金色链霉菌DM-1全基因组序列测定及去甲金霉素合成基因簇分析

金色链霉菌Streptomyces aureofaciens DM-1是去甲基金霉素的高产菌株。通过Genome Sequencer FLX系统进行测序,得到一条完整的线性基因组序列,长度为6 824 334 bp,GC含量为72.6%。结合软件glimmer 3.02、Genemark和Z-Curve program进行基因预测,最终在其基因组中鉴定出6 431个基因。应用AntiSMASH软件预测其基因组中存在28个次级代谢生物合成基因簇,其中包含了去甲基金霉素生物合成基因簇。其中甲基转移酶CtcK因移码突变提前终止翻译,很可能是去甲基金霉素相对金霉素 (CTC) 缺失一个甲基的根本原因。研究结果为S. aureofaciens DM-1的功能基因组学和去甲基金霉素高产菌株育种提供了研究基础。     

公益犬在行动

除了军犬、警犬,中国还没有真正意义上的工作犬。为了传播狗能够服务于人类的理念,使人们加深对犬的全方位了解,建立人犬和谐关系,我所在的“中国犬与社会公益组织(Canine Society of China,简称 CSCN)”推出了公益犬活动。其实,国外并没有“公益犬”这样一个概念,这是一个我们独创的词。所谓公益犬,就是经过严格的健康检查和行为测评后可以从事公益活动的狗,相对与国外的工作犬来说,公益犬最大的不同就在于,无论是狗还是它们的主人,来参加我们的活动都不会得到任何形式的报酬。来参加我们活动的公益犬大都是家庭宠物犬,我们不介意它们的品种、性别和年龄,只要通过体检和行为测评合格的狗,我们都会带它们参加一些社会活动,去帮助我们能够帮助的人。     

用抗人IgM（μ链）单克隆抗体早期诊断风疹病毒感染

风疹病毒（Rubellavirus）感染引起风疹,该病一般症状较轻,有的甚至不出现明显症状,预后良好。但孕妇受感后,病毒可经血液通过胎盘感染胎儿,除引起流产、早产或死股外,活产者大约有20％表现先天性风疹综合症,导致先天畸形［IJ。因此,对风疹病毒感染的早期诊断与优生优育、提高出生人口素质有极为重要的关系。本研究用抗人IgM（u链）单克隆抗体（MCAb）作标记抗体,采用间接ELISA检测血清中抗风疹病毒特异性IgM抗体,进行早期诊断,结果报道如下。材料与方法1病毒抗原将风疹病毒（GtXi株）接种到BHKl细胞,按文献（则制备粗…     

重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究

为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高１０％左右。而载体整合方式、整合拷贝数、５’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵,细     

ToRCH系列酶标诊断试剂的研制

报道了用辣根过氧化物酶标记的抗人ＩｇＧ和抗人ＩｇＭ（ｕ链）单克隆抗体作第二抗体,用自己培养、纯化的弓形体（Ｔｏ）、风疹病毒（ＲｕＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）和单纯疱疹病毒（ＨＳＶ１２）的虫体和病毒抗原包被酶标板,研制出检测ＴｏＲＣＨ系列的特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ的间接ＥＬＩＳＡ试剂。质量检定结果表明,该试剂特异性强、本底低,能有效消除ＲＦ因子等干扰因素的影响;灵敏度达１∶１６０～６４０;精密性好,变异系数（Ｃ．Ｖ）在１．４％～９．０％;试剂稳定,３７℃存放４ｄ,各项指标的变化率不超过１５％。     

人冠状病毒OC43感染性克隆的构建

摘要 目的：构建携带绿色荧光报告基因的人冠状病毒OC43感染性克隆。方法：设计带有绿色荧光蛋白的人冠状病毒OC43感染性克隆基因组序列,分段合成后利用融合聚合酶链式反应等方法得到8个亚基因组片段,通过酵母转化关联重组技术获得重组质粒,转染HEK-293T细胞进行病毒拯救,收获转染细胞培养上清感染靶细胞分析病毒拯救情况。结果：获得人冠状病毒OC43感染性克隆重组质粒,将该质粒转染细胞后成功获得携带绿色荧光蛋白报告基因的人冠状病毒OC43重组病毒。结论：成功构建了人冠状病毒OC43感染性克隆并获得重组病毒,为针对冠状病毒的基础和应用研究提供了有效工具。     

黑龙江省乙型肝炎血清流行病学调查分析

为了掌握黑龙江省乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)流行现状和人群免疫水平,评价我省儿童乙肝疫苗预防接种效果,为制订乙肝预防控制策略提供依据。采用横断面调查方法,选择全省7个国家级疾病监测点,在每个监测点随机抽取2个乡级单位,1～59岁作为目标人群共调查3337名人群。黑龙江省1～59岁人群乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性率、乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)阳性率和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)阳性率经标化后为5.65%、55.45%、30.50%,1～3岁人群乙肝表面抗原阳性率明显低于15～59岁人群。1～3岁、4～10岁和11～14岁人群乙肝疫苗全程接种率为99.43%、89.40%和64.81%;首针及时接种率分别为86.64%、75.57%和49.87。城市和农村HbsAg阳性率分别为3.26%和5.04%。医院出生儿童乙肝疫苗首针及时接种率高于在家出生儿童。结果显示接种乙肝疫苗可明显提高抗-HBs阳性率,提高人群对HBV的免疫保护能力,降低HBsAg携带率。     

牛乳中的免疫球蛋白与健康的研究

牛乳是日常生活中不可或缺的营养品,它含有丰富的营养物质,如酪蛋白、乳清蛋白、补体、脂肪和免疫球蛋白等。牛乳中含有的免疫球蛋白主要为IgG,IgA和IgM。其中,IgG含量最高,约为免疫球蛋白总量的80％。母牛分娩后第一天内分泌的初乳中免疫球蛋白含量最高,研究表明,其IgG的平均浓度可达59．80mg/ml。然而,第5-7天的初乳中IgG浓度已接近常乳水平,约为0．7．1．0mg/ml。这些免疫球蛋白不仅对犊牛,而且对新生儿以及普通人群的免疫系统都具有重要的作用。初生的牛犊免疫系统比较脆弱,在其免疫系统功能完善之前,从牛乳中获得免疫球蛋白成为它们抵抗微生物侵袭的重要方式。同样地,婴儿免疫系统功能也不健全,牛乳中的免疫球蛋白能在一定程度上帮助他们抵抗微生物侵袭。在成年人体内,免疫球蛋白具有多种生物活性功能,主要是识别和抵抗入侵的细菌和病毒等病原体,在增强机体的免疫能力、防止细菌和病毒入侵、活化补体、中和毒素、杀死肿瘤细胞等方面发挥着重要作用。经常饮用富含免疫球蛋白的牛乳,可以预防和治疗肠道病原菌引起的感染。牛乳的不同加工过程对其中的免疫球蛋白也有一定的影响。本文就牛乳中免疫球蛋白的成分功能以及各种处理加工过程对其含量的影响进行综述。     

实验恒河猴超声心动图的初步研究

分别采用二维、脉冲多普勒及M型超声心动图Teichholtz公式对1 0只健康成年实验恒河猴(Macacamulatta)的心脏结构、心脏血流动力学及左室收缩功能进行测定,并比较不同性别间各参数的差异,以建立正常健康成年恒河猴超声心动图相关生理学参数的基础正常值。结果表明,健康成年实验恒河猴超声心动图各项生理指标类似于人类新生儿的指标,雌、雄组间比较除室间隔舒张末期厚度有统计学差异外(P <0 0 5 ) ,其余指标均无统计学差异(P >0 0 5 )。     

定点突变提高青霉素G酰化酶的稳定性

以大肠杆菌青霉素G酰化酶的晶体结构为模板 ,用软件PMODELING同源模建巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶的三维结构。在此基础上 ,将 β亚基 4 2 7位 (突变A)和 4 3 0位 (突变B)赖氨酸残基突变为丙氨酸 ,降低了该酶的等电点 ,增加了疏水性 ,从而提高其在酸性和有机溶剂环境中的稳定性。两个突变体与亲本相比 ,比活力和Km相近 ,最适pH减少了 0 .5个单位 ,突变B在 pH 5 .2的溶液中的稳定性明显提高。突变A和B在 15 %DMF中的半衰期分别比亲本酶提高了 60 %和 166%