全文获取类型
收费全文 | 1108篇 |
免费 | 54篇 |
国内免费 | 381篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 13篇 |
2022年 | 15篇 |
2021年 | 17篇 |
2020年 | 14篇 |
2019年 | 14篇 |
2018年 | 18篇 |
2017年 | 17篇 |
2016年 | 13篇 |
2015年 | 19篇 |
2014年 | 51篇 |
2013年 | 38篇 |
2012年 | 34篇 |
2011年 | 51篇 |
2010年 | 41篇 |
2009年 | 57篇 |
2008年 | 50篇 |
2007年 | 63篇 |
2006年 | 52篇 |
2005年 | 71篇 |
2004年 | 64篇 |
2003年 | 67篇 |
2002年 | 57篇 |
2001年 | 55篇 |
2000年 | 60篇 |
1999年 | 60篇 |
1998年 | 45篇 |
1997年 | 58篇 |
1996年 | 81篇 |
1995年 | 76篇 |
1994年 | 74篇 |
1993年 | 67篇 |
1992年 | 43篇 |
1991年 | 30篇 |
1990年 | 23篇 |
1989年 | 12篇 |
1988年 | 2篇 |
1987年 | 5篇 |
1986年 | 2篇 |
1985年 | 4篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
排序方式: 共有1543条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
具有重要应用价值的真核表达系统 总被引:4,自引:1,他引:3
基于T7RNA聚合酶与T7强启动子(Φ10)间的特异认识而建立起来的偶联表达系统在大肠杆菌中已取得了令人满意的结果。最后,该系统在酵母、昆虫、浦乳动物细胞和植物细胞中陆续实现了高效表达。T7NRA聚合酶-Φ10启动子偶联表达系统的相对独立性和高效性,不仅预示着该系统可以在真核基因工程中发挥重要作用,而且其独特的作用机制为人们探索新的特异高效真核表达系统提供了一个可供借鉴的模式。 相似文献
3.
介绍一种在对PCR产物进行定向克隆之前先用T4DNA聚合酶将PCR产物末端进行补齐,然后进行限制性酶切和克隆,能显著提高克隆效率的新方法。 相似文献
4.
2012年在云南省南部中老缅边境地区采集的库蚊中分离到3株病毒(YN12039、YN12040、YN12060),该病毒只引起C6/36细胞发生病变。负染电镜观察病毒颗粒呈球形,直径60~80nm,有囊膜,表面有刺突。采用RTPCR方法对分离株的RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA-polymerase,RdRp)、HEL1(superfamily 1helicase)、S蛋白(spike protein)基因进行扩增,同源性分析显示3株云南新分离株与Nam Dinh病毒(NDiV)RdRp、HEL1、S蛋白氨基酸序列相似度最高,均为98%以上。系统进化分析结果表明,3株云南新分离株与NDiV的亲缘关系最近,处于同一进化分支。该研究结果丰富了NDiV病毒的信息,对NDiV病毒分子特征、分布区域和物种嗜性等特征提供了数据参考。 相似文献
5.
6.
7.
8.
9.
催化吲哚生成靛蓝的细胞色素P450BM-3 定向进化研究 总被引:6,自引:0,他引:6
以催化吲哚产生的靛蓝在 630 nm 处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于 Bacillus megaterium 的细胞色素 P450BM-3 单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得了三个高于亲本酶的突变酶,突变酶的酶活分别是亲本酶的 6.6 倍 (hml001) , 9.6 倍 (hml002) 和 5.3 倍 (hml003) ,并对突变酶的动力学参数进行了分析 . 突变酶 DNA 测序的结果表明, hml001 含有一个有义氨基酸置换 I39V , hml002 含有三个有义氨基酸置换 D168N , A225V , K440N , hml003 含有一个有义氨基酸置换 E435D ,这些突变位点有些远离底物结合部位,有些位于底物结合部位 . 相似文献
10.
辣根过氧化物酶同功酶C3基因在毕赤酵母中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:克隆与表达辣根过氧化物酶同功酶C3(HRPC3)基因。方法:用PCR方法从辣根的总DNA中,扩增得到一种辣根过氧化物酶同功酶C3基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,再将目的基因正确插入到巴斯德毕赤酶母表达载体pPIC9K中,含有目的基因的重组pPIC9K质粒在毕赤酶母中进行表达与分析。结果:应用毕赤酶母作为受体菌,成功表达了HRPC3基因,其活性为56IU/L。结论:毕赤酶母直接表达出了具有生物活性的辣根过氧化物酶同功酶C3。 相似文献