血细胞酯酶双染法在急性白血病中的应用

我院从 1 990年 4月至 1 998年 2月应用血细胞酯酶双染色法 [1] ,即氯乙酸萘酚酯酶 ( NASDCE)与a-醋酸萘酯酶 ( NAE)双染色法 ,对 1 1 2例急性白血病的鉴别诊断 ,现将结果报告如下。材料和方法1 .病例 :1 1 2例急性白血病均经血片骨髓片细胞形态学和过氧化酶 ( POX)、苏丹黑 B( SB)、热盐水、非特异性酯酶 (α- NAE)、非特异性酯酶 +氟化钠 ( a- NAE+ Na F)、糖原染色 ( PSA)等细胞化学染色 ,结合临床而确诊。2 .白血病类型按 86年天津标准 [2 ] ,急性淋巴细胞白血病 41例。急性非淋巴细胞白血病 71例 ,其中急性粒细胞白血病未分…     

细胞DNA倍体分析和EBERs原位检测在鼻咽癌早期诊断中的应用

目的　探讨鼻咽脱落细胞进行DNA倍体和EB病毒编码RNA (EBERs)检测在鼻咽癌诊断中的应用。方法　对 38例经细胞学诊断为鼻咽癌和 8例为正常的鼻咽细胞涂片分别进行图像分析测定细胞DNA含量和EB病毒EBERs原位杂交检测。结果　与病理细胞学诊断相比 ,DNA异倍体分析和EBERs检测诊断癌的敏感性分别为 5 0 %和 92 %,其特异性均为 10 0 %;其阴性预测值分别为 30 %和 72 %。结论　与EBERs检测相比 ,DNA异倍体分析的诊断敏感性和阴性预测值较低 ,差异具有显著性 (分别为P <0 0 0 1和P <0 0 5 )。证明在鼻咽细胞学涂片应用EB病毒原位杂交检测诊断鼻咽癌优于应用DNA异倍体分析诊断。与细胞DNA图像分析相比 ,EB病毒原位杂交检测具有客观、实验条件简单等优点 ,在鼻咽癌可疑病人的早期诊断和鉴别诊断上具有重要的实用价值。     

26例新西兰白兔正常骨髓像观察

检测了第四军医大学实验动物中心提供的 2 6只成年健康新西兰白兔的骨髓像 ,对国内不同品种兔骨髓像资料加以补充和丰富。1　材料和方法　按照施新猷所著医学动物实验方法中健康兔的判断标准 ,取 2 6只健康新西兰白兔 ,年龄 8～ 18个月 ,体重1 85～ 3 4 5ｋｇ。常规 3 %戊巴比妥钠 ( 3 0ｍｇ ｋｇ)腹腔内麻醉 ,剪去术区毛发 ,无菌条件下在每只兔左侧胫骨前内侧骨面距胫骨平台 (即胫骨近侧关节面 ) 0 8～ 1 5ｃｍ范围内用骨穿针穿刺抽取 0 2～ 0 4ｍｌ不抗凝骨髓 ,立即涂片 3张做瑞氏染色 ,油镜下计数 5 0 0个有核细胞 ,并鉴定细胞种类及…     

15例急性药物性粒细胞缺乏症骨髓象分型探讨

急性药物性粒细胞缺乏症 (简称粒缺 )是临床病因显见的一种血液学异常状态。骨髓象改变和临床密切相关 ,由于对骨髓粒系的改变存有不同认识 ,故对骨髓象改变解释不一。现将我院 1 976～1 998年收治的资料完整的 1 5例病例报道如下 ,以探讨其骨髓象分型。1　临床资料　　 1 5例患者均由于各种疾病应用某些药物引起外周血中性粒细胞绝对值低于 0 .5× 1 0 9/ L。男 6例 ,女 9例 ,年龄 2 1～ 75岁。发病原因以解热镇痛药占首位 ,共 1 0例 ,其余是氯霉素 1例 ,复方新诺明 1例 ,他巴唑 3例。发病时间 3～ 7天 6例(4 0 % ) ,8～ 1 4天 3例 (2 0 %…     

白血病患者骨髓中RASSF1A基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的:通过检测各类型白血病骨髓中RASSF1A基因启动子区甲基化水平,探讨其对白血病分型的临床检测意义。方法:抽选93例不同类型白血病患者(观察组)予以甲基化特异性PCP(MSP)方法进行骨髓RASSF1A基因甲基化状态检测,研究不同类型白血病甲基化状态差异,同期抽选93例非白血病者为对照研究(对照组)。结果:观察组中有13例(13.98%)检测到RASSF1A基因甲基化,而对照组中RASSF1A基因甲基化率为0%,比较差异显著(P0.05)。不同类型白血病RASSF1A甲基化率比较:淋巴系显著高于髓系(P0.05),急性与慢性白血病比较差异无显著性(P0.05)。结论:白血病骨髓中MSP法检测存在RASSF1A甲基化;而RASSF1A基因在淋巴系白血病中的甲基化概率明显增高,因此,对RASSF1A进行甲基化检测有可能作为白血病临床诊断分型的生物学指标之一。     

Daxx在急性白血病的表达及意义

目的研究Daxx在急性白血病(AL)中的表达及其与AL的分型、临床特征、疗效及预后的关系.方法应用免疫组织化学方法检测88例初治AL骨髓细胞Daxx蛋白的表达情况,分析其与FAB分型、临床特征、疗效及预后的关系.结果急性髓细胞白血病(AML)骨髓细胞中Daxx的表达显著高于正常对照组(P<0.05)与急性淋巴细胞白血病(ALL)组(P<0.05).在AML亚型中,Daxx在M3中的表达显著高于M1,M2,M3,M4和M5.采用逐步回归法分析,校正其它参数,Daxx的表达与初诊时的白细胞数及骨髓原始细胞数目呈正相关,与疗效呈负相关. 结论 Daxx在急性髓细胞白血病中广泛表达,其表达的紊乱可能在AML的发病中起作用,还与AML的某些临床特征、疗效及预后密切相关.     

208例毒蛇咬伤肾损害的防治体会

被血循毒及混合毒的毒蛇 (如蝮蛇 )咬伤后 ,大多会引起功能性损害 ,如能渡过危险阶段 ,多数患者肾功能可以恢复。若不能及时纠正 ,则可能发生肾小管坏死 ,导致急性肾功能衰竭。现将我院1 990～ 1 999年对具有肾损害表现的 2 0 8例毒蛇咬伤患者的防治措施报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　 2 0 8例中男性 1 2 6例 ,女性 82例 ,年龄 3～ 72岁 (平均 38.2岁 ) ,1 4岁以下儿童5例 ;蝮蛇咬伤 1 89例 (90 .9% ) ,五步蛇咬伤 1 6例 ,银环蛇咬伤 3例 ;导致少尿 (含无尿 )型急性肾功能衰竭 1 3例 (6.3% ) ,年龄为 8～ 53岁 (平均 30 .2岁 ) ;蝮…     

多胺代谢与癌肿的研究

研究多胺与癌肿的关系。这些癌肿包括Raji癌肿细胞 ,急性淋巴细胞白血病 ,妇产科癌肿 (卵巢癌等 ) ,卵巢癌HO— 891 0细胞 ,肺癌以及胃癌等。研究结果 :(1 )Raji癌细胞株及卵巢癌细胞株 (HO— 891 0 )在培养过程中 ,第 2 4～4 8h多胺水平出现高峰 ,它与这两种癌细胞的核酸合成 ,细胞增殖呈现正相关 ;(2 )急性淋巴细胞白血病患者淋巴细胞及红细胞中多胺水平均升高 ,这有助于对这些病的早期诊断及判断预后 ;(3 )妇科癌症 (尤其卵巢癌 ) ,肺癌 ,胃癌等患者尿液中多胺水平明显高于正常 ,所以尿液中多胺对这些癌肿也是一种有效的诊断标记物     

人骨髓细胞长期低温保存的研究

细胞保存有重要价值 ,骨髓细胞保存的价值主要在于为骨髓细胞移植提供可靠保证。传统的骨髓细胞低温保存是采用二甲基亚砜为保护剂 ,以慢速率“二步”法降温至 - 80℃ ,直接投入液氮。理论上讲 ,细胞在这种温度下 ,一切代谢停止 ,可以永远保存。本文对 2 0例人骨髓细胞持续低温保存 15年的情况进行分析。1　材料与方法(1)材料①骨髓冻存与复温　在局麻下采集骨髓 (恶性淋巴瘤骨髓象正常 12例 ,急性白血病完全缓解 8例 ) ,肝素抗凝 (4 0ｕ/ｍｌ) ,采集平均量 6 2 0 (385～ 880 )ｍｌ,4℃下 ,自然沉降 6 0ｍｉｎ ,除去血浆及部分红细胞 ,浓集…     

生长抑素对白血病细胞增殖影响的免疫组织化学研究

目的　研究生长抑素 (somatostatin ,SS)对人红白血病K5 6 2细胞和白血病患者骨髓单个核细胞 (BMM NC)增殖的影响。方法　将 8肽生长抑素 (奥曲肽 ,octreotide ,SMS)在体外作用于K5 6 2细胞和BMMNC ;用原位末端标记 (TUNEL)技术、免疫组织化学方法在光镜下随机计数阳性细胞数 ,并用图象分析系统分析bcl 2蛋白和CD34 抗原表达的光密度值 (OD值 )。结果　与对照组比较 ,用SMS 10 -6mol/L处理的K5 6 2细胞组TUNEL检测凋亡细胞明显增多(P <0 0 1)。在加SMS 10 -8mol/L～ 10 -6mol/L处理的白血病患者BMMNC组 ,bcl 2蛋白的表达与未加SMS组比较 ,阳性细胞数明显减少 (P <0 0 1) ;OD值P <0 0 1。CD34 抗原表达在SMS10 -6mol/L和 10 -7mol/L处理的白血病患者BMMNC组 ,阳性细胞数比与未处理组明显减少 (P <0 0 1) ;OD值明显低于对照组 ,分别为P <0 0 1和P <0 0 5。结论　SMS可抑制K5 6 2细胞和白血病患者BMMNC增殖 ,诱导凋亡 ;减少bcl 2蛋白和CD34 抗原的表达 ;SMS对白血病细胞具有抑制增殖的作用。     

蒟蒻薯的组织培养

1　植物名称　薯 (Taccachantrieri) ,又名老虎须、箭根薯。2　材料类别　叶柄。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )愈伤组织诱导培养基 :MS + 6 BA 1mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .2 ;( 2 )芽分化和增殖培养基 :MS + 6 BA 1～ 2 +NAA 0 .2 ;( 3)生根培养基 :1 /2MS + 6 BA 0 .5 +NAA 1。以上培养基中均加 5 g·L- 1 琼脂粉 ,培养基 ( 1 )和 ( 2 )加 30 g·L- 1 白糖 ,( 3)加 2 0 g·L- 1 白糖、0 .5 g·L- 1 活性碳 ,pH 5 .8。培养温度为 2 5～2 8℃ ,光照 1 0～ 1 2h·d- 1 ,光照度 1 5 0 0～ 2 0 0 0lx。4　生长与分…     

流式细胞术BrdU/DNA 双染法测定云芝糖肽 诱导的Molt-4 细胞周期阻滞

目的:探究云芝糖肽(PSP)对人急性淋巴母细胞白血病Molt-4细胞周期的影响。方法:采用流式细胞术BrdU/DNA双染法获得各时相细胞分布状况和细胞周期的动力学参数。结果:0.1 mg/mlPSP处理12 h后,G2/M期细胞百分比由对照组的11.09%减少至3.69%。DNA合成时间由12.10 h延长至108.40 h。24 h处理组中,S期细胞百分比由对照组的43.29%增加至67.26%,而G0/G1期和G2/M期细胞百分比均减少,G0/G1期细胞百分比由对照组的37.47%减少至27.43%,G2/M期细胞百分比由对照组的19.24%降低至5.31%。DNA合成时间更是由11.95 h延长至114.52 h。结论:PSP对人急性淋巴母细胞白血病Molt-4细胞周期的阻滞作用在于S期,该作用与DNA合成抑制有关。     

小鼠急性髓系白血病模型的构建

MLL基因的异常重排会引发急性淋巴系(ALL)和急性髓系白血病(AML)。该文详细阐述了利用逆转录病毒载体MLL-AF9构建小鼠AML模型的方法。该研究比较了免疫磁珠法与5-氟尿嘧啶(5-FU)方法富集骨髓细胞的效率,以及不同时间点收获的病毒对骨髓Lin-细胞感染效率的影响。通过流式检测发现, 5-氟尿嘧啶富集的骨髓Lin–细能够被48 h收获的病毒高效感染。受体鼠在移植了MLL-AF9感染的骨髓Lin–细胞60天后,外周血、骨髓、脾脏组织中均有大量的白血病细胞浸润, RT-qPCR也验证了白血病靶基因的表达上调,表明小鼠AML模型的成功构建。这项研究为从事白血病研究的科研人员提供了一种有效的小鼠急性髓系白血病模型,为研究白血病发病机理与研发白血病治疗药物提供有用的工具。     

珍珠菜提取物抗肿瘤作用的初步研究

观察灌服珍珠菜提取物对小鼠肉瘤 ( S1 80 )的抑制作用 ,用相同方法跟踪珍珠菜的抗肿瘤有效部位。用紫外分光光度法 ,观察了珍珠菜提取物对环磷酰胺造成骨髓抑制的保护作用 ;采用 MTT法观察不同浓度珍珠菜提取物对人白血病 HL - 6 0及 K 5 6 2细胞的体外抑制作用。结果表明珍珠菜浸膏 ( 40 0 0 m g/ kg· d)、石油醚部位 ( 2 0 0 m g/kg· d)、氯仿部位 ( 2 0 0 m g/ kg· d)、乙酸乙酯 ( 2 0 0 mg/ kg· d)部位、正丁醇部位 ( 2 0 0 mg/ kg· d)及水溶性部位 ( 2 0 0mg/ kg· d)对小鼠肉瘤 ( S1 80 )抑瘤率分别为 5 2 .74%,16 .5 1%,2 8.41%,42 .17%,48.2 1%,2 5 .2 4%;小鼠灌服环磷酰胺 ( 2 5 mg/ kg· d)能引起骨髓抑制而使骨髓中 DNA含量下降 ,如同时灌服珍珠菜浸膏 ( 2 0 0 0 m g/ kg· d)则可使小鼠骨髓 DNA含量恢复至接近正常水平 ;珍珠菜总黄酮提取物 ( 2 10μg/ m L )、乙酸乙酯部位 ( 180μg/ m L )、正丁醇部位 ( 2 10μg/ m L )作用 48h对 HL - 6 0细胞的抑制率分别为 35 .6 6 %,45 .85 %,42 .36 %;IC5 0分别为 92 .85 ,16 4.93,40 2 .6 1μg/ m L ;对 K5 6 2细胞抑制率为 5 9.94%,70 .34%,77.98%;IC5 0分别为 17.6 4,5 2 .5 3,6 4.70μg/ m L。因此 ,珍珠菜提取物对小鼠肉瘤 ( S180 )有显     

急性混合细胞白血病独特临床生物学特征及预后研究

目的:分析急性混合细胞白血病(HAL)独特的临床生物学特征及预后。方法:采用流式细胞术(FCM)分析白血病细胞的免疫表型,最终确诊56例HAL患者,对其骨髓标本进行细胞形态学及相关细胞化学染色分析,以确定其FAB分型,用聚合酶链反应检测骨髓细胞DNA IgH及TCRγ基因重排,采用兼顾急性髓细胞性白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)的方案治疗,同时结合多项临床生物学指标分析其转归和预后。结果:确诊的HAL其FAB分型以AML-M1/M2、ALL为主;其免疫分型以B系和髓系混合表达多见。CD34在HAL中呈高表达并且是对患者预后具有影响力的因素(P=0.03)。确诊的56例HAL患者中,28例出现IgH基因单克隆重排阳性(50.76%),22例出现TCRγ基因单克隆重排阳性(39.65%),其中2例IgH和TCRγ基因单克隆重排同时出现阳性。此类患者对治疗反应差、缓解率低为36%。结论:HAL属特殊类型白血病,有其独特的临床生物学特征,对化疗方案不敏感,预后较差。     

SHIP1在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响研究

目的:探讨含SH2结构域的肌醇1(SHIP1)在急性髓细胞白血病患者中的表达及对人白血病细胞凋亡的影响。方法:采用Western blot检测收集的急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1的表达。人白血病细胞U937转染SHIP1过表达载体(pEGFP-SHIP1组)及对照空载体(pEGFP组),同时设置对照组,对照组细胞不转染载体,其他步骤同pEGFP-SHIP1组和pEGFP组。流式细胞仪检测48 h的细胞凋亡情况,Western blot检测48 h细胞中SHIP1、Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt的表达。结果:急性髓细胞白血病患者骨髓中SHIP1表达明显低于正常人(P0.05)。pEGFP-SHIP1组细胞中SHIP1、Bax表达和凋亡率均明显高于pEGFP组及对照组(P0.01),Bcl-2、p-Akt表达均明显低于对照组(P0.01)。结论:SHIP1在急性髓细胞白血病患者骨髓中表达下调,其可能通过Akt信号促进人白血病细胞凋亡。     

脂质体介导基因编辑载体质粒转染条件的优化

[目的]探讨脂质体介导基因编辑载体质粒转染人食管癌Eca-109细胞的最佳条件。[方法]以基于Cre/Lox P系统的p GT-A1B1和基于CRISPR/Cas9系统的p X458-sgRNA8两种基因编辑载体质粒为实验材料,将环状和线性质粒以不同DNA用量(0. 2、0. 4、0. 6和0. 8μg)和不同DNA与脂质体比例(1∶1、1∶1. 5、1∶2、1∶2. 5和1∶3)转染Eca-109细胞,计算转染效率。[结果]不同DNA用量条件下,p GT-A1B1在0. 4μg和0. 6μg时转染效率较高,p X458-sgRNA8在0. 6μg时转染效率较高,与其它DNA用量比较均有显著性差异(P 0. 05)。不同DNA与脂质体比例条件下,p GT-A1B1在比例为1∶1. 5和1∶2时转染效率较高,p X458-sgRNA8在比例为1∶2. 5时转染效率较高,与其它比例比较均有显著性差异(P 0. 05)。同一种质粒的环状和线性结构形态,在DNA用量或DNA与脂质体比例相同时,转染效率差异不显著(P 0. 05)。[结论]建立了脂质体介导基因编辑载体质粒转染Eca-109细胞的最佳转染条件,质粒p GT-A1B1和p X458-sgRNA8的DNA用量分别为0. 4～0. 6μg和0. 6μg,DNA与脂质体比例分别为1∶1. 5～1∶2和1∶2. 5。     

低分子肝素钙治疗不稳定型心绞痛的疗效观察

不稳定型心绞痛 ( UAP)易引起急性心肌梗死( AMI)或猝死。临床上常使用硝酸酯类、钙拮抗剂和β受体阻滞剂等单用或合用治疗 ,但疗效欠佳。我院于 1 999年 6月至 1 2月应用低分子肝素钙治疗 2 5例不稳定型心绞痛患者 ,疗效满意。现报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　 2 5例均为住院患者 ,男 1 6例 ,女9例 ;年龄 41～ 76岁 ,平均 59.5岁。初发型 1 3例 ,恶化型 6例 ,静息型 6例。 2 5例均符合下列条件 :( 1 )胸痛反复发作 ,每天均有心绞痛 2～ 3次以上 ;( 2 )发作时心电图示 ST段下移 0 .0 5～ 0 .1 5mv,或T波倒置或 ST段抬高 0 .6～…     

航空急诊72例

旅客进入航空港乘机时或登机前后发生的急诊称之为航空急诊。我院从 1 993～ 1 999年 ,接待航空急诊共 72例 ,现报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　 72例中男 56例 ,女 1 6例 ,年龄1 9～ 72岁 ,平均 3 8.7岁。冠心病 1 0 ( 1 3 .9% ) ,脑血管病 6例 ( 8.3 % ) ,高血压病 8例 ( 1 1 .1 % ) ,急性上消化道出血 6例 ( 8.3 % ) ,急性肾绞痛 8例( 1 1 .1 % ) ,急性胆囊炎、胆石症 7例 ( 9.7% ) ,急性支气管哮喘 5例 ( 6 .9% ) ,急性酒精中毒 5例( 6 .9% ) ,晕厥症 7例 ( 9.7% ) ,脑心综合症 3例( 4 .1 % ) ,心性变态反应 2例 ( 2 .8% ) ,糖尿…     

卡介苗对癌症和白血病的应用(续一)

<正> 四、癌症和白血病的临床免疫疗法(一)、急性白血病Mathe’及其小组开始和最长时间的连续试验了,应用特异和非特异性抗原治疗急性淋巴性白血病(ALL)。这个小组在1976年蒙特利尔讨论会上报告了头100例急性淋巴样(未分型)白血病用化疗诱导缓解,辅以化疗放射疗法减少肿瘤细胞数,然后用照射过的同种异体混合白细胞及液体BCG划痕进行自动免疫治疗取得的成功经验。从1963年开始的首次对比试验中,3～13