MiR-210在黑素瘤细胞铁死亡中的作用和机制研究

摘要 目的：探讨miR-210在黑素瘤细胞铁死亡中的作用及其可能调控机制。方法：通过qRT-PCR实验检测0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激前后黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达水平变化情况;在0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激的同时,给予antagomiR-210处理抑制黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达后,通过CCK8法检测细胞存活水平,通过流式细胞术检测细胞内lipid ROS水平;在此基础上,通过生物信息学分析、qRT-PCR实验、免疫印迹实验和萤光素酶报告实验明确miR-210对靶分子TFRC的调控作用;在0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激的条件下,给予antagomiR-210处理抑制miR-210的表达,同时使用siRNA沉默TFRC的表达水平,通过CCK8法检测细胞存活水平。结果：1）在0.5 μM RSL3刺激后,黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达水平显著升高;2） 在0.5 μM RSL3刺激后,抑制miR-210的表达可加剧黑素瘤细胞系A2058和451Lu的死亡,同时显著增加细胞内lipid ROS水平;3）miR-210可直接结合TFRC mRNA的3''UTR区域,过表达miR-210可以显著抑制TFRC的转录和蛋白表达;4）在0.5 μM RSL3刺激的条件下,沉默TFRC的表达可以显著逆转抑制miR-210对黑素瘤细胞系A2058和451Lu铁死亡的促进作用。结论：miR-210是黑素瘤细胞铁死亡的重要抑制因子,且是通过靶向调控TFRC实现的。     

中国纹蛾科新种记述(鳞翅目)

中国纹蛾科新种记述（鳞翅目）白九维,郭森,郭铭义（中国科学院动物研究所北京１０００８０）（山西省忻州地区林业局０３４０００）笔者在鉴定山西省五台山小蛾类标本中,发现纹蛾科Ｃｏｃｈｙｌｉｄａｅ四个新种,分别各属于双纹蛾属Ａｅｔｈｅｓ,短纹蛾属Ｆａｌｓｅ...     

重组大肠杆菌产角质酶-CBM摇瓶发酵优化及分泌表达研究

在TB培养基的基础上,通过单因素分析和正交设计对重组大肠杆菌产角质酶-CBM发酵进行优化,得到最适培养基的组分为:甘油5 g/L,蛋白胨 16 g/L,MgSO₄·7H₂O 2.5 mmol/L,K₂HPO₄ 13.7 g/L,KH₂PO₄ 1.53 g/L,菌体生长至对数前中期时添加终浓度为1 g/L乳糖 和0.75 g/L 甘氨酸,30℃发酵48 h,角质酶-CBM产量可达63 U/ml,较TB培养(20 U/ml)提高了近3倍。考察了热激作用、渗透调节物质及温度两控制对角质酶-CBM分泌表达的影响,在添加Lactose和Glycine后,发现在添加终浓度为75 mmol/L的L-脯氨酸,37℃热激1 h或47℃热激0.5 h,变温至25℃发酵,角质酶-CBM产量可达90 U/ml,较TB恒温培养提高了近四倍。