兰科药用植物手参种子的真菌共生萌发

手参Gymnadenia conopsea是一种地生型兰科植物,是我国的传统中药,同时也是蒙药、藏药常用药,在西藏地区亦作食用。现代药理学研究表明手参具有非常好的药理活性,然而当前手参还不能进行人工栽培,市场需求完全依赖野生资源,因此资源短缺仍然是制约该种药用植物进一步开发利用的瓶颈。兰科植物种子萌发及早期的幼苗生长均需真菌参与,基于此,本文从手参根系中进行了真菌分离,并获得一株菌株,分子鉴定为角担菌属Ceratobasidium GS2。将GS2菌株与手参种子进行共培养,可明显促进手参种子的原球茎的形成并最终分化成幼苗。手参种子共生萌发的成功对于实现手参的种质保育、人工栽培和野生居群的生态恢复均具有重要的意义。     

西藏虎头兰高效植株再生体系的研究

为建立西藏虎头兰(Cymbidium tracyanum)的高效快速繁殖体系,该研究以野生西藏虎头兰种子为外植体,通过分析不同基本培养基和植物激素配比对原球茎诱导、增殖和分化的影响,以及光照时间和培养温度对试管苗生长的影响,筛选出适宜西藏虎头兰植株高效再生的条件。结果表明:适宜西藏虎头兰生长的基本培养基为1/2 MS;种子萌发和原球茎诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0. 5 mg·L~(-1)NAA,培养50 d后,有95.00%的种子发育成原球茎;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+2.0 mg·L~(-1)NAA,培养30 d,增殖倍数为4.25;原球茎的最适分化培养基为1/2 MS+2.0 mg·L~(-1)NAA+60 g·L~(-1)土豆泥+0.5g·L~(-1)活性炭,培养10 d,不定芽发生率为98.33%,培养40 d,幼苗生根率为94.67%;试管苗在温度20℃、光照时间12 h·d~(-1)、光照强度2 000 lx的条件下培养,苗长势好,叶片生理性焦尖发生率仅为3.33%;以腐殖土作为栽培基质,试管苗的移栽成活率为97.78%。该研究结果为保护西藏虎头兰野生资源和工厂化育苗提供了科学依据和技术支持。     

大花杓兰的组织培养与快速繁殖

1 植物名称 大花杓兰（Cypripedium macranthum SW．）。 2 材料类别 种子。 3 培养条件 种子萌发与生长培养基：（1）Harvais（Harvais1982）＋6-BA 1．0mg·L^-1（单位下同）;（2）VWD（Van Waes和Debergh 1986）＋6-BA 1．0。原球茎分化培养基：（3）Harvais＋6-BA 0．5;（4）VWD＋6-BA 0．5。     

脱落酸处理对铁皮石斛类原球茎体耐脱水性的影响

脱落酸（abscisic,ABA）预处理可以显著提高铁皮石斛（Dendrobiumc andidum）类原球茎体（protocrom-like bodies,PLBs）的耐脱水性,其中以5μmol／L的ABA预处理24h效果最好．经2h快速脱水后,类原球茎体存活率约为对照的10倍,达到50％左右。预处理期间细胞相容性物质含量的研究表明,ABA预处理过程中可溶性总糖、蔗糖、可溶性蛋白质及脯氨酸含量均无明显变化,而可溶性多糖含量明显增加,作者认为可溶性多糖的积累是类原球茎体耐脱水性提高的原因之一。     

磷对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响

在确定了最适接种量和外植体细胞生理时间的基础上,研究了在不同起始磷浓度下,霍山石斛类原球茎生长、碳、氮消耗和多糖积累的动力学特性。以生长30d的类原球茎为材料,在接种量为100g/L时,类原球茎生长的最佳起始磷浓度为2.5mmol/L,培养36d时,类原球茎鲜重达496.5g/L。动力学分析表明,磷是霍山石斛类原球茎生长的限制性因素,胞内磷的积累水平与细胞生长具有相关性,2.5mmol/L的磷酸盐有利于碳、氮等营养物质的吸收;而多糖积累的最佳起始磷浓度为0.312mmol/L,培养36d时,其产量为2.22g/L。     

寒兰的快速繁殖技术

以寒兰(CymbidiumkanranMakino)根状茎为外植体,采用B5基本培养基,并附加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ(苯基噻二唑基脲-thidiazuron)和S-3307(优康唑-uniconazole),对类原球茎的诱导、继代增殖、分化、生根等进行研究。结果表明:诱导类原球茎的最佳培养基为B5 TDZ0.50mgL-1 NAA0.25mgL-1,诱导率98.3%;继代增殖的最佳培养基为B5 S-33071.0mgL-1 NAA0.2mgL-1 蔗糖3.5%,增殖系数9.4;类原球茎分化的最佳培养基为B5 S-33070.75mgL-1 6-BA1.0mgL-1 NAA0.4mgL-1,分化率87.8%;最佳的生根培养基为1/2B5 NAA0.2mgL-1 活性炭0.05%,生根率达100%。     

古巴兰的茎段原球茎诱导与植株再生的研究

试验以古巴兰幼嫩芽体为外植体,通过原球茎诱导途径,建立快速高效的古巴兰再生体系。结果表明：最适宜的诱导茎段和叶片原球茎的培养基分别为MS＋5．0mg／L6-BA＋1．5mg／LNAA和MS＋2．0mg／L6-BA＋1．5mg／LNAA;诱导出的原球茎在MS＋1．5mg／L6～BA＋0．5mg／LNAA培养基上继代最好;在MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA的培养基上能分化出不定芽苗;再生的植株在MS＋6．0mg／L6-BA＋1．0mg／LNAA的培养基上能实现增殖和复壮;最适宜的生根培养基为1／2MS＋0．1mg／LNAA。     

霍山石斛类原球茎二步法培养细胞生长和多糖合成的动力学研究

磷是调控类原球茎细胞生长和多糖积累的有效因素。为了获得较高的多糖产量,根据霍山石斛类原球茎生长和多糖积累的动力学特性,提出了二步培养方式,采用了补料策略,研究了其培养过程的动力学特性,并建立了相关模型。结果表明,采用二步法培养,生物量从28·7gDW/L提高到44·2gDW/L,多糖产量从1·86g/L提高到5·22g/L,多糖含量从6·4%提高到11·9%。建立的模型基本反映了类原球茎生长和多糖积累的动力学机制。     

文心兰原球茎液体增殖培养研究

以茎尖诱导形成的原球茎(protocorm-like bodies,PLBs)为外殖体,采用液体培养方式比较了不同浓度的激素配比、蔗糖浓度和添加不同量的新鲜椰汁对文心兰PLBs增殖的影响,并比较了相同培养基成分时液体培养PLBs增殖、分化成苗和固体培养PLBs增殖和分化成苗的差异。试验结果表明:不同浓度的外源激素及其配比对文心兰PLBs增殖生长影响较大,6-BA0.5 mg/L Ad 0.05 mg/L NAA0.05 mg/L的激素组合比较适合文心兰PLBs增殖;蔗糖浓度对文心兰PLBs增殖的影响也较大,适合文心兰PLB在液体培养条件下增殖的蔗糖浓度为7.5 g/L;添加5%新鲜椰汁不仅对文心兰PLBs增殖有促进作用,而且能改善PLBs的质量;适合文心兰PLBs增殖的培养基为MS 6-BA0.5 mg/L Ad 0.05 mg/L NAA0.05 mg/L 5%椰汁 蔗糖7.5 g/L。文心兰PLBs在5周内的增殖生长曲线呈倒"V"字形,第3周的增殖速度达最高峰,而固体培养基PLBs增殖速度较慢,生长曲线几乎成直线。液体增殖的PLBs分化成苗较固体培养增殖的PLBs差。     

大花蕙兰‘黄金小神童''胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

为解决大花蕙兰园艺品种‘黄金小神童’（Cymbidium Golden Elf ‘Sundust’）人工繁育周期长、系数低等问题,该研究以其侧芽茎尖为外植体,在1/2MS+1.0 mg·L^-1 NAA+50 g·L^-1香蕉泥+15 g·L^-1蔗糖中培养60 d后,以获得的愈伤组织与原球茎混合物为材料,通过L₉ （3）⁴正交与完全组合实验研究不同因素及组合对‘黄金小神童’胚性愈伤组织和原球茎发生及增殖的影响,进而建立‘黄金小神童’高效、稳定的丛芽增殖和植株再生体系。结果表明：（1）在MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+150 mL·L^-1椰汁+20 g·L^-1蔗糖中,培养70 d后增殖系数达8.13,同时可获得桑葚状原球茎团。（2）原球茎团在MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 NAA中培养70 d后,原球茎发育为幼芽,丛芽发生系数可达5.36;此...