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1.
陈德高 《生物化学与生物物理进展》1979,(6)
tRNA主要有两种生物学功能:一是接受(相应的氨基酸。二是将此氨基酸转移到多肽链中。在后一功能中,tRNA通过其反密码子同mRNA上相应的密码子形成互补碱基间的氢键配对,从而使氨基酸转移到由mRNA碱基顺序决定的多肽序列中。本工作合成酵母tRNA~(ala)密码子GpCpU,将用于测验该tRNA的转移活性,即检查该tRNA能否通过其反密码子3'CpGpI5'同已结合在核糖体上的密码子5'GpCpU3'形成氢键配对而实现转移丙氨酸的功能。迄今报道的关于制备寡核苷酸的方法,主要有三种:化学合成、酶解天然核酸和酶促合成。本工作用最后一种方法,用RN_(ase)N_1和 相似文献
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λ噬菌体DNA在与被克隆的DNA片段结合成重组体后,需进行体外包装才能形成侵染性的噬菌体颗粒。这里仅就如何提取高效能人噬菌体DNA包装抽提物(包装蛋白)谈谈体会。(1)菌落的选择从BHB2688和BHB2690的不同菌落中提取的包装抽提物的包装效率(讨U小g/**A)可相差10倍以上。因此在大量制备以前,有必要先挑选多个菌范小批量制备抽提物并测定其包装效率,取优良者进行制备。(2)热诱导后的培养时间文献所载,在热诱导后培养至细菌可被氛仿裂解时即可停止。但我们的经验是12”IX10’养一段时间可明显提高抽提物的效价(见图1)… 相似文献
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真核细胞基因的表达及其调控是当前分子
生物学领域中极为重要的研究课题之一,尤其
是特定基因的表达与调控更加引人注意。真核
细胞的核仁是核搪体装配的场所,它含有多拷
贝的特定基因— 核糖体RNA基因(rDNA)
和专门负责转录rDNA的RNA聚合酶I,唯
一的基因产物是rRNA。因此,核仁及其染色
质是研究特定基因转录及其调节控制的一个理
想系统。Busch 等〔141于1964年第一次证明离
体核仁能在体外系统中合成rRNA。其后,不少
工作者分别用鼠肝细胞[7,15]、蛙卵母细胞[8]
、四
膜虫细胞[5],以及多种人工培养细胞(Novikoff
肝癌细胞、Hela细胞、Ehrlich 腹水癌细胞
等[1][2]的核仁及其染色质对rRNA的体外合
成进行了研究。我们以小鼠肝核仁为材料,研
究核仁染色质的结构与功能,试图寻找与rRNA
体外合成有关的某种调控蛋白,以便阐明真核
细胞核糖体基因表达的调控机理。 相似文献
6.
陈德高 《生物化学与生物物理进展》1979,6(2):24-32
一、前言神经组织含有大量磷脂,它们参与神经组织的构成,还具有与神经功能密切相关的生物活性,当磷脂代谢发生障碍时,脑和脊髓的功能便会发生紊乱而出现各种疾患。Konberg(1953年),Kennedy(1957年)的研究阐明,胞二磷胆碱(以下简称CDP-胆碱)是磷脂代谢的重要前体,是卵磷脂生物合成必需的辅酶。早日修(1961年)从生物化学的角度出发,对动物进行脑外伤实验,发现当动物发生脑外伤时,脑组织 相似文献
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8.
CENP—B的基因表达与细胞周期关系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以HeLa细胞为材料研究一种着丝粒蛋白CENP-B的基因表达与细胞周期及细胞核骨架的关系。将HeLa细胞同步在不同周期时相,以流式细胞光度术、同位素掺入和ACA着丝粒染色等方法检测细胞同步化效果。我们分别提取了各周期时相细胞的总RNA和Poly(A)~ RNA,用Dot blot和Northern blot杂交方法研究CENP-B在细胞周期中的表达。结果表明,CENP-B基因在细胞周期中的各个时相均有表达,但表达的强度差别很大:G2期表达最强,S期最弱,G1期中的表达介于二者之间;有意义的是CENP-B基因在M期仍然有较强的表达,表现出其在细胞周期中表达的持续性;这种表达的持续性反映了一种可能性:着丝粒、动粒蛋白不断合成,但直到S期后进入G2期时着丝粒、动粒蛋白到一定临界浓度时才开始组装新的动粒。另外,着丝粒、动粒蛋白的持续合成对着丝粒、动粒功能的发挥可能是必需的。用Bam H I限制性内切酶消化处于不同细胞周期时相的HeLa细胞核骨架,提取与核骨架紧密结合的DNA,用~(32)P标记的cDNA为探针研究CENP-B基因与细胞核骨架的结合与其表达的关系。结果证明,在G2期细胞中CENP-B基因表达最强,与细胞核骨架结合最为紧密,G1期细胞中次之,S期中CENP-B基因与核骨架结合最弱,说明CENP-B基因与细胞核骨架结合的紧密度影响其表达强度。 相似文献
9.
陈德高 《中国生物工程杂志》1987,(2)
近几年来研究的中心是真核基因表达的调控机理,很多实验室围绕这个中心开展了以下课题的研究:1)细胞增殖和分化的调控,2)癌变机理,尤其是癌基因及其表达产物的结构和功能,3)组织专一性和发育阶段专一性的基因调控,鉴定和分离Cis-作 相似文献
10.
用蔗糖梯度离心法对Novikoff肝癌细胞的多聚(A)~+mRNA进行了链长分部。沉降在13S和15S的组分6和组分7富集了B_(23)mRNA,其体外转译产物可特异地被抗蛋白B_(23)的抗体免疫吸附,被吸附的蛋白在SDS-PAGE中迁移到大约37,000道尔顿的区带。另外,用多聚核糖体免疫吸附技术提纯了少量B_(23)mRNA,它在体外转译系统中也指导合成了分子量约为37,000道尔顿的蛋白质。 相似文献