转录增强子对yellow基因发育特异性表达的调控

从果蝇基因组文库中分离和克隆了yellow基因上游调控区DNA.应用重组DNA技术在体外构建了一种含yellow基因和调控元件的载体,通过转基因技术将其整合入果蝇基因组中.进而用FIP / FRT和Cre/LoxP双重位点特异性重组体系,在基因组同一位置上完成两个重组反应, 获得两种yellow基因突变体,即两种yellow等位基因.等位基因的遗传学分析表明,转录增强子直接调控yellow基因的发育特异性表达.研究结果进一步表明了两种等位基因之间存在相互作用,这种作用明显影响了yellow基因的表达水平,而这种效应可能也是由转录增强子所介导的.     

顺铂联合多西他赛、培美曲塞及吉西他滨治疗晚期肺腺癌的临床效果比较

目的:比较吉西他滨、培美曲塞、多西他赛联合顺铂三种化疗方案治疗晚期肺腺癌患者的近期疗效与安全性。方法:选择2014年7月至2015年8月在本院肿瘤科住院的经病理或细胞学证实为ⅢB~Ⅳ期肺腺癌的患者共140例,随机分为三组,分别采用多西他赛+顺铂(多西他赛组,n=38)、培美曲塞+顺铂(培美曲塞组,n=56)、吉西他滨+顺铂(吉西他滨组,n=46)三种化疗方案。对三组患者的近期疗效和Ⅲ、Ⅳ度毒性反应的发生情况进行比较。结果:吉西他滨组无完全缓解(CR)患者,部分缓解(PR)患者20例,稳定(SD)患者16例,进展(PD)患者10例,总有效率(RR)43.5%,疾病控制率(DCR)为78.3%;多西他赛组无CR患者,PR患者16例,SD患者12例,PD患者10例,RR42.1%,DCR73.7%;培美曲塞组无CR患者,PR患者28例,SD患者20例,PD患者8例,RR50.0%,DCR为85.7%。三组患者RR及DCR相比较差异无统计学意义(P0.05)。三组化疗方案的主要毒副反应为骨髓抑制,无Ⅲ~Ⅳ度皮疹和末梢神经炎等毒性反应发生。其中,培美曲塞组的严重骨髓抑制即Ⅲ度+Ⅳ度白细胞减少、中性粒细胞减少及血小板减少的发生率明显低于吉西他滨组和多西他赛组(P0.05)。三组化疗方案Ⅲ度+Ⅳ度血红蛋白下降、胃肠道反应、脱发、肝肾功能异常等毒性反应的发生率相比较差异均无显著性(P0.05)。结论:培美曲赛、多西他赛、吉西他滨联合顺铂方案治疗晚期肺腺癌的疗效相当,但培美曲塞组安全性更高。     

HOXD9促进肺癌发生发展的生物学作用及初步机制

摘要 目的：探究同源盒基因HOXD9在H3255、H2170肺癌细胞株中的生物学作用及作用机制。方法：构建HOXD9过表达稳转H3255、H2170肺癌细胞株,通过CCK-8、克隆形成、小鼠皮下瘤实验检测HOXD9对肺癌细胞增殖的影响;利用transwell、基质胶实验检测HOXD9对肺癌细胞迁移及侵袭的影响;采用彗星实验、磷酸化组蛋白H2AX（γH2AX）免疫荧光染色检测HOXD9对肺癌细胞DNA损伤的影响;通过流式细胞术检测HOXD9对肺癌细胞凋亡的影响;通过qRT-PCR、western blot、luciferase、ChIP、rescue实验探究HOXD9在肺癌中促癌的作用机制。结果：CCK-8、克隆形成、小鼠皮下瘤实验显示HOXD9可促进肺癌细胞增殖;transwell实验表明HOXD9可促进肺癌细胞迁移;基质胶实验显示HOXD9可促进肺癌细胞侵袭;彗星实验与γH2AX免疫荧光染色提示HOXD9可抑制肺癌细胞DNA损伤;流式细胞术显示HOXD9可抑制肺癌细胞凋亡。HOXD9可通过转录上调肺癌细胞中增殖细胞核抗原PCNA的表达水平。结论：HOXD9可通过促进PCNA的转录介导肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,抑制肺癌细胞DNA损伤及凋亡。     

应用果蝇yellow基因的分子模式分析基因转应作用(英文)

基因转应作用（ｔｒａｎｓｖｅｃｔｉｏｎ）是基因表达的一种方式,这种方式是由等位基因配对及其相互作用所介导的。基因转应作用的现象已在果蝇的多种基因中发现。这种作用可产生正负两种效应。而且,在其它物种中,也逐渐发现了类似的现象。例如,在植物中的基因沉默现象（ｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ）以及在小鼠中的基因转激活作用（ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）等。因此,阐明基因转应作用的机理,将有助于了解基因表达调节及增强子调控活动的分子基础。本文应用果蝇ｙｅｌｏｗ基因为模式来探讨基因转应作用的分子机制。前期研究表明,ｙｅｌｏｗ基因转应作用发生于ｇｙｐｓｙ诱导的ｙ２突变种和ｙｅｌｏｗ亚等位基因（ｙｈ）之间。为了证实是否ｇｙｐｓｙ是基因转应作用所必需的ＤＮＡ元件,我们鉴定了一种新的ｙｅｌｏｗ突变种,称为ｙ２３７４。ｙ２３７４突变是一种基因表达的组织特异性改变,这一改变使ｙ２３７４果蝇在翅和身体部位表皮着色呈突变型。通过遗传分析表明,ｙ２３７４也可与ｙｈ（如ｙ１＃８）产生基因转应作用。ｙ１＃８是一种无效的ｙｅｌｏｗ等位基因,它包含一个启动子和部分编码区序列的缺失。然而,当ｙ２３７４与ｙ１＃８杂交后,其杂交后代的表现型可由ｙ２３７