黑色菜豆(Phaseolus sp.)凝集素的纯化和性质

黑色菜豆(phaseolussp.)种子中含有对人A型血专一凝集的凝集素。用猪胃粘蛋白-Sepharose 4B作亲和吸附剂和Sephadex G-200凝胶过滤,可以纯化这种凝集素。纯化的凝集素在pH8.9,Tris-EDTANa_2-borate缓冲液的PAGE中,呈现单一蛋白带;酚-硫酸法测得总糖含量为3.22％。在SDS-PAGE中发现其分子由两种亚基所组成,亚基分子量分别为38,000和35,000。当凝集素浓度分别为0.98μg/ml和1.95μg/ml时能强烈地凝集人A型和AB型血细胞。在凝集素浓度高达500μg/ml时,B型血细胞能发生弱凝集反应,但对O型血和兔红细胞则完全不发生凝集反应。其凝集活性可被GalNAC、L-Fuc、猪甲状腺球蛋白和卵粘蛋白所抑制。该凝集素对人外周血中淋巴细胞的转化率达80％,细胞分裂比率高达37.1％;氨基组成分析表明,凝集素分子中Asp和Glu含量较高,而cys和Met含量很低。     

促胰液素可能是一种应激激素

促胰液素是历史上第一个被发现的激素,它具有刺激胰液分泌和抑制胃酸分泌等生理作用。但近年来发现,正常人血浆促胰液素的浓度很低,进餐后也仅轻度升高,引起它释放的生理刺激也不很明确。这些情况说明,促胰液素可能还有一些奥秘尚未被揭示。最近,挪威和丹麦学者认为,促胰液素可能是一种应激激素。他们的研究是对24名挪威军官学院的青年学员进行的,这些学员在受训开始就一直处于紧张状态:(1)进行连续5天的训练,运动量相当于其最大耗氧量的35%;(2)摄入的热量明显不足:每天消耗能量36100～42800千卡,但大多数学员仅摄入6300千卡热量;(3)睡眠时间严重不足:由于不断地格斗,大多数学员每昼夜仅有1～2小时的睡眠时间。在他们训练开始时;在训练期间的每天早晨;以及在训练停止后8小时,均采集空腹血样品,测量血浆促胰液素浓度。结果发现,在军训期间及训练停止后8小时,其空腹促胰液素浓度比训练前增加3～6倍(从1.8～3.7pmol/l增至13.3～19.1pmol/l)。如果摄入肉食,可使血浆促胰液素水平降低40％;如果口服400ml     

生态生物化学（六）：植物中的动物激素

1905年Bayliss 和Starling 在描述他们发现的第一个激素——肠促胰液素(secretin)时,第一次使用了激素(hormone)这个词。此后,许多动物激素被鉴定出来。1934年F(?)gl 等又从植物中分离出了第一个植物激素——植物生     

促胰液素、八肽胆囊收缩素和迷走神经刺激对狗胰液和血清中胰多肽含量的影响

对10只麻醉下主胰管内插置导管的家狗进行急性实验。用放射免疫测定法测定静脉注射促胰液素(8μg/kg)和八肽胆囊收缩素(CCK_8,40ng/kg)以及电刺激胸迷走神经前后的胰液和血清中胰多肽的含量。结果表明,基础胰液中含有大量胰多肽免疫活性物质,平均排出量为3130±2200pg/15min,其平均浓度高于血清水平40倍左右,但是个体之间的变异范围较大。当静脉注射促胰液素和 CCK_8以及电刺激胸迷走神经后,胰液胰多肽排出量和血清胰多肽水平均增多,其中以电刺激迷走神经后尤为明显。高峰都在刺激后15min 内出现。经促胰液素,CCK_8和迷走神经刺激后,胰液中胰多肽排出量比刺激前分别增加105%,52%和200%。外源性促胰液素或 CCK_8刺激后,胰液中胰多肽与 HCO_3~-出量之间或胰液中胰多肽与淀粉酶排出量之间,分别均呈一致的关系。本文结果提示,胰多肽不仅是一种内分泌,它亦具有外分泌的特性。迷走神经、促胰液素和胆囊收缩素对胰多肽的释放具有调节作用。     

人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用

将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9mg/L,分子量约 1 6.5k D.培养上清经离子交换层析纯化后 ,目的蛋白的纯度为 92 % .体外在人前列腺癌细胞上活性分析表明 ,rh PSP94以1 0 0μg/L ,对该细胞的抑制率 2 0 .4% ;单纯新型 TNF,以 1 0 3 U/ml,抑制率 2 9.8% ;rh PSP94和新型 TNF以上述同样剂量联合应用 ,抑制率为 86.3% .提示 PSP94在体外对抗前列腺癌细胞有杀伤作用 ,但不明显 ;PSP94与新型 TNF联合应用 ,可使抑制率明显提高 ,可能 PSP94与新型 TNF有协同抗前列腺癌的作用 .     

神經与激素因素在胰液分泌調节中的相互关系

本实验系用狗为对象,分慢性和急性实验两种,但实验均在戊皖巴比妥钠的麻醉下进行。我们观察了神经与激素二因素,于不同的结合方式的情况下,对胰液分泌调节中的相互关系,结果证明: (一)在激素刺激(注促胰液素入静脉或注盐酸入小肠)对胰腺的效应停止后的10分钾内,紧接着刺激切断4—6天后的颈部迷走神经离中端,所引起的胰液分泌,较单独刺激同一神经时所引起的胰液分泌量多,潜伏期短, (二)神经与激素二因素同时作用,所引起的胰液分泌量,大大超过此二因素分别作用所得的效应的总和。 (三)在激素对胰腺的刺激效应停止后的10分钟内,紧接着注射毛果芸香硷,所引起的胰液分泌量,较单独注射毛果芸香碱为多。根据以上结果可以认为:神经与激素二因素在胰液分泌调节中有相互加强的作用。     

亚胺环己酮可模拟抑素对垂体促性腺激素的调控作用

抑素(inhibin)是由卵巢颗粒细胞或睾丸支持细胞分泌的一种糖蛋白激素,它对垂体促性腺激素具有负反馈调节作用,亚胺环己酮(cycloheximide)是一种蛋白质生物合成的强抑制剂。为了研究抑素的作用机制,作者比较了抑素(32KDa,从猪卵泡液提取)和亚胺环己酮分别对离体培养的大鼠腺垂体细胞合成与分泌促性腺激素的作用,结果表明:(1)抑素和亚胺环己酮都能抑制腺垂体卵泡刺激素(FSH)的基础分泌及细胞内 FSH 含量(ED_(50)分别为1.0ng/ml 和22.5ng/ml),但它们都不改变黄体生成素(LH)的基础分泌及细胞     

7种鹅膏菌属真菌肽类毒素的HPLC分析

利用HPLC法对长白山地区分布的7种鹅膏属真菌成熟子实体中的α鹅膏毒肽(αamanitin)、β鹅膏毒肽(βamanitin)和鬼笔毒肽(phalloidin)的含量进行了测定。结果表明:芥橙黄鹅膏(Amanitasubjunquillea)和橙黄鹅膏(Amanitaaff.citrina)中均含有3种毒素,其中芥橙黄鹅膏的α鹅膏毒肽含量为2395.91μg/g、β鹅膏毒肽含量为1653.75μg/g和鬼笔毒肽含量为405.26μg/g;橙黄鹅膏的分别为1121μg/g、4244μg/g和9442μg/g。芥橙黄鹅膏白色变种(Amanitasubjunquilleavar.abla)中含有β鹅膏毒肽,其含量为614.00μg/g。其他5种鹅膏中均未检测到上述3种毒素。     

如何增加猪的食量

猪体内有一种告之饱食时间的激素,Codon公司和美国农业部正在研制一种能够阻碍这种激素的化合物,以达到让猪吃得更多、长得更大、从而降低猪肉成本的目的。这种化合物是一种含有肠促胰酶肽(CCK)片段的疫苗,肠促胰酶肽是猪和人肠道上部产生的抑制食欲的自然激素,当片段CCK-8附着于一个更大的外源载体蛋白时,     

基础内分泌学讲座(Ⅲ)

一、胰岛 1869年兰格汉斯(Langerhans)首先发现,在胰腺中有一小簇具有丰富血管支配的细胞,这些细胞不同于分泌胰液的腺泡,没有分泌导管,称作Langerhans氏小岛或胰岛。人的胰腺含有200百万个胰岛,广泛地散布在胰腺组织内,直径为20—30微米,全部胰岛组织只占胰腺重量的1—2％。胰岛是胰腺的内分泌组织,它包含3种内分泌细胞,各自分泌不同激素。α     

大熊猫乳汁中富含游离精氨酸

采用高效液相色谱法测定了8只圈养大熊猫20个乳样中游离氨基酸的含量。结果显示:大熊猫初乳和常乳中均含有丰富的游离精氨酸,并且是含量最高的游离氨基酸;泌乳2-10d的大熊猫初乳中总游离氨基酸含量约为82mg/100ml,其中游离精氨酸平均含量达61mg/100ml,常乳中游离精氨酸含量约为54mg/100ml,均明显高于人、牛和藏绵羊乳;游离精氨酸在大熊猫干乳期乳腺分泌物中含量显著下降。推测乳中高水平的游离精氨酸在大熊猫幼仔生长发育中可能发挥重要作用[动物学报52(2):309-315,2006]。     

两种新的候补激素——组异肽和酪酪肽

肽类激素的发现过程,大多是先观察到粗的组织提取物中具有生物学活性,其次,进一步用生物学方法分离提纯粗制品,得到纯品激素,再后,确定激素分子结构。晚近,瑞典生化学家 Mutt 与 Tatemoto 等根据许多肽类激素都含有 C-端酰胺结构这一特性,独具匠心,设计出一种寻找肽类激素的化学新方法。即在组织提取物中先找寻含有 C-端酰胺结构的肽节段,然后用酶学方法测出 C-端及 N-端的氨基酸残基序列,最后,确定激素的分子结构。这种创造性工作,为探寻新的肽类激素开辟了广阔的道路。他们用这种方法,已经在猪的上段小肠中发现了几种以前不为人所知的肽类新激素。其中有两个,即组异肽和酪酪肽,皆是在提纯胰泌素时获得的副产品中找寻到的。组异肽(The peptide with N-terminal histidine and C-terminal isoleucine,简称 PHI),含有27个氨基酸残基。其 C-端序列为亮-异亮-NH_2,N-端序列为组-丙-门冬-甘-缬-苯丙-苏-,与胰泌素、血管活性肠肽(VIP)、胰高血糖素、肠抑胃肽(GIP)相似,属于胰泌素-胰高血糖素家族。初步观察到,它     

Cu 2+ 对体外培养的日本沼虾血细胞的影响

以日本沼虾为实验材科研究血细胞的体外培养,发现添加15％胎牛血清(FBS)、100IU／m1青霉素、100μg/ml链霉素,渗透压为472mmol/L的199培养基有利于血细胞的生长,在此基础上测定了Cu2 对传代血细胞的影响,发现培养基中添加2μg/L Cu2 时血细胞生长较好,总磷含量、碱性磷酸酶活性均表现较高水平。     

氮、磷营养盐对底栖硅藻的生长及生化组成影响

目的:研究了从福建连江海域分离得到的一株野生底栖硅藻(Nitzschia.constricta)的生长和生理特性.方法:测定了在不同氮磷浓度条件下比增长速率、色素,以及不同时期底栖硅藻蛋白和胞外多糖的积累情况.结果:当硝酸氮浓度为900mg/l时,获得最大比增长速率0.21和叶绿素a含量4.31mg/l、类胡萝卜素含量3.44mg/l、胞外多糖产率90.57μg/ml.当氮浓度为75mg/l时,在第10d得到最大蛋白产率28.90μg/ml.当磷浓度为4.4mg/l时,可得到最大比增长速率0.13、叶绿素a含量3.42mg/l、类胡萝卜素2.82mg/l、蛋白含量23.16μg/ml,无磷培养基中第5d的胞外多糖产率最高13.51μg/ml.结论:氮磷营养盐浓度的增加促进了此种底栖硅藻的生长,但不一定会促进蛋白及胞外多糖的产生.     

云芝糖肽在ROS、p3 8信号通路中对巨噬细胞Raw264.7的免疫调节作用

目的:探究云芝糖肽(PSP)对静息和脂多糖(LPS)过度刺激两种不同状态的巨噬细胞Raw264.7产生活性氧簇(ROS)及p38、p-p38的影响及其相关机制。方法:采用流式细胞术方法检测ROS的表达;Western blot方法检测MAPK信号通路中p38磷酸化及非磷酸化的相对表达量。结果:100g/ml PSP下调1g/ml LPS单独作用于巨噬细胞时ROS及p-p38的表达量;100g/mlPSP上调正常巨噬细胞p-p38的表达量;p38表达量基本不变。结论:PSP通过ROS,p38两条通路参与巨噬细胞的免疫调节作用。     

在烟草中酵母脯氨酸基因B的转化(英文)

重组质粒PYP22带有一从酵母基因文库分离到的4.6 kb DNA片段,此片段含有脯氨酸(Pro)合成途径必须的基因B(ProB)。用BamHⅠ酶解PYP22,回收ProB基因,重组入pGA471的Bg Ⅲ切口,形成含有ProB的双质粒载体PBYU4。pBYU4含有能在植物中表达的新霉素磷酸转移酶基因Ⅱ(NPT—Ⅱ),可做转基因植株的筛选标记。借助于辅助质粒pRK2013,pBYU4经过三亲结合转移到农杆菌LAB4404,在含有四环素12.5μg/ml、链霉素100μg/ml和利福平50μ/ml加的AB培养基上筛选出转接合子。提取筛选得到的农杆菌总DNA,用ECoR 1酶解,1％琼脂糖电泳,Southern转移DNA到硝酸纤维素膜上。用α—~(32)P-dCTP标记的ProB片段,与转移好的硝酸纤维素进行Southern杂交。Southern杂交证明含有ProB基因的农杆菌,在加有乙酸丁香酮(acetosyringone)125μg/ml和章鱼碱(octopine)125μg/ml的MS液体培养基中,诱导过夜。用叶圆片法转化革新1号烟草(Nicotana tabacum var.Gexin No.1),叶片与菌液共培养2～5d。从叶片分化再生出的芽转移到含有卡那霉素(K_m)80μg/ml、6—苄基腺嘌呤(6BA)1μg/ml和头孢氨噻腭钠(Cef)500μg/ml的MS培养基,筛选3周,将绿色的芽转移到含l％NaCl,6BA 1μg/ml和Cef 500μg/ml的MS培养基,进行复筛。测定经过这样筛选的再生芽的NPT—Ⅱ活性。     

用火箭电泳法测定溶菌酶活性

<正> 测定体液中溶菌酶含量的方法有免疫学和酶学方法两大类。常用的琼脂平板打孔法是一种酶学测定法,其测定范围为10—1000μg/ml。但人和小鼠血清溶菌酶活性分别约为2μg/ml和5μg/ml,低于上述测定范围。因此单用琼脂平板打孔法研究血清溶菌酶活性的细微变化是有困难的。我们将酶学方法和电泳方法结合在一起。由于酶的作用区域增加,灵敏度随之提高。此法类似抗原抗体在电冰过程中形成沉淀的火箭电泳法,但实际上并不是     

两株高效相思根瘤菌的抗药性研究及其质粒组成分析

目的:研究相思根瘤菌质粒与其抗药性之间的关系。方法:研究了相思根瘤菌MZ和AJ018在含不同浓度的抗生素的固体培养基和液体培养基的生长情况,并用碱裂解方法对其质粒组成进行检测。结果:两菌株对链霉素和卡那霉素均无抗性,而对其它抗生素都有不同程度的抗性。MZ菌株对实验中的氯霉素、氨苄青霉素、四环素三种抗生素的耐受范围与最大耐受值都比AJ018强,当平板培养基中氨苄青霉素、四环素、氯霉素的终浓度分别为250μg/ml、75μg/ml、150μg/ml时,AJ018在平板上无菌落生长,当三种抗生素终浓度分别为800μg/ml1、50μg/ml、400μg/ml时无菌落生长。两菌株都含有一个大约50kb的质粒。     

内毒素引起的乳鼠心肌细胞血红素加氧酶—1基因的表达

为了探讨在内毒素作用下的乳鼠心肌细胞（neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs）血红素加氧酶－1（heme oxygenase-1,HO-1）基因的表达及其在细胞损伤中的作用,分别用10、30及50μg/ml的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,10μg/ml LPS 10μmol/ml锌原卟啉Ⅸ（Zn-protoporphyrin-Ⅸ,ZnPPⅨ）和单纯10μmol/ml ZnPPⅨ与培养的NRCMs共同孵育6h,以及10μg/ml LPS与NRCMs共同孵育9h和18h。分别观察细胞HO－1 mRNA表达、MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率的变化。结果显示,同样与细胞孵育6h,LPS10μg/ml时HO－1 mRNA表达比对照组增加81.2％,30μg/ml时表达量增加126.3％,50μg/ml时表达量增加92.8％;LPS为10μg/ml时,孵育9h后HO－1 mRNA的表达量比对照组增加93.6％,孵育18h后一增加105.8％。LPS30、50μg/ml,10μg/ml LPS＋10μmol/ml ZnPPⅨ与细胞孵育6h及LPS 10μg/ml孵育18h后,细胞MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率明显增加（P＜0.01）;单纯10μg/ml LPS与单纯10μmol/ml ZnPPⅨ孵育6h后,上述指标均无明显升高。结果表明,LPS可诱导NRCMs HO－1 mRNA的表达,且在较低LPS剂量范围内具有时间依赖性和浓度依赖性;NRCMs HO-1 mRNA的表达可减低LPS引起的细胞损伤,这可能是细胞产生的一种自身保护性反应。     

玉米黑粉菌孢子粉的无机元素和氨基酸含量测定

对玉米黑粉菌(Ustilago maydisDC.Corola.)孢子粉的无机元素和氨基酸含量进行了测定。结果表明:玉米黑粉菌孢子粉含有丰富的无机元素,其中铁、钙、镁、磷、锌、锰含量分别为100μg/g、3 561μg/g、1 382μg/g3、500μg/g、101μg/g和24μg/g;同时含有8种必须由食物蛋白质提供的氨基酸,以苏氨酸含量最多,为340.18 mg/100 g。