究组血清lncRNA ANRIL Exon 1-2和Exon 17-18相对表达水平均低于对照组,研究组血清PON1含量低于对照组（P<0.05）（3）血清ANRIL Exon 1-2和Exon 17-18相对表达水平与SBP、DBP、TG、TC和LDL-C均呈负相关,与HDL-C呈正相关（P<0.05）;（4）血清PON1含量与SBP、DBP、TG、TC和LDL-C均呈负相关,与HDL-C、血清ANRIL Exon 1-2和Exon 17-18相对表达水平均呈正相关（P<0.05）;（5）多因素Logistic回归分析显示：TC、SBP、DBP、TG和LDL-C是冠心病发病的危险因素,HDL-C、血清ANRIL Exon 1-2和Exon 17-18相对表达水平、以及血清PON1含量是冠心病发病的保护因素。结论：冠心病患者血清lncRNA-ANRIL相对表达水平和PON1含量均降低,两者与冠心病患者血压及血脂代谢指标显著相关,且两者均为冠心病发病的保护因素。     

老年糖尿病患者胰岛素第一相分泌与颈动脉粥样硬化的相关性

摘要 目的：探讨老年糖尿病患者胰岛素第一相分泌与颈动脉粥样硬化（CAS）的相关性。方法：回顾性分析选择2020年5月~2020年10月我院收治的160例老年T2DM患者（T2DM组）、50例健康体检者（对照组）的临床资料。根据餐后30 min胰岛素测定胰岛素增值（△INS）,将T2DM患者分为低△INS组（n=77）、高△INS组（n=83）,另根据是否并发CAS,分为CAS组（n=92）和非CAS组（n=68）。比较各组基本资料、血糖、血脂指标及△INS,采用多因素logistic回归分析△INS与CAS发生的相关性。结果：与对照组比较,高、低△INS组斑块检出率、颈动脉内-中膜厚度（cIMT）明显升高（P<0.05）;低△INS组斑块检出率、cIMT均较高△INS组明显升高（P<0.05）。CAS组和非CAS组老年T2DM患者的年龄、病程、SBP、HDL-C、LDL-C、TC、FPG、HOMA-IR及△INS比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素logistic回归分析显示,病程、HOMA-IR是T2DM患者并发CAS的独立危险因素,而HDL-C、△INS则是保护性因素（P<0.05）。结论：老年T2DM患者普遍存在第一相胰岛素分泌受损,且与CAS密切相关。加强第一相胰岛素分泌监测,并定期行颈动脉超声检查,对于老年T2DM患者血糖控制及CAS早期防治具有重要临床意义。     

加味黄连解毒汤联合利拉鲁肽对初发2型糖尿病肥胖患者糖脂代谢、炎症反应及胰岛功能的影响

摘要 目的：探讨加味黄连解毒汤联合利拉鲁肽对初发2型糖尿病肥胖患者糖脂代谢、炎症反应及胰岛功能的影响。方法：选取2016年1月至2018年5月复旦大学附属华山医院北院收治的104例初发2型糖尿病肥胖患者,按照随机数字表法将患者分为对照组（n=52）和研究组（n=52）。对照组给予利拉鲁肽治疗,研究组给予加味黄连解毒汤联合利拉鲁肽治疗,两组均治疗3个月。比较两组治疗前、治疗3个月后体质量指数（BMI）、血糖指标[空腹血糖（FPG）、餐后2小时血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）]、血脂指标[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]、炎症指标[C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）]及胰岛功能指标[胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）],并记录两组治疗过程中不良反应发生情况。结果：治疗3个月后,两组的BMI、FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR及血清TG、TC、LDL-C、CRP、TNF-α、IL-6水平均低于治疗前,HOMA-β及血清HDL-C水平均高于治疗前,且研究组BMI、FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR及血清TG、TC、LDL-C、CRP、IL-6、TNF-α水平均较对照组降低,血清HDL-C水平及HOMA-β较对照组升高（P<0.05）。两组不良反应发生率比较无差异（P>0.05）。结论：加味黄连解毒汤联合利拉鲁肽治疗初发2型糖尿病肥胖患者安全有效,能够减轻患者体重,改善血糖、血脂水平以及胰岛功能,减轻炎症反应。     

瘦素受体与载脂蛋白E基因型对肥胖儿童血脂的影响

摘要 目的：探讨瘦素受体（LEP-R）外显子突变与载脂蛋白E（ApoE）基因型对肥胖患儿血脂的影响。方法：选择肥胖儿童（肥胖组）115例和非肥胖的健康儿童（健康组）84例为研究对象,空腹12 h后抽取患儿静脉血,测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。采用聚合酶链式反应-限制性片段多态性（PCR-RFLP）方法及聚丙烯凝胶电泳分析LEP-R第20外显子的基因型及突变频率、ApoE基因型。结果：LEP-R基因共发现3种基因型,即G/G、G/A、A/A型。与健康组儿童相比,肥胖组患儿LEP-R基因第20外显子G A突变概率上升。与G/G基因型比较,A/A基因型肥胖儿童血清TG、LDL-C水平升高和HDL-C水平下降 （P<0.05）,G/A基因型肥胖儿童的HDL-C水平下降（P<0.05）;肥胖组及健康组儿童ApoE等位基因以ε3型常见,肥胖组儿童ε4基因检出率高于健康组儿童（P<0.05）。与ApoE基因型ε3型肥胖儿童比较,ε2型肥胖儿童血清中的TC、LDL-C水平下降,HDL-C水平升高（P<0.05）,ε4型肥胖儿童血清TC、TG、LDL-C水平升高（P<0.05）;在G/A型肥胖儿童中,携带ε4型的肥胖儿童血清中TG、LDL-C水平高于非ε4型（P<0.05）;在A/A型肥胖儿童中,携带ε4型ApoE基因的肥胖儿童血清中TC、TG、LDL-C水平高于非 4型,血清HDL-C水平低于非ε4型（P<0.05）。结论：LEP-R基因型可影响肥胖儿童血脂水平,A/A型LPE-R基因儿童更易发生血脂异常。肥胖儿童ApoE基因型多变,ε4基因频率升高,且影响肥胖儿童脂类代谢,A/A型LEP-R基因同时携带ApoE ε4等位基因的肥胖儿童更容易发生血脂异常。     

吡格列酮二甲双胍联合运动康复对超重或肥胖2型糖尿病患者糖脂代谢和胰岛功能的影响

摘要 目的：探讨吡格列酮二甲双胍联合运动康复对超重或肥胖2型糖尿病患者糖脂代谢和胰岛功能的影响。方法：选取经一般生活方式干预血糖控制不佳的超重或肥胖2型糖尿病患者85例,按照干预方式分为药物组（40例）和联合组（45例）,两组均给予糖尿病教育和饮食指导,药物组给予吡格列酮二甲双胍片口服,联合组在药物组基础上给予运动康复,分别于干预前及干预3个月后,计算体质量指数（BMI）,测定空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2hPG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和β细胞功能指数（HOMA-β）。结果：两组患者干预3个月后的FPG、2hPG、HBA1c、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、FFA均较干预前下降,HOMA-β、HDL-C较干预前升高（P＜0.05）,联合组干预3个月后的BMI较干预前下降（P＜0.05）。干预3个月后,联合组的BMI、2hPG、HBA1c、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、FFA均低于药物组（P＜0.05）。结论：吡格列酮二甲双胍联合运动康复可改善超重或肥胖2型糖尿病患者的糖脂代谢紊乱,并具有额外的减重获益,且能够改善患者的胰岛功能。     

老年2型糖尿病患者血清ANGPTL4、Betatrophin、Vaspin水平与血糖、血脂及下肢血管病变的关系研究

摘要 目的：探讨老年2型糖尿病（T2DM）患者血清脂肪因子血管生成素样蛋白4（ANGPTL4）、促代谢因子（Betatrophin）、腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂（Vaspin）水平与血糖、血脂、下肢血管病变（LVD）的关系。方法：选取我院2018年8月～2019年8月收治的老年T2DM患者108例,根据患者是否合并LVD,分成LVD组（n=38）和无LVD组（n=70）,比较两组临床资料、血清ANGPTL4、Betatrophin、Vaspin水平、血糖指标[空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）]、血脂指标[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]。经Pearson线性相关分析患者血清ANGPTL4、Betatrophin、Vaspin水平与血糖、血脂指标相关性。经Logistic多因素回归模型分析患者LVD发生的影响因素。结果：LVD组舒张压、收缩压均高于无LVD组（P＜0.05）。LVD组血清Betatrophin水平及TC、TG、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c高于无LVD组,血清ANGPTL4、Vaspin水平及HDL-C低于无LVD组（P＜0.05）。Pearson线性相关分析显示,血清ANGPTL4、Vaspin与TC、TG、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c呈负相关,与HDL-C呈正相关（P＜0.05）。血清Betatrophin与TC、TG、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c呈正相关,与HDL-C呈负相关（P＜0.05）。Logistic多因素回归模型分析结果显示,血清ANGPTL4、Betatrophin、Vaspin以及舒张压、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c是患者LVD发生的影响因素（P＜0.05）。结论：老年T2DM合并LVD患者的血清ANGPTL4、Vaspin水平明显下降,而血清Betatrophin水平升高,且三者与血糖、血脂指标均存在相关性,并且是患者发生LVD的影响因素,临床可考虑通过检测血清ANGPTL4、Betatrophin、Vaspin水平,辅助评估LVD的发生风险。     

维持性血液透析患者合并不宁腿综合征的影响因素分析及有氧运动改善效果的临床研究

摘要 目的：分析维持性血液透析（MHD）患者合并不宁腿综合征（RLS）的影响因素，并探讨有氧运动对MHD合并RLS患者的改善效果。方法：选取2019年5月~2022年1月在首都医科大学附属北京朝阳医院进行MHD治疗的患者120例为研究对象。根据是否出现RLS将120例MHD患者分为合并RLS组（n=28）和未合并RLS组（n=92）。收集患者的临床资料，多因素Logistic回归分析MHD患者合并RLS的影响因素，并探讨有氧运动对MHD合并RLS患者的改善效果。结果：MHD合并RLS与性别、透析龄、高血压、饮酒史、收缩压、舒张压、血磷、维生素 B12（VitB12）、铁蛋白（SF）、同型半胱氨酸（Hcy）、血镁、β2微球蛋白（β2-MG）有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：透析龄偏长、β2-MG偏高、VitB12偏高、Hcy偏高、饮酒史、SF偏低、血镁偏高、性别为女、血磷偏高是MHD合并RLS的危险因素（P<0.05）。干预12周后，MHD合并RLS患者的匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）、焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）评分均较干预前下降（P<0.05）。结论：透析龄偏长、β2-MG偏高、VitB12偏高、Hcy偏高、饮酒史、SF偏低、血镁偏高、性别为女、血磷偏高均会增加MHD合并RLS的发生风险。有氧运动应用于MHD合并RLS患者，有助于改善患者的睡眠、抑郁和焦虑状况，效果较好。     

2型糖尿病肾病患者血清HIF-1α、ChREBP与糖脂代谢、肾功能的关系及其诊断价值分析

摘要 目的：探讨2型糖尿病肾病（T2DKD）患者血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）与糖脂代谢、肾功能的关系及其诊断价值。方法：选取2021年1月～2022年1月我院收治的100例T2DKD患者为T2DKD组,另选取同期100例单纯T2DM患者T2DM组,选取我院同期100名体检健康者为对照组。检测血清HIF-1α、ChREBP和糖脂代谢指标[空腹血糖（FBG）、餐后2hFBG（2hFBG）、血红蛋白A1c（HbA1c）、稳态模型评估-胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]、肾功能指标[尿白蛋白/肌酐比（UACR）、估计肾小球滤过率（eGFR）]。采用Pearson相关性分析T2DKD患者血清HIF-1α、ChREBP水平与糖脂代谢、肾功能指标的相关性,受试者工作特征（ROC）曲线分析血清HIF-1α、ChREBP水平对T2DKD的诊断价值。结果：对照组、T2DM组、T2DKD组血清HIF-1α、ChREBP、FBG、2hFBG、HbA1c、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、UACR水平依次升高,HDL-C、eGFR依次降低（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,T2DKD患者血清HIF-1α、ChREBP水平与FBG、HbA1c、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、UACR呈正相关,与HDL-C、eGFR呈负相关（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清HIF-1α、ChREBP水平单独和联合诊断T2DKD的曲线下面积分别为0.784、0.787、0.882,HIF-1α、ChREBP水平联合诊断的曲线下面积大于各指标单独预测（P＜0.05）。结论：T2DKD患者血清HIF-1α、ChREBP水平升高与糖脂代谢紊乱和肾功能降低有关,血清HIF-1α、ChREBP水平联合诊断T2DKD具有一定价值。     

壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析

目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。     

国内外蝗害治理技术现状与展望

本文首先概述了国内外蝗虫发生与为害的态势,总结了现阶段我国蝗虫发生与为害的主要特点:即农田飞蝗暴发频繁而且严重,草原土蝗的发生时常造成严重的经济损失,而且侵入城市干扰市民生活,我国与周边国家之间蝗虫过境迁移频繁,使用化学农药污染环境和农产品;分析了国内外蝗虫防治对策与技术的发展现状,重点介绍了应急防治和可持续治理对策、...     

Kinetics and thermodynamics of peroxidase- and laccase-catalyzed oxidation of N-substituted phenothiazines and phenoxazines

N -substituted phenothiazines (PTs) and phenoxazines (POs) catalyzed by fungal Coprinus cinereus peroxidase and Polyporus pinsitus laccase were investigated at pH 4–10. In the case of peroxidase, an apparent bimolecular rate constant (expressed as k _cat/K _m) varied from 1 ×10⁷M⁻¹s⁻¹to 2.6×10⁸M⁻¹s⁻¹ at pH 7.0. The constants for PO oxidation were higher in comparison to PT. pH dependence revealed two or three ionizable groups with pK _a values of 4.9–5.7 and 7.7–9.7 that significantly affected the activity of peroxidase. Single-turnover experiments showed that the limiting step of PT oxidation was reduction of compound II and second-order rate constants were obtained which were consistent with the constants at steady-state conditions. Laccase-catalyzed PT and PO oxidation rates were lower; apparent bimolecular rate constants varied from 1.8×10⁵M⁻¹s⁻¹ to 2.0×10⁷M⁻¹s⁻¹ at pH 5.3. PO constants were higher in comparison to PT, as was the case with peroxidase. The dependence of the apparent bimolecular constants of compound II or copper type 1 reduction, in the case of peroxidase or laccase, respectively, was analyzed in the framework of the Marcus outer-sphere electron-transfer theory. Peroxidase-catalyzed reactions with PT, as well as PO, fitted the same hyperbolic dependence with a maximal oxidation rate of 1.6×10⁸M⁻¹s⁻¹ and a reorganization energy of 0.30 eV. The respective parameters for laccase were 5.0×10⁷M⁻¹s⁻¹ and 0.29 eV. Received: 20 September 1999 / Accepted: 24 February 2000     

Coiled-coil nanomechanics and uncoiling and unfolding of the superhelix and alpha-helices of myosin

The nanomechanical properties of the coiled-coils of myosin are fundamentally important in understanding muscle assembly and contraction. Force spectra of single molecules of double-headed myosin, single-headed myosin, and coiled-coil tail fragments were acquired with an atomic force microscope and displayed characteristic triphasic force-distance responses to stretch: a rise phase (R) and a plateau phase (P) and an exponential phase (E). The R and P phases arise mainly from the stretching of the coiled-coils, with the hinge region being the main contributor to the rise phase at low force. Only the E phase was analyzable by the worm-like chain model of polymer elasticity. Restrained molecular mechanics simulations on an existing x-ray structure of scallop S2 yielded force spectra with either two or three phases, depending on the mode of stretch. It revealed that coiled-coil chains separate completely near the end of the P phase and the stretching of the unfolded chains gives rise to the E phase. Extensive conformational searching yielded a P phase force near 40 pN that agreed well with the experimental value. We suggest that the flexible and elastic S2 region, particularly the hinge region, may undergo force-induced unfolding and extend reversibly during actomyosin powerstroke.     

白术同源四倍体的诱导和鉴定及其与二倍体过氧化物酶的比较

以白术（Atractylodes macrooephala Koidz.）二倍体组培苗为材料,对其四倍体诱导方法进行研究,共获得45个白术同源四倍体株系,为优良株系的选育提供了材料。此外,还分析比较了其中8个白术四倍体株系与二倍体的过氧化物酶同工酶（POD）的酶谱差异,发现四倍体各株系过氧化物酶同工酶谱比二倍体的均多了Rf0.310的谱带,且总过氧化物酶比活力也发生了很大改变,对探讨白术四倍体优良株系的生理生化机理具有一定的参考价值。     

放牧对牧草光合作用、呼吸作用和氮、碳吸收与转运的影响

研究放牧对草地植物生理活动的影响,对于揭示草地放牧演替的生理机制有重要意义.大量研究表明,家畜放牧对牧草光合作用、呼吸作用以及C和N吸收与转运的影响,可以分为生理伤害和生理恢复2个阶段.放牧通过改变草地冠层结构影响牧草光合作用,净光合作用速率短期内迅速下降,随着叶面积指数增加又逐渐上升,呼吸作用有相似的变化趋势.牧草放牧后再生长所需的C和N最初主要来自根系和留茬中的贮藏物质,此后随着牧草生长恢复逐渐由同化作用供给,C代谢与土壤N水平负相关.放牧后牧草生理活动变化与牧草遗传特性、种间竞争、家畜放牧特征、非生物环境等因素密切相关.     

Synthesis of hapten and conjugates of coumestrol and development of immunoassay

3-O-Carboxymethylcoumestrol was prepared as the hapten for immunoassay by a partial alkylation of coumestrol with ethyl chloroacetate in acetone alkalized with potassium carbonate. 3-O-Ethoxycarbonylmethylcoumestrol was separated by column chromatography and finally was hydrolyzed with formic acid. 1H and 13C NMR data (APT, COSY, HMQC, and HMBC) revealed that the reaction was regioselective, as 3-O-ethoxycarboxymethylcoumestrol was the only monosubstituted derivative. The hapten was then conjugated to bovine serum albumin and used for immunization of rabbits. A radioimmunoassay (RIA) system was established based on the polyclonal antiserum and a 125I-labeled hapten-tyrosine methyl ester conjugate as the radioligand. Parameters of the RIA: sensitivity: 12 pg per tube, 50% intercept: 140 pg per tube, working range: 20-4000 pg per tube. The cross-reactivity of a panel isoflavonoid and lignan phytoestrogens was either negligible (e.g. formononetin 0.07%; biochanin A 0.06%) or not detectable at all. The major immunoreactive peak in HPLC fractions from an alfalfa extract had the same retention time as coumestrol standard and represented 94.8% of the signal. The remaining 5.2% of immunoreactivity was distributed between five minor peaks. We conclude that after the validation for particular matrices, the method will be a useful tool for analysis of coumestrol, especially in low volume and low concentration samples.