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斑马鱼心脏发育标记基因Wnt11的多克隆抗体制备
引用本文:雷孝锋,江志钢,李志,王华,万永奇,袁婺洲,吴秀山.斑马鱼心脏发育标记基因Wnt11的多克隆抗体制备[J].生命科学研究,2011,15(2):107-110.
作者姓名:雷孝锋  江志钢  李志  王华  万永奇  袁婺洲  吴秀山
作者单位:湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,中国湖南长沙,410081
基金项目:国家自然科学基金资助项目,国家重点基础研究发展计划资助项目
摘    要:Wnt11为Wnt家族的成员,是参与Wnt信号途径调控的转录因子,对心脏的正常发育起着非常重要的作用.根据已报道的Wnt11基因序列,通过RT-PCR从斑马鱼心脏组织中得到Wnt11部分编码区序列,将其连接到pGEX-4T-1原核表达载体上.经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功,将重组质粒(pGEX-4T-Wnt11)转化E.coli BL2l,通过IPTG诱导表达出融合蛋白,采用谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Wnt11原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Wnt11多克隆抗体,为Wnt11功能的进一步研究奠定了基础.

关 键 词:Wnt11  融合蛋白  斑马鱼  多克隆抗体

Preparation of Polyclonal Antibody of Heart Development Marker Gene Wnt11 in Zebrafish
LEI Xiao-feng,JIANG Zhi-gang,LI Zhi,WANG Hua,WAN Yong-qi,YUAN Wu-zhou,WU Xiu-shan.Preparation of Polyclonal Antibody of Heart Development Marker Gene Wnt11 in Zebrafish[J].Life Science Research,2011,15(2):107-110.
Authors:LEI Xiao-feng  JIANG Zhi-gang  LI Zhi  WANG Hua  WAN Yong-qi  YUAN Wu-zhou  WU Xiu-shan
Institution:LEI Xiao-feng,JIANG Zhi-gang,LI Zhi,WANG Hua,WAN Yong-qi,YUAN Wu-zhou,WU Xiu-shan(The Center for Heart Development,Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry,Hunan Normal University,Changsha 410081,Hunan,China)
Abstract:
Keywords:Wnt11
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