鼠伤寒沙门氏菌SL7207 SifA-突变株的构建和鉴定

鼠伤寒沙门氏菌SifA^-基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P22噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL7207的SifA^-突变株SL7207,该突变株与SL7207有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL7207。在MDCK上皮细胞中的增殖能力增强,但在RAW264．7巨噬细胞中的生存能力减弱。小鼠毒力试验显示SL7207。在BALB／c小鼠体内毒力下降。仅SL7207在体外可向RAW264．7巨噬细胞递送真核表达质粒。SL7207的构建为重组沙门氏菌疫苗载体的研制提供了一个新的选择。     

鼠伤寒沙门氏菌SL7207SifA-突变株的构建和鉴定

鼠伤寒沙门氏菌SifA-基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P22噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL7207的SifA-突变株SL7207*,该突变株与SL7207有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL7207*在MDCK上皮细胞中的增殖能力增强,但在RAW2647巨噬细胞中的生存能力减弱。小鼠毒力试验显示SL7207*在BALB/c小鼠体内毒力下降。仅SL7207*在体外可向RAW2647巨噬细胞递送真核表达质粒。SL7207*的构建为重组沙门氏菌疫苗载体的研制提供了一个新的选择。     

手术医疗收费结构比例分析及对策探讨

目的 通过分析手术医疗收费结构比例,找出医疗收费结构中的缺陷。方法 对639例手术医疗收费情况进行数据处理,分析不同类别手术费用间价格的差异性。结果 在手术及麻醉医疗消费中,药品、耗材的费用在医疗消费中所占比例较大,医务人员的劳动价值在费用中未合理体现。结论 医疗费用的合理管控需要采取科学有效的措施作为保障,医务人员劳动价值需要公平合理的体现在医疗费用中。     

作为疫苗和疫苗载体的减毒细菌

减毒细菌不但能作为疫苗,而且已被证实是理想的疫苗载体,尤其是在研制基因工程疫苗方面显现了独特的优越性,减毒细菌作为载体可激发强烈的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫。主要就沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特菌和BCG等细菌作为疫苗和疫苗载体的研究进展进行综述,以期为新型疫苗的研制奠定基础。     

下调bla表达提高pcDNA3.1+在重组菌中的稳定性

高拷贝质粒pcDNA3.1＋在鼠伤寒沙门氏菌S1.7207中不稳定。通过去除pcDNA3.1＋中氨繁青霉素抗性基因（bla基因）的启动子序列,仅保留其核糖体结合位点,构建了新质粒pmcDNA3.1＋。SL7207（pmcDNA3．1＋）在岔与不含氨苄青霉素的培养基中均能稳定保留其质粒。SI.7207（pmcDNA3．1＋）的β-内酰胺酶活力明显低于SL7207（pcDNA3．1＋）,且接种SL7207（pmcDNA3．1＋）的液体培养基中的氨苄青霉素不易被降解。腹腔接种小鼠7d后,脾脏中SL7207（pmcDNA3．1＋）的质粒稳定性仍保持在95％以上,而SL7207（pcDNA3．1＋）免疫后第3d99％丢失质粒。所以,通过降低bla基因的表达水平,为解决高拷贝质粒在沙门氏菌中的稳定性问题提供了新方法。     

珍珠菜提取物抗肿瘤作用的初步研究

观察灌服珍珠菜提取物对小鼠肉瘤 ( S1 80 )的抑制作用 ,用相同方法跟踪珍珠菜的抗肿瘤有效部位。用紫外分光光度法 ,观察了珍珠菜提取物对环磷酰胺造成骨髓抑制的保护作用 ;采用 MTT法观察不同浓度珍珠菜提取物对人白血病 HL - 6 0及 K 5 6 2细胞的体外抑制作用。结果表明珍珠菜浸膏 ( 40 0 0 m g/ kg· d)、石油醚部位 ( 2 0 0 m g/kg· d)、氯仿部位 ( 2 0 0 m g/ kg· d)、乙酸乙酯 ( 2 0 0 mg/ kg· d)部位、正丁醇部位 ( 2 0 0 mg/ kg· d)及水溶性部位 ( 2 0 0mg/ kg· d)对小鼠肉瘤 ( S1 80 )抑瘤率分别为 5 2 .74%,16 .5 1%,2 8.41%,42 .17%,48.2 1%,2 5 .2 4%;小鼠灌服环磷酰胺 ( 2 5 mg/ kg· d)能引起骨髓抑制而使骨髓中 DNA含量下降 ,如同时灌服珍珠菜浸膏 ( 2 0 0 0 m g/ kg· d)则可使小鼠骨髓 DNA含量恢复至接近正常水平 ;珍珠菜总黄酮提取物 ( 2 10μg/ m L )、乙酸乙酯部位 ( 180μg/ m L )、正丁醇部位 ( 2 10μg/ m L )作用 48h对 HL - 6 0细胞的抑制率分别为 35 .6 6 %,45 .85 %,42 .36 %;IC5 0分别为 92 .85 ,16 4.93,40 2 .6 1μg/ m L ;对 K5 6 2细胞抑制率为 5 9.94%,70 .34%,77.98%;IC5 0分别为 17.6 4,5 2 .5 3,6 4.70μg/ m L。因此 ,珍珠菜提取物对小鼠肉瘤 ( S180 )有显     

流程重组在病案质量控制中的实践应用

??????? 目的 对病案质控流程重组,总结完善工作流程,提高工作效率,改善工作质量。方法 在分析病案出院前质控流程现状基础上,从缩短审核时间、增加病床合理使用和保证病历质量等方面阐述如何在现有条件下来改善病案质控流程。结果 加强病案质量控制,不断提高病历书写质量。结论 使病案质控最大限度服务于临床需要。     

紫外分光光度法测定珍珠菜中总黄酮含量

目的:建立珍珠菜提取液中总黄酮的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法,通过紫外可见扫描确定最大吸收波长,以芦丁为对照品制定标准曲线,并进行样品溶液稳定性试验和方法回收率与精密度试验。结果:最大吸收波长为405 nm,标准曲线线性范围为4.014-32.112μg/mL,r=0.999 9。样品液经A l3 络合后在0.5-2.5h内稳定性较好,平均加样回收率为102.00%±1.64%,RSD为1.61%,日内、日间精密度RSD小于2%,符合要求。结论:该方法简单方便、准确可靠,可以用来测定珍珠菜中总黄酮的含量。     

稳定携带H5亚型禽流感病毒候选DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性

采用PCR技术从重组质粒pVAX1-HA扩增出禽流感病毒JSGO(H5N1)株的血凝素(HA)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1 中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-HA。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207*,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207*(pmcDNA3.1-HA)。经体内体外试验证实,重组质粒pmcDNA3.1-HA在沙门氏菌中的稳定性显著高于pcDNA3.1-HA。将重组菌SL7207*(pmcDNA3.1-HA)和SL7207*(pcDNA3.1-HA)分别以2×109CFU剂量两次口服免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可产生针对禽流感病毒HA蛋白的黏膜抗体。重组菌以5×109CFU剂量两次口服免疫试验鸡,免疫鸡的小肠样品中可测到针对禽流感病毒HA蛋白的黏膜抗体,且SL7207*(pmcDNA3.1-HA)免疫组的抗体效价高于SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组。免疫保护试验结果显示,SL7207*(pmcDNA3.1-HA)和SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组的免疫保护率均与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05),且SL7207*(pmcDNA3.1-HA)免疫组的保护率较SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组提高了22.6%,说明稳定携带H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌具有良好的免疫原性和免疫保护性。