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aroA-In融合基因载体的构建、表达及对烟草的转化 总被引：3，自引：0，他引：3
PCR扩增突变的5’-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶(5’-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthetase,EPSPS)cDNA全长序列,插入pLitmus28得到pLEPSPS,进而通过反向PCR在EPSPS235／236aa之间将其打断为无功能的片段。选用人工构建的具有顺式和反式剪接功能的mini型蛋白内含子Ssp DnaB和Rma DnaB,插入被打断的aroA(抗除草剂基因),构建了质粒pLEBC、pLEBT、pLERC和pLERT。将4种重组质粒中的aroA-In(蛋白内含子Intein插入aroA)融合基因插入pET-32得到表达载体pETLEBC、pETLEBT、pETLERC和pETLERT,lPTG诱导后,SDS-PAGE分析显示其能在DE。中有效表达并发生相应的蛋白剪接。将aroA-cis Ssp DnaB和aroA-cis Rma DnaB融合基因分别插入pLYM中进一步构建成植物表达载体,农杆菌叶盘法转化烟草。基因组PCR分析表明融合基因整合入植物核基因组;RT-PCR分析显示其可在高等植物细胞中成功表达。结果说明蛋白内含子基因可以转化高等真核细胞,蛋白剪接技术可应用于高等植物细胞,从而为防止植物转基因扩散提供了一条新的途径。 相似文献
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蛋白内含子与蛋白剪接 总被引：1，自引：0，他引：1
蛋白内含子和蛋白剪接是蛋白质研究的前沿领域。重点介绍了蛋白内含子的结构和蛋白剪接机理的最新研究成果 ;蛋白内含子如同RNA剪接中的内含子 ,也是一类可移动的遗传元件 ;蛋白内含子目前研究的热点是蛋白内含子的功能研究及其在蛋白质工程和其它生物工程领域的用。 相似文献
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中国特有植物长苞铁衫的生物学特性及其保护 总被引：4，自引：0，他引：4
长苞铁杉（ＴｓｕｇａＩｏｎｇｉｂｒａｃｔｅａｔａ）属松科铁杉属,长苞铁杉组（Ｓｅｃｔ．ＨｅｏｐｅｎｃｅＫｅｎｇｅｔＫｅｎｇｆ．）,为我国特有树种;现正处在濒危状态,已被列为国家三级保护植物。本文比较系统地综述了长苞铁杉的生物学特性,包括其外部形态、内部结构、染色体核型、地理分布、生长特性及材性、生态学和群落特性等。关于长苞铁杉的分类位置,一直争论不休。作者在比较了各种分类观点后,根据上述特性的分析结果,支持建立长苞铁杉属（Ｎｏｔｈｏｔｓｕｇａ）的主张。最后,文章分析了可能引起长苞铁杉濒危的原因,并提出了两点保护措施。 相似文献
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精细胞是双受精作用的直接参与者,是生殖生物学中的重点研究对象之一。以往的研究表明,应用连续超薄切片和计算机辅助三维重组技术,结合免疫荧光定位,发现两个精细胞在体积和细胞器含量上存在着差异,即精子的二型性,而且与营养细胞核三者构成紧密功能单位即雄性生殖单位（ＭＧＵ）,微管对精细胞的性状的确定、运动和维持ＭＧＵ的动态结构稳定具有重要的作用。本文应用透射电镜,详细观察了朱顶红花粉管中精细胞的超微结构,并着重微管结构及其分布的观察。朱顶红成熟花粉为两细胞型。成熟花粉于２６℃、黑暗条件下,在液体培养基（含１０％蔗糖和１００ｐｐｍ硼酸）中培养１３－１８小时,然后收集花粉管,固定,供电镜观察并照相。朱顶红成熟花粉培养１３小时后,生殖细胞在花粉管中完成核分裂和胞质分裂等两个过程。形成两个精细胞。初形成的两个精细胞前后排列,营养核前导并靠近花粉管顶端。领头的精细胞的细胞质以很大的表面与营养核相互贴合（图版Ⅰ－１,２）,有时营养核与两个精细胞彼此穿插、缠绕（图版Ⅰ－３）。两精细胞之间的共同壁上具有很多胞质通道和含均质电子密度中等的基质（图版Ⅱ－４）。精细胞质在核与共同壁之间的区域染色较深,经高倍放大,观察到此处含丰富的微管,基 相似文献
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分离和鉴定沙冬青抗冻蛋白质 总被引：3，自引：0，他引：3
采用经典的蛋白质色谱技术,纯化沙冬青（ Ａｍｍｏｐｉｐｔａｎｔｈｕｓ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ （Ｍａｘｉｍ ．） Ｃｈｅｎｇｆ．） 叶片中的抗冻蛋白质,然后经非变性ＰＡＧＥ胶分离、回收,得到具有热滞活性的两条带：Ｂ１ 和Ｂ３。前者在８ ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４６ ℃,并在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上分离出两条带（ 分子量为６７ ｋＤ和２１ ｋＤ） ;后者在１０ ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４５ ℃,在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上只有１ 条带（ 分子量为３９．８ ｋＤ）。Ｂ１ 和Ｂ３ 均不能被Ｓｈｉｆｆ 试剂染色,也不具有典型糖蛋白的紫外吸收特征,因而可能不是糖蛋白 相似文献
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