酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌对霍乱弧菌的拮抗试验

了解酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌单独及混合培养时对霍乱弧菌的拮抗作用。将酪酸梭菌ＬＣＬ１６６和婴儿型双歧杆菌ＬＣＬ１７２分别与霍乱弧菌Ｏ１、Ｏ１３９单独和混合培养,定时对霍乱弧菌计数,并对菌数的对数进行在检验。两株菌混合培养时对霍乱弧菌的抑制效果基本相同,单独和混合培养时对霍乱弧菌的拮抗作用主要由酪酸梭菌引起,酪酸梭菌具有抑制霍乱弧菌的作用。     

酪酸梭菌--婴儿型双歧杆菌二联活菌制剂对人体肠道菌群的调节试验

目的　观察酪酸梭菌——婴儿型双歧杆菌二联活菌制剂对受试人群肠道菌群的影响。方法　检测受试者服用前后的肠道菌群并计数。结果　肠杆菌、肠球菌、拟杆菌的数量无明显变化 ,双歧杆菌、乳杆菌的数量明显增加 ,差异有非常显著性 (P<0 .0 1) ,结论　酪酸梭菌——婴儿型双歧杆菌二联活菌制剂具有一定的调节人体肠道菌群、增殖双歧杆菌和乳杆菌的作用。     

正交设计优化电转染CHO细胞的方法

目的:探讨细胞电穿孔转染的优化方法。方法:按照L9(34)正交表安排各因素水平的细胞电敏感性实验,以台盼蓝染色计数确定细胞存活率,最接近50%存活率为最优方案,根据最优方案将CHO-dhfr-细胞与DNA混匀电穿孔转染以验证正交设计结果。结果:CHO-dhfr-细胞电转染的优化参数为低离子强度Tris-Cl缓冲液、750 V/cm、50μF、电击2次、间隔1 min,各因素对转染的影响大小依次为缓冲液、电场强度、脉冲次数、电容。结论:确定了电穿孔法转染CHO-dhfr-细胞的方法,为进一步应用该细胞株表达重组蛋白打下了基础。     

培养基及培养工艺对双歧杆菌产量的影响

目的：对双歧杆菌生产培养基进行筛选,提高双歧杆菌的产量。方法：使用保蒲培养基,采用发酵罐培养工艺。结果：使用保蒲培养基较西红柿原汁培养基可使双歧杆菌的产量提高3.06-5.36倍。用保蒲培养基采用发酵罐培养工艺较立瓶静止培养工艺双歧杆菌的产量可提高4.91-54.8倍;发酵罐培养工艺较用西红柿原汁培养基、立瓶培养工艺产量提高17.33-154.29倍。结论：用保蒲培养基发酵罐培养可大大提高双歧杆菌的产量。     

酪酸梭菌与双歧杆菌对肠道致病菌的体外生物拮抗作用

目的：探讨酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌对某些肠道致病菌的拮抗作用,方法：将酪酸梭菌和婴和型双歧杆菌单株菌及两株菌混合后分别与几株肠道致病菌混合接种于GAM液体培养其中进行厌氧培养,通过平板菌落计数法计算肠道致病菌的菌数,结果：经混合培养后肠道致病菌的菌数明显下降,结论：酪酸梭菌LCL166株和婴儿型双歧杆菌LCL172株在体外能明显抑制几株肠道致病菌的生长繁殖。     

酪酸梭菌-婴儿型双歧杆菌二联活菌制剂的研究

对酪酸梭菌－婴儿型双歧杆菌二联活菌制剂的特性及功效进行研究和分析。方法：通过实验鼠进行刺激生长试验、活菌数测定、毒理试验、调节肠道菌群试验、免疫调节作用来观察制剂的作用。结果：小鼠肠道中双歧杆菌、乳杆菌、酪酸梭菌数量明显增加,高剂量能增加小鼠抗体生成细胞数。     

RP-HPLC法检测CN_(10)蛋白的PEG化修饰率及含量

目的建立一种简单有效的测定CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,用于PEG化修饰工艺中的质量控制。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以TSKgel Octadecyl-4PW作为色谱分离柱,以含0.12%三氟乙酸(TFA)、5%乙腈的水溶液作为A相溶液,以含0.1%TFA的乙腈作为B相溶液,在50℃柱温条件采用分段线性洗脱的方式分离蛋白,并考察CN10蛋白以及PEG化修饰后CN10蛋白的量效关系,根据外标法检测CN10和CN10-PEG的蛋白含量,根据PEG化修饰前后CN10蛋白量效关系的变化推断CN10蛋白的PEG化修饰率。结果 PEG化修饰前后的CN10蛋白经TSKgel Octadecyl-4PW色谱柱层析均能达基线分离,当用214 nm波长检测时,CN10蛋白浓度以及PEG修饰后的CN10蛋白均与其对应峰面积呈现良好的线性关系(r2=0.999 58;r2=0.999 67)。结论建立了一种简单快速的检测CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,此方法具有较高的准确性及专属性,可用于CN10的PEG化修饰工艺的监测。     

沿微山湖地区神经毒素原性酪酸梭菌的土壤分布调查

为了解神经毒素原性酪酸梭菌在微山湖地区土壤的分布情况,我们采集了该地区的土壤样品进行调查。５０份土样培养上清中,有１８份（３６％）检出了肉毒毒素,经中和试验证实均为Ｅ型。从其中的７份阳性样品中分离到产毒菌株,对分离菌株进行毒性测定、生化特性检查及其神经毒素基因的ＰＣＲ检测,所有菌株均具有Ｅ型肉毒神经毒素基因并产生相应毒素,但其生化特性与Ｅ型肉毒梭菌不同,而与酪酸梭菌一致。结果说明沿微山湖地区土壤中确实存在神经毒素原性酪酸梭菌,而且阳性率很高。对神经毒素原性酪酸梭菌的分布进行流行病学调查并从土壤中分离到该病原菌,这在国际上尚属首次。     

重组人睫状神经营养因子蛋白质定量检测方法的建立

采用ELISA双抗体夹心法,建立一种快速灵敏的定量检测rhCNTF成品蛋白含量的方法。结果显示,rhC-NTF抗原浓度在(0～25)ng范围内线性良好(r>0.99),灵敏度为0.3ng/ml,与其他重组细胞因子无交叉反应,样品的检测结果与理论含量相吻合,CV<15%,该方法检测速度快、重复性好、灵敏度高、特异性好。