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1.
我们设计了一种新的传代方法,在传代之前,先用 DispaseⅡ酶,将培养的表皮细胞片整个消化下来,再用0.25—0.3%胰酶冷消化将表皮细胞驱散,进行1:2传代获得成功,传代59次成功率为71.2%。若在培养后7—16天传代,成功率可达80%。本文讨论了此种传代方法比单纯用胰蛋白酶或用胰蛋白酶和EDTA 混合传代方法优越。 相似文献
2.
3.
在长达50年的研究过程中,人工子宫在3个层面(人工保育箱、人工子宫人和人工胎盘)上被探讨。日本的Yoshinori Kuwabara教授和美国的刘鸿清(Liu Hung-Ching)教授在人工子宫和人工胎盘领域取得了引人注目的成果。重点介绍两位研究者的成果,并讨论了人工子宫研究存在的问题和可能的解决方案,以及人工子宫研究对人类伦理道德的可能冲突。 相似文献
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7.
InvttroPropagationandGermplasmResourcesConservationofAzollaSHUIMao-Xing,MAOMet-Fei,CHENDe-Fu,LIZhuo-Xin(S0d乙.PlertdlzerInddme,Zhej。gAfxFw77lv叶Agri‘?1,Lll,Tal,Bhathe310021)1植物名称满江红8个品种:AHXt(fd。?1-o:)uws、A。。…帅、A。。rof。。tana、A,。伽a、A·mexl‘?,zna、AnndZ‘:j,z、Aplnnata、Aif)l‘)ricata。2材料类别带5~8幼叶的茎尖。3培养条件培养基(自行设计,定名浙农9401)为无机盐(mg·L卜:NaH。PO;·ZH。O100\K2504SO、CSC1256、MgSO;·7… 相似文献
8.
羊驼体内存在天然缺少轻链的重链抗体,克隆重链抗体可变区(VHH),即可构建单域抗体(single-domain antibodies,sdAbs),又称纳米抗体(nanobody,Nb)。利用非免疫羊驼噬菌体文库筛选肿瘤特异性蛋白B7-H4的纳米抗体,经过4轮淘选,ELASE鉴定阳性克隆噬菌体,测序获得其DNA序列后体外转录为mRNA,将修饰纯化后的mRNA转染到肿瘤细胞,利用细胞免疫荧光检测mRNA在肿瘤细胞内是否表达,Western印迹进一步验证其表达情况;通过CCK-8法鉴定其对肿瘤细胞的增殖抑制能力;划痕实验鉴定其对肿瘤细胞迁移能力的影响;Transwell法鉴定其对肿瘤细胞的侵袭能力的影响;裸鼠荷瘤模型瘤旁注射mRNA,鉴定其在体内实验对肿瘤组织的作用。结果显示,通过淘选获得1个高亲和性的噬菌体株菌H6;DNA测序并导出的氨基酸序列符合羊驼纳米抗体结构;将其mRNA导入肿瘤细胞,能有效表达出纳米抗体H6;转染H6-mRNA的肿瘤细胞(0.84±0.08)与未转染H6-mRNA的对照组(1.83±0.04)相比,其增殖能力明显受到抑制,P<0.01,其迁移和侵袭能力(78.60±5.36)明显低于空白对照组(197.80±21.04),效果优于B7-H4 mRNA的siRNA(95.40±16.56);在裸鼠乳腺癌模型中能有效抑制肿瘤生长,效果优于紫杉醇和B7-H4 mRNA的siRNA。这说明筛选所得抗B7-H4纳米抗体H6能特异结合B7-H4蛋白并封闭其功能,导致肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。该结果为利用B7-H4作为治疗癌症的靶点提供了实验基础。 相似文献
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