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酿酒酵母菌核糖体RNA沉降系数的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究酿酒酵母菌核糖体RNA(rRNA)的沉降系数,用酶解法和液氮研磨法裂解酿酒酵母菌的细胞壁,Trizol Reagent提取其总RNA,同时提取小白鼠和斑马鱼的总RNA进行比较.经紫外分光光度计检测和甲醛琼脂糖变性胶电泳后,RNA纯度好,条带清晰,无弥散或降解现象.试验发现,与酶解法相比,用液氮研磨法破碎酿酒酵母菌细胞壁提取总RNA所用的成本低,时间少,产率和纯度高,适用于少量样品RNA的提取.同时,酿酒酵母菌与斑马鱼和小白鼠总RNA电泳图谱表明,三者的"18S rRNA"在条带大小方面差异较小,而"28S rRNA"差异较大.利用分析型离心机测得的酿酒酵母菌两个较大rRNA的沉降系数分别为24.7S和18.1S.研究结果表明了真核生物rRNA种类的多样性. 相似文献
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染色体组倍性鉴定是马铃薯种质资源评价的重要内容,流式细胞仪能够快速、准确地对细胞核DNA含量进行测定,从而广泛用于检测植物染色体组倍性。建立适于马铃薯倍性鉴定的高通量流式细胞术体系,对马铃薯育种工作提供依据。以20份马铃薯合作88孤雌诱导后代为材料,用液氮研磨法制备叶片细胞核悬液,并将其与传统刀片切碎法制备的细胞核悬液进行比较,对已知四倍体马铃薯合作88和二倍体马铃薯IVP101进行染色体倍性测定,结果发现这两种方法在倍性测定结果之间无明显差异,但是液氮研磨法操作简单、耗时少。基于液氮研磨法的流式细胞术可快速、准确检测其倍性。另外,在液氮研磨法中,对细胞核悬液染色时间的长短(从15 min到12 h)并不会影响倍性测定结果,从而方便研究人员在实际操作中灵活选择染色时间。 相似文献
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一种高效提取真菌总DNA的方法 总被引:14,自引:2,他引:12
<正>在真菌的分子生物学研究中,快速高效地提取质量优良的DNA有着重要意义。目前使用的真菌DNA提取方法步骤大体相似,主要差别在于采用何种方法来打破细胞壁这一关键环节。常用的破壁方法主要有冷冻干燥研磨法、玻璃珠机械破壁法、酶解法和氯化苄法等(吴志红2001)。通常冷冻干燥研磨法多用液氮来处理,一般是直接在液氮中研磨 相似文献
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浮游植物中叶绿素a提取方法的比较与改进 总被引:69,自引:4,他引:65
对水质监测中叶绿素a的提取方法进行改进,采用反复冻融-浸提方法提取叶绿素a,即将过滤水样的滤膜于-20℃冰箱内和室温下反复冻融3~5次后,放进90%丙酮溶液中浸提20h。与标准方法中的研磨法对比,该方法具有人为误差小、稳定性好、结果准确及操作简单安全等优点,适合运用于常规的水质监测。采用该方法时过滤水量对湖水水样的测定结果有影响(P<0.01),对于纯微囊藻液影响不明显(P>0.05)。因此,在对不同叶绿素水平或营养水平的水体采样时,应注意水样的水量。通过方差分析表明该方法中采用醋酸纤维滤膜、微孔滤膜和玻璃纤维滤膜对结果没有显著影响,对这3种滤膜可以进行自由选择。 相似文献
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在做“叶绿体中色素提取和分离”实验时,试剂挥发严重,影响师生身心健康,污染实验室空气,实验结果不明显等问题困扰了很多中学生物学教师.尤其是丙酮挥发常常使得教师上完几节实验课会感到头晕。我们对研磨过滤器和研钵进行了不同方法、不同实验材料(干材料和鲜材料)的比较,比较后发现使用研磨过滤器大大减少了丙酮的挥发,试剂和材料的使用量也减少了,而且还省去了过滤的步骤,简化了实验;而且仪器中的配套产品点样器使用非常方便,可以避免毛细管使用中可能造成的一些问题,如伤到学生,点样不均匀影响实验结果等,利用层析瓶进行层析,只需将点好样的滤纸条放入已加入层析液的层析瓶中就可以直接观察实验结果了。 相似文献
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考马斯亮蓝G-250染色法测定柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白含量 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立快速、灵敏的蛋白质含量测定方法,对柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白质含量进行测定;方法:运用超声与研磨两种方法提取柠条锦鸡儿种子中的可溶性蛋白,采用考马斯亮蓝G-250染色法对其进行测定;结果:超声提取与研磨提取得到可溶性蛋白含量分别为6.91%、6.87%,RSD分别为0.72%,0.67%;结论:考马斯亮蓝G-... 相似文献
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龙虾胃肠神经系统的数值分析 总被引:2,自引:0,他引:2
利用抑制神经系统的WinnerLess Competition(WLC)模型,通过数值方法分析Mulloney型龙虾胃肠神经系统神经元的电位发放,得到胃研磨囊和幽门神经系统中各个神经元的电位发放和系统的节律变化。结果表明,胃研磨系统内神经元的发放规律显示两侧牙齿和中间牙齿出现切断、挤压和研磨食物等状态,幽门系统内神经元的发放规律显示幽门节律出现依次发放的三个部分。两个神经系统的数值结果,不仅解释了龙虾胃肠神经系统中神经元电位发放与肌肉运动的关系,而且理论再现了龙虾胃肠神经系统的节律变化和实验结果。 相似文献