微孔板改良法评价多种国内外单花蜜的体外抑菌活性

目的：开展国内外多种单花蜜体外抑菌活性差异的系统评价。方法：以无菌Mueller Hinton Broth培养基稀释得到3.75%～90%（w/v）不同浓度的单花蜜,采用96微孔板改良法,用空白无菌培养基和标准菌株作对照孔,测定18种单花蜜对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠埃希氏菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、迟缓期持续时间、对数期持续时间和最大细菌密度5个抑菌活性指标。结果：18种单花蜜均具有不同程度的抑菌活性,且抑菌生长曲线均优于标准菌株对照孔,延长了3种致病菌的迟缓期持续时间、缩短了对数期持续时间和降低了最大细菌密度,其中小茴香蜂蜜最低抑菌浓度为7.5%,最低杀菌浓度为15%,均优于麦卢卡蜂蜜。结论：96微孔板改良法灵敏、快速、客观、可直观显示不同的单花蜜具有抑菌活性差异,其中小茴香蜂蜜、葵花蜂蜜、椴树蜂蜜活性最为显著,本文为蜂蜜的功能评价与市场开发提供了科学依据。     

应用超声波六胺银法的改良法显示组织胞浆菌

应用超声波六胺银法的改良法显示组织胞浆菌,效果好,图像清晰,细菌的菌壁被染成深黑色,菌体中央为空白区,背景为淡绿色。①该法需时少,六胺银液的浸染时间仅需２０分钟左右,而原法则需７０～９０分钟。②由于浸染时间短,减少了杂质的沉淀,增加了背景的清晰度。原法浸染时间长,常可产生背景的杂质沉淀,影响结果的评判。③该法利用超声波的高频振谐下所作的缩张运动,加速了溶液中分子的运动速度,从而促进了切片的氧化过程,使菌壁的醛基更加完全彻底的暴露出来,有利于还原溶液中的硝酸银成为金属银,将细菌给予更好地显示出来、从最后的结果证明：它优于原法或ＰＡＳ法。     

一种改良宫颈鳞癌原代培养方法的建立

目的：探讨不同培养条件对宫颈鳞癌原代培养的可行性。方法：取确诊为宫颈鳞癌患者的活检或手术标本,通过对消化时间及重悬液量进行改良原代细胞培养,观察鳞癌细胞生长状况,并比较其与传统消化法的细胞生长率,免疫组化进行细胞鉴定。结果：消化时间为3小时,重悬液量为1ml时细胞生长率最高。改良法24小时细胞生长率为61．54％,传统消化法24小时细胞生长率为7．69％（x2=5．14,P〈0．05）。活检标本细胞生长率80％,手术标本3例无一例细胞生长。结论：采用消化时间为3小时,重悬液量为1ml成功建立了宫颈鳞癌原代培养方法,活检标本较手术标本更易培养成功。     

改良法克隆淋球菌特征核酸片段

目的：采用改良法克隆淋球菌特征核酸片段300bp到pBS.sk中,作为淋球菌检测试剂盒的阳性标本来源。方法：采用PCR扩增淋球菌特征核酸片段300bp,扩增条件：94℃30s,55℃1min,72℃1min,35个循环,另外用SmalI酶切,pBS,sk,与PCR产物采用改良法平端连接：连接温度14℃,72h,连接反应体积15μl,加10u SamlⅠ防止pBS.sk自连,连接完成后取5μl连接液转化200μlCaCl2制备的感受态受体菌JM109,用碱法提取重组子质粒,电泳比较质粒大小,PCR初筛,最后双酶切鉴定。结果：经过电泳比较质粒大小,PCR初筛,最后双酶切鉴定。结果：经过电泳比较质粒大小,PCR初筛,最后双酶切鉴定,得到5个克隆重组子。     

肥大细胞用甲苯胺蓝染色之体会

肥大细胞是存在于多种组织内的一类细胞 ,并因所在组织器官的不同而具有不同的功能。肥大细胞是抗感染免疫的第一线细胞 ,在疾病过程中具有重要作用 ,因此 ,研究肥大细胞的生物学性质具有重要的理论意义和广泛的应用价值。常用的肥大细胞染色方法有甲苯胺蓝染色法、阿尔辛蓝—番红染色法等。肥大细胞具有复杂的异质性 ,因此上述方法不仅难以全面反映其生物学特性 ,而且有时也难客观地反映其在组织中的分布。我们用改良的甲苯胺蓝染色法对食管、肠、子宫、乳腺等器官中的肥大细胞进行染色时得到了一点体会 ,供参考。甲苯胺蓝改良染色法 :根据…     

一种改良宫颈鳞癌原代培养方法的建立

目的:探讨不同培养条件对宫颈鳞癌原代培养的可行性。方法:取确诊为宫颈鳞癌患者的活检或手术标本,通过对消化时间及重悬液量进行改良原代细胞培养,观察鳞癌细胞生长状况,并比较其与传统消化法的细胞生长率,免疫组化进行细胞鉴定。结果:消化时间为3小时,重悬液量为1ml时细胞生长率最高。改良法24小时细胞生长率为61.54%,传统消化法24小时细胞生长率为7.69%(x2=5.14,P<0.05)。活检标本细胞生长率80%,手术标本3例无一例细胞生长。结论:采用消化时间为3小时,重悬液量为1 ml成功建立了宫颈鳞癌原代培养方法,活检标本较手术标本更易培养成功。     

布鲁氏菌变态反应原的研究——2.新制菌素的敏感性和化学成分

我们用牛、羊、猪三个种的布鲁氏菌弱毒菌种,分别制出牛、羊、猪及三个种混合的4种菌素,发现猪种菌素致敏性较强,又用猪种菌作短期(4和7天)间歇振荡培养和长期(14和28天)静止培养,制出另外4种菌素。生化检测这8种菌素的总氮量和蛋白量相近。还观察到用牛、羊、猪三个种布鲁氏菌分别致敏豚鼠,皮肤试验结果未见有明显差别。     

样品预处理对HCV-cAg酶联免疫吸附试验特异性的影响

目的:探讨血液样品预处理后对控制酶联免疫吸附试验中假阳性的效果.方法:向稀释血清样品中加入适量的C2H6OS和IgM抗体后,以HCV-cAg酶联免疫方法检测60份血清样品中丙型肝炎病毒核心抗原的阳性情况;与常规样品处理方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果为标准进行比较分析.结果:60份血清样品,采用常规的样品处理方法检测出的阳性例数为34例,假阳性率迭25%;采用改良法检测出的阳性例数为23例,假阳性率达6.7%,二者相比差别具有统计学意义(P(≦) 0.05).结论:改良法血清样品预处理可提高ELISA法检出丙型肝炎病的特异性.     

转基因小鼠和基因敲除小鼠

能够把基因功能作为生物体表现来观察的改变了基因的小鼠。即使在基因组信息泛滥的今天,这也是最重要的工具之一,基本原理的研究虽然很早,但目前仍在进行改良法的开发工作。本文由基因控制株式会社的三谷匡董事予以阐述。[编者按]