肌肽对绵羊精子无氧酵解的影响

在无氧条件下,绵羊精子通过酵解途径获得能量,代谢结果产生大量乳酸,本实验通过测定精子悬液中果糖摄取以及乳酸生成量,研究肌肽、棉酚对绵羊精子酵解途径的影响,结果表明：４ｍＭ肌肽对绵羊精子酵解有显著增强作用,并能刺激精子对果糖的摄取。１２μＭ棉酚对绵羊精子无明显抑制,棉酚能部分抑制肌肽对精子的酵解作用。     

肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响

肌肽促进绵羊精子运动增强,直线运动精子数目增多;棉酚则强烈抑制精子运动并使精子的运动方式发生改变;肌肽与棉酚混合处理精子,肌肽可不同程度抵消棉酚对精子产生的有害作用。但当棉酚完全抑制精子运动后,再加入肌肽则不能使精子恢复运动。电镜观察,肌肽对绵羊精子超微结构无任何不良影响;棉酚同造成精子严重损伤,导致生物膜系统损害、轴丝崩解、线粒体螺旋鞘紊乱等。本文通过肌肽,棉酚加入的时序不同,探讨两者对绵羊精子     

棉酚对几种动物精子ATP酶抑制作用的比较研究

本文比较了棉酚对几种动物精子ATP酶的抑制作用。实验所测为精子细胞的总ATP酶活力;采用的棉酚浓度为10μM至80μM。20μM时精子酶的相对活力为海胆7604％,大鼠74％,家兔51.6％;40μM时酶的相对活力百分数下降至海胆52.5,大鼠35和家兔29.7;达80μM时酶的相对活力进一步下降至海胆26.7,而大鼠及家兔仅余13.2。结果表明(1)棉酚对精于ATP酶的抑制作用是依赖浓度的变化;(2)各种动物精子ATP酶活力的下降情况显示,大鼠及家兔(哺乳动物)精子ATP酶对棉酚的敏感性比海胆(无脊椎动物)要高些。这种差异性可能对棉酚在临床上的应用具有一定的参考价值。     

棉酚对海胆精子鞭毛轴丝及力蛋白(Dynein)ATP酶的抑制作用

本工作观测了不同浓度棉酚(10—80μmol/L)对海胆精子鞭毛轴丝及力蛋白ATP酶的影响,发现棉酚对之具有剂量依赖方式的抑制作用。 实验对比了几种ATP酶抑制剂对轴丝ATP酶的作用,结果表明它们之间差别很大。使酶活力下降一半所需的各种抑制剂浓度分别为:钒酸钠17μmol/L;棉酚36μmol/L;槲皮酮450μmol/L,DCCD[双环已基碳化二亚胺(Dicyclohexylcarbodiimide)]1,600μmol/L;乌本苷>2,000μmol/L。 本文对棉酚的杀精机理,抑制强度及其控制生育的意义进行了讨论。     

凤眼莲根分泌物氨基酸对根际肠杆菌属F2细菌降酚的影响

研究２种有代表性的凤眼莲（Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｐｅｓ）根分泌物Ｍｅｔ、Ｌｙｓ对其根际肠杆菌属Ｆ２细菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．Ｆ２）降酚的影响．结果表明,具有正趋化作用的Ｍｅｔ的不同浓度对细菌的生长动态、细菌降酚酶活性、细菌降酚效率基本没有影响;而具有负趋化作用的Ｌｙｓ在高浓度（１０－２、１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１）下延滞细菌的生长,抑制细菌的降酚酶活性,随着Ｌｙｓ浓度的降低各种抑制作用相应减弱,凤眼莲根分泌物氨基酸作为根际微生态系统的信息流,影响着该系统的降酚功能     

口服醋酸棉酚前后人精子体外受精能力及精核转变的细胞学观察

本文报道口服醋酸棉酚对人精子体外受精能力、原核及染色体形成的影响。结果表明,在口服醋酸棉酚前的9名男性精子对金黄地鼠卵的穿透率平均为62%。每日口服20mg醋酸棉酚15天后,精子对卵的穿透率下降至47%,30天后下降至24%,50天后下降至8%。即口服醋酸棉酚50天后达到了不再具有生殖能力的精子穿透率阈值(10%)以下。原核及染色体形成的观察表明,即使口服醋酸棉酚50天后,仍可见有完整原核的形成,并未见有明显的染色体畸变。综述上列结果,似乎表明口服醋酸棉酚虽可影响人精子对去除透明带金黄地鼠卵的穿透率,而进入卵内的精子仍可形成原核及染色体。因此,仅从成熟精子的生理功能而论,口服醋酸棉酚期间它似乎并不产生可察觉的致畸效应,这与醋酸棉酚对体细胞并无致畸作用的报道相一致。     

大鼠及羊精子在附睾成熟过程中ATP酶活力及其对棉酚敏感性的变化

大鼠及羊精子在附睾成熟过程中ATP酶活力发生明显下降,酶活力的变化形式存在着种间差异。大鼠附睾体及附睾尾精子的ATP酶相对活力分别为附睾头的55.7％及59.6％,而羊则为92.1％及59.8％。 大鼠及羊附睾各区域精子的ATP酶对棉酚抑制作用的敏感程度不同。在5μmol/L的低棉酚的浓度下,大鼠附睾头、体及尾部精子的ATP酶活力分别降至对照组的40.8％、62.7％及81.4％;当棉酚浓度增至40μmol/L时,羊附睾头、体、尾部精子的ATP酶活力才分别降至对照组的63.8％、83.7％及90.7％。作者提出如能使药物作用于附睾精子的敏感区域以干扰其成熟,可能是一条有发展前景的抗生育新途径。     

旋光异构体棉酚对精子脱氢酶的影响

本研究采用组织化学方法,比较了左旋(-)、右旋(+)及消旋(±)棉酚,对人和豚鼠离体精子以及喂服三型棉酚4或8周的大鼠精子五种脱氢酶(乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、异柠檬酸脱氢酶ICDH,甘油3-磷酸脱氢酶G3-PDH和α-羟戊酸脱氢酶VDH)的影响。并将酶活性用细胞光度计做了定量测定。体外实验结果表明:相同剂量的(一)棉酚与(+)棉酚相比,前者对酶活性、精子形态及线粒体结构影响更加明显。两种棉酚之间的酶活性改变有统计学意义。在体实验中,比较三型棉酚对动物健康状况、精子数量、活动率和形态变化的影响,发现(+)棉酚不是一种有效的抗生育制剂。 (±)和(一)棉酚在产生抑精效应的同时,(±)棉酚毒性较大,表现为动物体重下降,精子数量甚少。(一)棉酚具有两倍于(±)棉酚的抑精作用,是一种高效低毒的酚类化合物。本文还就线粒体结构损伤与酶活性改变的关系,以及棉酚的作用机理作了讨论。     

甲酸棉酚对奶牛精子的泳动及活率的影响

近几年已广泛地应用准弹性光散射方法研究微生物的泳动,此法采用He-Ne激光器作为单色光源,当激光束被移动的微粒散射时产生多普勒频移,然后根据所得到的频率谱进行分析,可以得到有关微粒运动的信息,本工作即用此法研究甲酸棉酚对奶牛精子的泳动及其活率的影响, 甲酸棉酚是从棉子中提炼出来的一种口服避孕药。我们将甲酸棉酚直接与奶牛精子接触,再用准弹性光散射方法研究它对精子活力的影响,以便探讨甲酸棉酚作用于精子的机     

棉酚对鼠类生精细胞LDH-X活性的影响

本文测定了连续饲喂棉酚达6周的大鼠和小鼠的生精细胞的LDH-X活性。结果表明,棉酚能够明显地抑制大鼠成熟精子的LDH-X活性;而对睾丸LDH-X活性的抑制,与对照相比,无显著性差异。在小鼠中,未发现棉酚对成熟精子及睾丸生精细胞中的LDH-X活性产生具统计学意义的抑制作用。本文结合精子发生过程及LDH-X的特殊功能,对棉酚抗生育作用的可能机理进行了讨论。     

高压静电场对绵羊精子存活率的影响

采用不同剂量的高压静电场处理绵羊精液,经分析发现,高压静电场对绵羊精具有激活作用。能提高绵羊精液品质,表现在适当剂量的高压静电场能显著地提高绵羊精子存活率,其中以６００ｋＶ／ｍ剂量处理效果最佳。１００ｋＶ／ｍ和３００ｋＶ／ｍ剂量对精子刺激不足,而９００ｋＶ／ｍ剂量则对精子刺激过程,导致部分精子损伤和死亡,同样达不到预期的效果。     

萘及其衍生物对普通小球藻的毒性效应

本文研究了萘及其衍生物(萘、1-萘酚、2-萘酚和1-萘胺)对普通小球藻的生长、叶绿素含量、光合强度和呼吸强度的影响。萘、1-萘酚和1-萘胺在低浓度下能促进普通小球藻的生长,高浓度则抑制藻的生长;2-萘酚在实验浓度下都抑制藻的生长。萘、1-萘酚、2-萘酚和1-萘胺的96hEC_(50)分别为98.06、11.87、13.39和6.95mg/L。萘及其衍生物对叶绿素含量和光合强度的影响比对生长的影响强,而对叶绿素含量的影响又比对光合强度的影响强。可以这样认为:萘及其衍生物对普通小球藻生长的抑制是通过抑制藻叶绿素a的形成,进而降低光合强度实现的。低浓度的萘和1-萘酚增强普通小球藻的呼吸强度,而高浓度则减弱;与此相反,低浓度的2-萘酚对藻的呼吸强度影响不大,高浓度能显著增强;在实验浓度下的1-萘胺使藻呼吸强度明显减弱,但随着时间的推移,呼吸强度出现回升,且高浓度回升较快。     

棉花籽抗生育的研究

分别以脱壳棉籽粉、粗制生棉油、棉籽粉抽提物和纯棉酚,喂成年雄性大白鼠4周,普遍发现在大白鼠的输精管和附睾尾部的精子死亡、精子数目减少并出现畸形;部分大白鼠的睾丸曲精细管呈局部退化,精子发生受到抑制。有不少例子,特别是粗制生棉油灌胃2个月的大白鼠出现附睾炎症(囊肿样结节),在贮有死亡精子的附睾管中吞噬细胞十分活跃。此外,棉籽粉和棉酚对大白鼠显然具有毒性,因棉籽粉或棉酚引起中毒的一般症状表现为食欲减退,生长减慢或停滞,当给以大剂量时可使大白鼠死亡。棉籽粉抽提物不含棉酚的部分,没有抗生育效应也无明显毒性。当停喂棉籽粉、粗制生棉油或棉酚3周后,在大白鼠的输精管里又出现活动的精子。1个月之后,精子的活力正常,合笼的结果和精液检查的结果一致,停药不到1个月,只有少数雄鼠有交配行为,雌鼠不受胎或受胎率很低。停药1个月,有交配行为的雄鼠增加,生殖能力部分恢复。1个月以上,多数雄鼠的生殖能力复原。根据观察可以得出如下结论,棉酚是棉籽或棉籽油中唯一的抗生育有效成分,同时也是一种对动物有毒性的物质。棉酚的毒性和使用的剂量有关。小剂量棉酚不会引起严重的影响但具有抗生育效果。对棉酚抗生育的作用环节、引起精子死亡的原因和毒理以及因食用粗制生棉油导致男性不育症等方面进行了初步讨论。     

棉酚甲酸对金鱼精子质膜的影响

利用冷冻断裂-蚀刻制样技术,在超微结构水平上研究了棉酚甲酸对金鱼精子质膜内蛋白颗粒排列图式(包括晶格区)的影响.结果表明,棉酚甲酸能够使金鱼精子质膜内蛋白颗粒分布不匀:或者颗粒聚集成团,或者质膜内出现无颗粒区域;并且还能使质膜内特定部位晶格区的颗粒排列发生混乱.这些变化表明棉酚甲酸能使精子质膜的有序性降低,也即增加了质膜的流动性.     

用双相电泳技术分析棉酚对大鼠成熟精子蛋白质组成的影响

本文首次将双相电泳(等电聚焦和SDS电泳)技术应用于对棉酚作用机理的研究。实验结果表明,棉酚能够改变大鼠成熟精子的蛋白质组成;同时也证明,双相电泳这一技术对棉酚的研究是有效的。     

用CTC荧光染色法检测添加肝素对牛精子体外获能的影响

本试验在TALP液中添加不同浓度(0、20、40、80μg.ml-1)的肝素对牛精子进行获能,用CTC染色检测精子获能状况,探讨肝素浓度及诱导时间(1、3、6、9h)对牛精子体外获能的影响。结果显示:随着肝素浓度的提高,精子获能效果增强,3 h达到最高,但添加80μg.ml-1的肝素精子的顶体反应率低于其他组。结果表明:在TALP液中增加高浓度的肝素对精子体外获能有促进作用,用高浓度的肝素获能处理3h后的精子进行体外受精可能会得到较好的效果。     

羊精子表面的凝集素标记特征

用辣根过氧化物酶标记的蓖麻凝集素和伴刀豆素Ａ,对绵羊精子表面的凝集素标记特征进行了观察。蓖麻凝集素在睾丸内精子的顶体区有中等强度标记,尾部有弱标记,在附睾内成熟时,顶体区标记逐渐增强,尾部的标记消失,获能后标记强度则明显减弱。伴刀豆素Ａ的标记在睾丸内的精子仅限于顶体区,随着在附睾内成熟,顶体区的标记增强,尾部也出现弱的标记,获能后有部分精子的标记强度有所增加。实验结果表明,羊精子在成熟过程和获能过程表面糖复合物发生明显修饰。     

棉酚对Jurkat T细胞增殖与凋亡的影响

研究棉酚(gossypol)对Jurkat T细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.将不同浓度的棉酚作用于Jurkat T细胞,用MTS比色法检测细胞存活率;以膜联蛋白V-PE染色分析细胞凋亡;用Hoechst33342染色观察核形态:用荧光染料Mitocapture结合流式细胞术和激光共焦显微镜检测线粒体跨膜电位变化.结果显示棉酚作用Jurkat T细胞24 h、48 h、72 h,其IC50值分别为77.2μmol/L、57.3 μmol/L、23.3 μmol/L,对细胞的抑制作用与药物存在时间-剂量依赖关系;终浓度为8、16、32 μmol/L的棉酚处理24 h后的细胞凋亡率分别为5.30%、15.20%、51.19%,对照组凋亡率为3.43%;高浓度棉酚作用后大量细胞核呈现染色质固缩、核碎裂和致密浓染等凋亡特征;随着浓度增加细胞线粒体跨膜电位明显降低.研究表明棉酚能有效抑制Jurkat T细胞增殖和诱导其发生凋亡,并呈现出时间-剂量依赖关系,其诱导凋亡的作用可能依赖于线粒体途径.     

棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P—450单加氧酶活性的影响

以人工饲料添加测定了0．5％的棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P－450单加氧酶（简称P－450酶系）活性的影响。研究结果显示,在测定浓度下,高龄棉铃虫短期取食含棉酚和烟碱的人工饲料后,对幼虫的生长没有显著影响,由此表明,棉铃虫对其主要寄主植物中的次生物质棉酚和烟碱具有很好的适应能力。与此同时,棉铃虫中肠微粒体P－450酶系的蛋白组成和酶活性发生了不同的变化,有升有降,有的没有变化。棉铃虫可能通过调整P－450酶系的各种蛋白含量和酶的活力水平,来适应对植物次生物质的代谢解毒的需要。另外,棉铃虫取食棉酚和烟碱后,细胞色素B5含量均显著提高,而细胞色素P－450含量均显著降低,细胞色素B5在棉铃虫对棉酚和烟碱的解毒代谢中可能发挥着更为重要的作用。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅰ.附睾结扎的实验分析

为了分析棉酚影响大白鼠精子的作用部位,在灌服棉酚后不同时间作一侧或两侧附睾结扎手术。第Ⅰ组,结扎了19只用药21天的大白鼠的输出管、附睾中段和输精管;第Ⅱ组,在12只用药14天的大白鼠做了同样的手术;第Ⅲ组,结扎了10只用药12天、停药7天的大白鼠附睾中段和输精管;第Ⅳ组是施行类似手术的正常大白鼠,分别作为用药组的对照。各组均在手术后第7天检查分隔在附睾不同部位的精子的活动能力。结果发现:在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中,附睾中段结扎部位上的精子都死亡;在第Ⅱ组中,8例结扎侧的附睾尾部和输精管里留有很多活动的精子,这种情况在第Ⅰ组中也有少数几例;在第Ⅲ组,附睾头段的精子能够活动但有较多的畸形;对照组的大白鼠附睾中段结扎部位上虽有少数死精子,但大部分精子运动良好,附睾尾部精子保持正常运动和头-头型凝集现象。这一结果表明,棉酚抗生育的作用部位不在附睾而是在睾丸内。对于棉酚影响精子发生后期的可能性进行了讨论。