生物技术专业基因工程实验教学改革探讨

基因工程作为现代生命科学研究的前沿,是生物技术专业的必修主干课程之一。为了加强学生综合素质培养,根据当前基因工程实验教学现状,通过完善教学方法、优化实验内容、开放科研实验室等措施,调动学生学习热情,提高实验教学质量,以达到创新应用型人才培养的目的。     

城市人群血清营养水平指标与膳食习惯关系的分析

目的:分析血清营养状态指标与膳食习惯的关联关系与意义。方法:采用横断面调查的数据,用标准问卷询问1694人相关信息,内容包括人口学资料、自报疾病现患史、膳食习惯、健康自评、认知功能信息;同时采集被调查人群血样本;测定血红蛋白、白蛋白、叶酸和维生素B12水平。采用R 3.2.5和SPSS 20.0软件进行相关和显著性差异分析。结果:人体血红蛋白、白蛋白、叶酸和维生素B12水平与被调查个体进食水果和鸡蛋习惯有密切关联;天天进食水果、鸡蛋的个体上述指标水平明显高于不进食此类食物的个体,且血红蛋白、白蛋白水平随增龄下降程度减低;天天进食水果习惯的个体同时具有天天进食蛋、奶、菜习惯;有进食水果习惯的人群表现为受教育程度高;自评健康状态好和相对自报患病率低等特点。结论:合理膳食习惯可保持较高的血营养状态指标水平;且延缓相关指标水平随增龄下降的程度。天天进食水果习惯可被视为合理膳食的指标,为膳食评估提供简易、可行、有效的指标。     

猪骨胶原蛋白酶解物中血管紧张素转换酶抑制剂的提纯

将猪骨胶原蛋白粗提物用胰蛋白酶水解,经阳离子交换树脂层析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱凝胶过滤,以及数次反相高效液相层析,最终获得一具有抑制血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性的单一峰值的多肽。其氨基酸组成为Ｉｌｅ,Ｈｉｓ,Ｓｅｒ,Ｇｌｙ,Ａｌａ,Ｐｒｏ,Ｔｙｒ,Ｌｅｕ,Ａｓｐ．以Ｈｉｐ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ为底物,在ｐＨ为７．１的条件下,此肽对猪肺ＡＣＥ的Ｉ＿（５０）值为２６μｍｏｌ／Ｌ。     

尿酸酶－鲁米诺化学发光传感器

研制了依赖于鲁米诺化学发光反应和固定化尿酸酶柱的测定血清尿酸的生物传感器。其测定血清样品响应时间47s。测定每份样品需时1．5min,样品体积17μl。工作曲线的线性范围1~20mg／dl。批内不精密度3．22％～4.36％,批间6.18%～7．8%。测定值回收率为93％～109％。与医院常规酶试剂盘方法比较相关系数r=0.9909。固定化尿酸酶柱室温使用,4℃冰箱保存,连续使用5个半月测定样品2000次以上,仍保持原酶柱活力的94%。     

人脑神经元特异性烯醇化酶的纯化方法

采用改良的Grace层析方法,经一次DEAE-Sephadex A50柱层析即从人脑中纯化了神经元特异性烯醇化酶,比活力为92.1U/mg,纯化倍数为59.4.该酶纯化后,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一蛋白质谱带.此外,还测定了其部分理化性质,其亚单位分子量为45000,等电点pI为4.7,氨基酸组成分析表明其为一种酸性蛋白质;对2-磷酸甘油酸的K_m值为5.6×10^-4mol/L.     

胆红素氧化酶产酶菌株的分离及最佳产酶条件的研究

A bilirubin oxidase (EC 1.3.3.5) producing strain, Mv 2.1089, was isolated from several strains of Myrothecium verrucaria by dilution method. The optimum conditions of enzyme production were investigated and the results were as follows: the suitable medium was cultured at 25 degrees C on a rotating shaker glucose and peptone, at pH 6.0. The strain was cultured at 25 degrees C on a rotating shaker (150 r/min) for 96 h. Bilirubin oxidase with 0.5-1.5 u/ml was obtained in the culture medium.     

尿酸酶—一鲁米诺化学发光传感器

研制了依赖于鲁米诺化学发光反应和固定化尿酸酶柱的测定血清尿酸的生物传感器。其测定血清样品响应时间４７ｓ。测定每份样品需时１．５ｍｉｎ,样品体积１７ｕｌ。工作曲线的线性范围１￣２０ｍｇ／ｄｌ。批内不精密度３．２２％￣４．３６％;批间６．１８％￣７．８％。测定值回收率为９３％￣１０９％。与医院常规酶试剂盒方法比较相关系数ｒ＝０．９９０９。固定化尿酸酶柱室温使用,４℃冰箱保存,连续使用５个半月测定样品２     

回文序列诱导突变的机制及人类相关疾病

在原核和真核生物基因组中, 含有回文序列的区域高度可变且稳定性差, 主要原因是回文序列能形成发卡或十字形二级结构, 然后通过滑动错配、单链复性以及非同源末端连接(Non-homologous end joining, NHEJ)等机制导致缺失突变或染色体易位的发生。在人类基因组中, 回文序列较普遍存在于基因表达调控的重要作用元件中, 它诱导的缺失和易位突变还与男性不育、地中海贫血等多种疾病的发生、发展密切相关。文章综合近几年国内外相关文献, 初步阐释回文序列诱导突变的类型和可能机制, 及其与人类疾病的关系, 为进一步探讨回文序列在基因表达调控、基因突变及人类疾病中的作用及功能等相关研究提供参考。     

望春玉兰种质资源遗传多样性ISSR分析

利用ISSR分子标记法对陕西、河南、湖北三省共35份具有代表性的单株野生望春玉兰种质进行遗传多样性和亲缘关系分析。从100条ISSR引物中筛选出来的10条多态性引物对供试材料进行PCR扩增后共获得154条条带,其中多态性条带143条(PPB=93.5%);根据ISSR扩增结果,35份材料间的遗传相似系数(GS)为0.55~0.87;Nei’s遗传多样度(H)为0.274 7;Shannon多态信息指数(I)为0.427 4;不同地区间的遗传分化系数(Gst)为0.1291。以上说明望春玉兰种质存在较丰富的遗传多样性,不同地区间和地区内均存在遗传分化,且地区内的变异对总变异的贡献相对较大。基于UPGMA法的聚类分析将35份供试材料分为四大类,其结果呈现出一定的地域性分布规律,与花色并无绝对关联。主成分分析结果基本支持聚类分析的结果。基于遗传距离和地理距离的Mantel检测显示,望春玉兰供试材料之间的遗传关系与它们的地理来源并无严格的一致性关系。     

广州地区7种菊科入侵植物丛枝菌根侵染和根际土壤孢子密度的生境差异性分析

为了解广州地区7种菊科(Compositae)入侵植物与丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)的互作共生关系,调查了这7种菊科入侵植物在4种生境中的AMF侵染和根际土壤孢子密度,并分析土壤因子对AMF的影响。结果表明,7种入侵植物根内均受到AMF侵染,根际土壤中均检测到AMF孢子;AMF侵染在宿主间差异显著,生境间的差异不显著;孢子密度在生境和宿主间的差异均显著,人工绿地、农田果园的AMF孢子密度均显著高于森林周边和滨海地带。相关性分析表明,农田果园生境的根际土壤孢子密度与土壤有机质含量呈显著负相关关系;森林周边生境的AMF总侵染率与土壤全氮呈极显著正相关关系;人工绿地的AMF总侵染率与土壤速效氮含量呈显著负相关关系;滨海地带的AMF总侵染率与土壤有效磷含量呈显著负相关关系。这些对理解菊科植物入侵机理具有非常重要的作用。