斑马鱼心脏发育标记基因Wnt11的多克隆抗体制备

Wnt11为Wnt家族的成员,是参与Wnt信号途径调控的转录因子,对心脏的正常发育起着非常重要的作用.根据已报道的Wnt11基因序列,通过RT-PCR从斑马鱼心脏组织中得到Wnt11部分编码区序列,将其连接到pGEX-4T-1原核表达载体上.经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功,将重组质粒(pGEX-4T-Wnt11)转化E.coli BL2l,通过IPTG诱导表达出融合蛋白,采用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Wnt11原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Wnt11多克隆抗体,为Wnt11功能的进一步研究奠定了基础.     

wg基因与心力衰竭发生的关系

心力衰竭已经成为人类健康的杀手,其发病机制有待阐明。wg基因直接调控心脏前体细胞的形成和特化过程,但其是否参与心力衰竭发生的过程尚不得而知。利用心力衰竭果蝇模型研究基因孵与心力衰竭的关系,结果表明两个孵基因突变杂合子的心力衰竭率分别高达52％和43％,而野生型对照组仅为25％,统计学分析差异显著,表明蜡可能与心力衰竭的发生有关。