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目的建立一种简单有效的测定CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,用于PEG化修饰工艺中的质量控制。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以TSKgel Octadecyl-4PW作为色谱分离柱,以含0.12%三氟乙酸(TFA)、5%乙腈的水溶液作为A相溶液,以含0.1%TFA的乙腈作为B相溶液,在50℃柱温条件采用分段线性洗脱的方式分离蛋白,并考察CN10蛋白以及PEG化修饰后CN10蛋白的量效关系,根据外标法检测CN10和CN10-PEG的蛋白含量,根据PEG化修饰前后CN10蛋白量效关系的变化推断CN10蛋白的PEG化修饰率。结果 PEG化修饰前后的CN10蛋白经TSKgel Octadecyl-4PW色谱柱层析均能达基线分离,当用214 nm波长检测时,CN10蛋白浓度以及PEG修饰后的CN10蛋白均与其对应峰面积呈现良好的线性关系(r2=0.999 58;r2=0.999 67)。结论建立了一种简单快速的检测CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,此方法具有较高的准确性及专属性,可用于CN10的PEG化修饰工艺的监测。 相似文献
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<正>背景:由于其目前获批的狂犬疫苗Verorab的演变,赛诺菲巴斯德公司开发了新一代无血清高纯度的Vero狂犬疫苗(PVRV-NG)。通过这次的Ⅲ期临床试验,我们的目的是证明,当根据暴露后方案给药时PVRV-NG不比Verorab的效果差,并评估其临床安全性。方法 :总共有816位≥10岁的健康受试者,随机按照2∶1的比例来接种PVRV-NG或Verorab。受试者中有一半的年龄在10~17岁之间,另一半是 相似文献
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