化香树果序总黄酮提取动力学研究

以化香树果序为原料,60%的乙醇水溶液为溶剂提取黄酮类化合物,在不同温度下对总黄酮的传质动力学进行了研究。采用平板模型,以Fick第二定律为基础,建立了化香树果序总黄酮提取的动力学方程,求得了速率常数、活化能、相对萃余率等一系列动力学参数。研究结果可为化香树果序总黄酮提取工程放大和深入理论研究提供一定的依据。     

美洲大蠊中枢DUM神经元的分离和电压门控Na+电流的记录

【目的】建立美洲大蠊Periplaneta americana中枢神经系统背侧不成对中间神经元（dorsal unpaired median neurons, DUM neurons）的分离方法和DUM神经元电生理实验模型。【方法】IA型胶原酶法消化美洲大蠊末端腹神经节, 机械吹打得到DUM神经元细胞, 运用膜片钳技术记录DUM神经元细胞电压门控Na+电流。【结果】分离得到的DUM神经元细胞状态良好, 具有DUN神经元典型的梨状形态和表面特征。以膜片钳全细胞方式记录到的Na+电流符合钠通道电流特征。【结论】IA型胶原酶消化得到美洲大蠊DUM神经元细胞的方法可靠, 能稳定地记录到Na+电流。本文描述的方法为昆虫神经细胞的电生理机制研究提供一个可用的实验模型。     

IP3Rs在GC-2std细胞中的表达及其增殖作用机制研究

目的:观察IP3Rs(1,4,5三磷酸肌醇受体)在GC-2std(GC-2)细胞中的表达情况并探讨IP3Rs在GC-2细胞增殖中的作用.方法:用RT-PCR检测IP3Rs在GC-2细胞以及在小鼠大脑,心肌,骨骼肌及睾丸中的分布情况.免疫荧光法检测IP3Rs在细胞中的分布及表达;MTT法检测不同浓度2-APB(IP3Rs拮抗剂)的作用下,IP3Rs对细胞增殖的影响,利用流式细胞术检测2-APB对细胞周期的影响.结果:IP3Rs的三种亚型在GC-2细胞中均有表达且在小鼠大脑、心肌、骨骼肌、睾丸等多种组织中广泛分布;免疫荧光实验亦表明IP3Rs分布于胞膜、胞质及核内.相差显微镜下观察,发现2-APB处理组比对照组细胞数量少.MTT实验结果亦表明:随着2-APB浓度的增加(5、25、100、200、400 uM),其吸光值呈浓度依赖性的减小,经统计学分析:25 uM浓度组即具有显著性差异(P＜0.05)且EC50=92.0114.流式细胞结果显示:与对照组比较,100uM 2-APB处理组细胞处于S期、G2期的数目增多.结论:IP3Rs在GC-2细胞及小鼠多种组织中表达,与细胞的增殖密切相关,可能与其参与调节细胞周期有关.     

长江流域水牛血液蛋白多态性研究

采集长江流域德昌、涪陵、江汉、滨湖和海子5个水牛地方品种共416 头牛的血样。电泳检测血红蛋白、血清运铁蛋白多态性,估算各等位基因频率及基因型频率,根据Hb及Tf两个位点的基因频率进行聚类分析。结果表明,5个水牛地方品种间遗传变异较小,其亲缘关系较近。     

介绍一种从蔬菜中培养和分离变形虫的简易方法

变形虫是寄生虫学及生物学教学中不可缺少的实验材料,为了让学生在实验中随时能见到变形虫的运动,二十多年来,我们花了不少人力物力,使用过不同方法培养变形虫,但都未能获得满意结果。近年来,经过反复实践,我们从小白菜、蕹菜、苋菜、莴苣叶及豆芽、冬瓜等十五种蔬菜中培养出自由生活的变形虫,并进行了分离,得到了变形虫的纯培养。较以往报导的方法更为简便易行,所得的纯培养变形虫密度高而稳定,可以长期保种,便于随时为教学提供变形虫滋养体的活标本。一、培养材料及用具:洁净的小烧杯、载玻片、冷开水、米粉及蔬菜。二、培养方法:1.原培养…     

脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊的毒力及几种酶系的影响

采用药膜法测试了脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊Periplaneta americana初孵若虫的触杀活性,并测定了其对成虫中枢神经系统乙酰胆碱酯酶（AChE）和腺苷三磷酸酶(ATPase)离体活性的影响。结果表明：脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊初孵若虫具有较强的毒杀活性,在接触时间24、48、72和96 h 的LC₅₀分别为26.26、4.68、1.51和0.62 μg/cm²;其对AChE没有明显影响; 对Na⁺ -K⁺ -ATPase有明显抑制作用,并存在浓度 效应关系,IC₅₀为44.9 μmol/L; 对Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase表现出低剂量激活,高剂量抑制的现象。结果提示美洲大蠊的AChE不是脱氧鬼臼毒素靶标,而ATPase可能是脱氧鬼臼毒素的重要靶标之一。     

BDNF RNA干扰在多巴胺能PC12细胞凋亡中的作用研究

目的：探讨脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）在PC12细胞凋亡中的作用。方法：设计并合成针对BDNF mRNA序列的小片段干扰RNA（siRNA）,利用lipofectamine 2000将siRNA转染入PC12细胞中或给与6-OHDA损伤,给与/不给予BDNF蛋白保护,采用定量PCR和免疫荧光法检测BDNF mRNA和蛋白表达水平;采用上清液乳酸脱氢酶（LDH）释放量测定和流式细胞仪法检测siRNA对细胞凋亡的影响。结果：转染siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达量比正常组细胞减少73%,而转染作为对照的scrambled siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达没有明显变化。BDNF RNA干扰与6-OHDA神经毒性一样可诱导PC12细胞的LDH释放和细胞凋亡。给予BDNF蛋白保护后细胞毒性减轻。结论：BDNF基因下调可以导致PC12细胞的凋亡,BDNF蛋白对PC12细胞有保护作用,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。     

恒河猴与食蟹猴微卫星DNA多态性的比较分析

目的分析恒河猴和食蟹猴群体间的遗传多样性,确立一种对恒河猴和食蟹猴种群个体的遗传鉴别方法。方法利用聚合酶链反应（PCR）扩增技术采用15个多态性微卫星DNA位点对50只恒河猴和50只食蟹猴个体进行了DNA多态性的分析,对比两群体间等位基因数目差异。结果筛选的15个具有显著多态性的微卫星DNA位点对恒河猴和食蟹猴种群可以进行DNA多态性分析,其等位基因数目均在7个以上,且两群体间有11个位点的等位基因数存在一定的差异。结论利用这些多态性微卫星DNA位点建立一种有效鉴别恒河猴和食蟹猴种群遗传背景的方法具有一定的可行性。     

北京市6-13岁儿童维生素A营养水平及影响因素

目的：了解北京市6~13岁儿童维生素A营养水平及影响因素。方法：于2017年采用多阶段分层抽样对北京市982名6~13岁儿童进行调查,分析血清维生素A水平与食物种类、视黄醇活性当量摄入量、血生化指标、体格等指标的关联。结果：血清维生素A缺乏率和边缘缺乏率分别为0.10%、10.5%;膳食维生素A摄入量低于平均需要量的比例为71.6%（以视黄醇活性当量计）;血清维生素A水平与年龄、BMI、血红蛋白水平、铁蛋白水平、蔬菜摄入量存在显著正相关（P<0.05）,与超敏C反应蛋白存在显著负相关（P<0.05）。结论：北京市6~13岁儿童维生素A整体缺乏率较低,但仍有部分儿童处于边缘缺乏状态。膳食维生素A摄入量按视黄醇活性当量计算不能满足膳食营养素推荐供给量的风险高,蔬菜摄入量可能是血清维生素A水平的影响因素之一。     

食蟹猴微卫星DNA标记遗传监测及多态性分析

目的研究国内食蟹猴种群的遗传背景特性,建立食蟹猴种群遗传质量监测方法。方法采用微卫星DNA遗传标记技术对50只食蟹猴种群个体进行遗传质量监测及DNA多态性分析。结果从100个微卫星DNA位点中筛选出20个多态性高的位点,其食蟹猴种群个体的等位基因数目为5-10条,个体间均呈现高度的多态性;其观察等位基因数（Na）为5.0～10.0,有效等位基因数（Ne）为4.6118～8.3404,基因多样性（H）为0.7832～0.8801和香隆信息指数（I）为1.5651～2.1592。结论本实验有效地分析了食蟹猴种群的遗传多态性,为今后筛选特异性微卫星位点来建立食蟹猴种群遗传质量监测方法提供了理论依据。