鬼臼类植物产鬼臼毒素内生真菌的筛选

从桃儿七(Sinopodoph yllum hexandrum)、南方山荷叶(Diphylleia sinensis)和川八角莲(Dysos-ma veitchii)中分离到92株内生真菌,其发酵提取物经TLC、HPLC,结果表明,6株内生真菌能产鬼臼毒素,占总分离菌株数的6．5％。桃儿七、南方山荷叶和川八角莲内生真菌中产鬼臼毒素菌株占各供测菌株的7％,3％和10％。     

西藏八角莲的化学成分研究

八角莲属植物为我国所特有 ,约 1 2种 1变种 [1,2 ] ,西藏八角莲 (Dysosma tsayuensis Ying)仅产于西藏东南部 ,海拔 2 5 0 0～ 3 5 0 0 m的高山松林下或云杉林下 ,为藏药奥毛塞 (音译 )代用品 ,其根与根茎有活血、止血、解毒、消肿功效 ;用于治疗腰腿疼痛、咳喘、心胃痛、跌打损伤。其化学成分研究未见报道。1　实验部分1 .1　实验仪器与材料熔点用 X- 4型显微熔点仪测定 (温度计未校正 )。红外光谱用 Perkin- Elmer983型红外光谱仪测定 ,KBr压片。紫外光谱用 Shimadze UV- 3 0 0 0紫外可见分光光度计测定 ,核磁共振谱用 Bruker ARX-…     

鬼臼毒素涂膜剂治疗子宫颈HPV 感染的疗效观察

目的:了解鬼臼毒素涂膜剂治疗子宫颈HPV感染的疗效。方法:126例临床诊断证明为子宫颈HPV感染的患者,随机分为两组,试验组63例采用0.5%鬼臼毒素涂膜剂治疗,对照组63例单独采用0.5%鬼臼毒素酊治疗。结果:①痊愈率:试验组与对照组的痊愈率分别为90.5%、73.00%,两组比较具有统计学学差异(P<0.05);②复发率:试验组与对照组第12、24周的复发率分别为9.52%、28.57%和9.52%、36.51%,两个时段的两组比较均具有统计学差异(P<0.05);③不良反应:经随访观察,两组发生了红斑、水肿、灼热、疼痛、瘙痒、溃疡、渗出等不良反应,其中两组比较试验组红斑、水肿、溃疡、渗出的发生率低于对照组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:鬼臼毒素涂膜剂能有效治疗子宫颈HPV感染,并控制复发,副作用小,比采用鬼臼毒素酊治疗的效果好。     

产生鬼臼毒素菌株的诱变选育

目的:提高原始菌株鬼臼毒素的产量,以期组织工业化生产,从而扩大鬼臼类化合物的资源。方法:以交链孢霉Ty为研究对象,进行紫外线和He-Ne激光复合诱变,再对所获得高产菌株进行发酵条件的优化。结果:筛选到一株鬼臼毒素高产菌株Ty4-16-13,产量达4.213μg/L,比原始菌株提高96%。结论:诱变后的菌株经7次传代,产量较稳定,可用于工业化生产。     

侧链含有鬼臼毒素高分子抗癌药物的合成

分别用可溶性淀粉,羧甲基纤维素钠和甲壳胺为载体与鬼臼毒素合成了三种侧链含有鬼臼毒素高分子抗癌药物。在pH7.4的缓冲溶液中对鬼臼毒基羰甲基淀粉,鬼臼毒基羰甲基纤维素和鬼臼毒基羰甲基甲壳胺的体外水解释放进行了考查。     

响应面法优化南方山荷叶中鬼臼毒素的提取工艺

鬼臼毒素（Podophyllotoxin）是一种常用的临床天然药物。本研究以鬼臼类药材南方山荷叶（Diphylleia sinensis H.L.Li）为材料,以提取物中鬼臼毒素的含量为控制指标,应用响应面法优化南方山荷叶中鬼臼毒素的提取工艺。采用高效液相色谱法测定提取物中鬼臼毒素的含量,在单因素实验筛选的基础上,选择出对鬼臼毒素提取率影响较大的3个因素：乙醇浓度、提取温度和提取时间,然后利用Design-expert软件设计3因素3水平响应面实验,最终获得鬼臼毒素提取率最高时的提取条件为：乙醇浓度48.18%、提取温度62.66℃、提取时间16.15 h,此时鬼臼毒素的理论提取率可达7.636%。进一步对该条件进行实验验证,3次实验平均值为7.54%,与理论值差异较小,表明该模型拟合良好,实验方法可靠。     

脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊的毒力及几种酶系的影响

采用药膜法测试了脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊Periplaneta americana初孵若虫的触杀活性,并测定了其对成虫中枢神经系统乙酰胆碱酯酶（AChE）和腺苷三磷酸酶(ATPase)离体活性的影响。结果表明：脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊初孵若虫具有较强的毒杀活性,在接触时间24、48、72和96 h 的LC₅₀分别为26.26、4.68、1.51和0.62 μg/cm²;其对AChE没有明显影响; 对Na⁺ -K⁺ -ATPase有明显抑制作用,并存在浓度 效应关系,IC₅₀为44.9 μmol/L; 对Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase表现出低剂量激活,高剂量抑制的现象。结果提示美洲大蠊的AChE不是脱氧鬼臼毒素靶标,而ATPase可能是脱氧鬼臼毒素的重要靶标之一。     

鬼臼毒素及其衍生物生物合成研究进展

鬼臼毒素(Podophyllotoxin,PTOX)是来源于中药八角莲、山荷叶和桃儿七等鬼臼属植物的芳基四氢萘类木脂素。其化学半合成衍生物依托泊苷和替尼泊苷被用于多种癌症的临床治疗。作为天然产物来源新药创制的典型代表,鬼臼毒素目前依赖天然提取,供求矛盾日渐突出。生物合成具有不受资源限制、反应条件友好等优势,是鬼臼毒素及其衍生物生产的新方式。文中总结了鬼臼毒素在植物中的生物合成途径的研究进展,阐述了合成途径中关键酶的功能及其亚细胞定位,进而介绍了以模式植物烟草为底盘的鬼臼毒素合成生物学研究。最后总结了利用微生物对鬼臼毒素进行异源表达及生物转化的研究进展,以期为利用微生物细胞工厂高效合成鬼臼毒素及其衍生物提供参考。     

新疆圆柏化学成分研究

从新疆圆柏枝叶中分离得到9个化合物,经理化性质和光谱解析分别为扁柏双黄酮（hinokiflavone,1）、芹菜甙元（apigenin,2）、鬼臼毒素（podophyllotoxin,3）、苦松甙（coniferin,4）、肉豆蔻酸丙酯（propionic acetate myristic acid,5）、β-谷甾醇（β-sitosterol,6）、圆柏醇（sabinal,7）、反式璎珞酸（trans-communic acid,8）、蔗糖（sucrose,9）,其中化合物1～4为首次从该植物中提取分离得到.     

西藏八角莲与桃儿七根及根茎SSH文库的建立

以西藏八角莲(Dysosma tsayuensis Ying)和桃儿七[Sinopodophyllum hexandrum(Royle)Ying]为材料,构建其根及根茎的SSH文库,从中筛选鬼臼类植物属种间与鬼臼毒素生物合成相关的差异表达基因。从文库中随机挑取201个阳性克隆测序后得到183条ESTs。去除载体序列和冗余序列,聚类拼接得到17个西藏八角莲的unique ESTs。经BLAST同源比较和功能查寻,有功能注释的unique ESTs共12个,占70.6%,所编码的蛋白涉及光合作用、合成代谢、转录调控等功能;无功能注释和匹配结果的共5个,占29.4%。该研究成功构建了西藏八角莲和桃儿七SSH文库,为进一步揭示鬼臼毒素生物合成途径及其调控机制奠定了基础。