| RP-HPLC法检测CN_(10)蛋白的PEG化修饰率及含量 |
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| 引用本文： | 梁凌宇,王婉茹,郭玉婷,陆俭,杨军,蒋琳.RP-HPLC法检测CN_(10)蛋白的PEG化修饰率及含量[J].微生物学免疫学进展,2015(1):8-12. |
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| 作者姓名： | 梁凌宇 王婉茹 郭玉婷 陆俭 杨军 蒋琳 |
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| 作者单位： | 兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046 |
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| 摘 要： | 目的建立一种简单有效的测定CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,用于PEG化修饰工艺中的质量控制。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以TSKgel Octadecyl-4PW作为色谱分离柱,以含0.12%三氟乙酸(TFA)、5%乙腈的水溶液作为A相溶液,以含0.1%TFA的乙腈作为B相溶液,在50℃柱温条件采用分段线性洗脱的方式分离蛋白,并考察CN10蛋白以及PEG化修饰后CN10蛋白的量效关系,根据外标法检测CN10和CN10-PEG的蛋白含量,根据PEG化修饰前后CN10蛋白量效关系的变化推断CN10蛋白的PEG化修饰率。结果 PEG化修饰前后的CN10蛋白经TSKgel Octadecyl-4PW色谱柱层析均能达基线分离,当用214 nm波长检测时,CN10蛋白浓度以及PEG修饰后的CN10蛋白均与其对应峰面积呈现良好的线性关系(r2=0.999 58;r2=0.999 67)。结论建立了一种简单快速的检测CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,此方法具有较高的准确性及专属性,可用于CN10的PEG化修饰工艺的监测。
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| 关 键 词： | 睫状神经营养因子 反相高效液相色谱 PEG化修饰 含量检测 |
Determination of modification rate and content of PEGylated CN_(10) by RP-HPLC |
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| LIANG Ling-yu;WANG Wan-ru;GUO Yu-ting;LU Jian;YANG Jun;JIANG Lin.Determination of modification rate and content of PEGylated CN_(10) by RP-HPLC[J].Progress In Microbiology and Immunology,2015(1):8-12. |
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| Authors: | LIANG Ling-yu;WANG Wan-ru;GUO Yu-ting;LU Jian;YANG Jun;JIANG Lin |
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| Institution: | LIANG Ling-yu;WANG Wan-ru;GUO Yu-ting;LU Jian;YANG Jun;JIANG Lin;Lanzhou Institute of Biological Products Co. ,Ltd. ,Center for Gansu Provincial Vaccine Engineering Research; |
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| Abstract: | |
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