运用免疫蛋白质组学方法筛选羊种布鲁氏菌免疫反应性蛋白

布鲁氏菌是布鲁氏菌病的病原体,能引起人类慢性感染,造成家畜流产和不孕.在不同种布鲁氏菌中,羊种布鲁氏菌毒力最强,在中国布鲁氏菌病流行中占主导地位.目前,还没有安全的用于预防人类布鲁氏菌感染的疫苗.用于预防家畜布鲁氏菌感染的弱毒活疫苗产生的抗体能够干扰对免疫动物感染布鲁氏菌野毒的诊断,从而对根除布鲁氏菌病的计划实施有负面影响.然而,羊种布鲁氏菌免疫蛋白质谱目前还不完善.为了研制更安全、有效且能区分野毒感染的疫苗,本研究应用免疫蛋白质组学技术筛选羊种布鲁氏菌疫苗株M5的免疫反应性蛋白.经二维电泳结合免疫杂交技术筛选到88个具有免疫反应性的蛋白质点,后经质谱鉴定其归属于61个蛋白,包括许多新的免疫反应性蛋白,如延伸因子G,F0F1ATP合成酶亚单位？？,OMP1.本研究为布鲁氏菌病疫苗研制提供了许多免疫反应性候选蛋白.     

福氏2a宋内氏双价痢疾菌苗候选株的生物表型及稳定性鉴定

志贺氏痢疾是我国常见病、多发病。根据我国主要流行型别特点,构建f侵袭表型阳性的福氏人来内氏双价痢疾菌苗。2株议价菌苗候选株生物表型及其稳定性研究结果：（1）O抗原表达,候选株能良好表达福氏Za及来内氏双价0抗原,用针对保护性表位单抗2E6及SSD3所做的FAS表明,福氏Za抗原表达为亲株FS－15的86．8％一121．0％,来内氏为兀．4％～119．0％;经液体传代20代后,双价O抗原表达稳定率均在95％以上。（2）IPa表达,WesTen1Dlot结果表明,候选株能表达侵袭相关蛋白IPaA、IPaB、IPaC、IPaD,经液体连续传20代后,侵袭蛋白的…     

影响经动脉子宫颈癌热灌注化疗临床疗效的多因素分析

目的:探讨宫颈癌热灌注化疗栓塞的治疗作用及对临床疗效的影响因素分析。方法:对34例宫颈癌病人进行子宫动脉热灌注化疗及栓塞术,分析肿瘤病理类型,肿块大小,周围浸润及淋巴结转移情况等因素对介入治疗的影响。结果:经过对临床疗效的多因素分析肿块大小对治疗效果影响最大,其次为病理类型。其余影响较小。结论:宫颈癌热灌注化疗栓塞术是治疗宫颈癌的一种适合疗法,尤其适用于肿块较小的病人。可以使疾病得到有效控制,增加手术机会。     

PVA颗粒超选择栓塞支气管动脉治疗急性大咯血

目的:探讨应用介入技术,超选择支气管动脉,行PVA颗粒栓塞治疗急性大咯血的治疗价值.方法:对我院2001年以来34例采用PVA颗粒栓塞的大咯血病人的术后反应.并发症发生情况及止血情况进行随访和回顾性分析.结果:所有病人均为一次性栓塞成功,术后随访时间长迭36个月,随访率达100%.除一例肺癌病人因咯血死亡外,未发现复发性咯血.术后病人出现胸部疼痛症状,短期内对证治疗可以缓解.未见明显并发症发生.结论:应用PVA颗粒栓塞支气管动脉是治疗急性大咯血的一种有效方法.     

马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株中和作用的研究

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2治疗性抗体对SARS-CoV GZ-01株具有很好的中和作用,三批马抗SARS-CoV免疫球蛋白的CPE和MTT中和效价分别达到1:6400、1:6400、1:12800,且两种方法测得结果一致。     

个性化饮食干预对妊娠期缺铁性贫血及母婴结局的效果研究

目的：探究适用于缺铁性贫血孕妇的营养学个性化饮食干预方案,评估其对患者症状和母婴结局的改善情况。方法：120例确诊为缺铁性贫血的孕妇,随机分为对照组（60例）和干预组（60例）,分别在研究开始时和干预4 w后进行1次膳食调查并采集空腹静脉血测定血红蛋白和红细胞计数;对照组不施加主动的营养学干预,为干预组提供系统的个性化膳食指导和食谱定制。结果：干预前对照组宏量营养素供能比：碳水化合物64.25%、蛋白质10.15%、脂质25.59%、铁摄入量（5.9±1.1）mg;干预组宏量营养素供能比：碳水化合物66.17%、蛋白质11.66%、脂质22.17%、铁摄入量（6.2±1.7）mg,两组间各指标均无显著统计学差异（P＞0.05）。干预后对照组宏量营养素供能比：碳水化合物60.33%、蛋白质13.97%、脂质25.70%、铁摄入量（13.4±3.1）mg。与干预前对照组相比,仅铁元素摄入量有所提高,差异有统计学意义（P＜0.01）。干预后干预组碳水化合物59.74%、蛋白质21.83%、脂质18.43%、铁摄入量（27.5±6.6）mg。与对照组相比,干预组蛋白质摄入量和铁摄入量均有提高,差异显著（P＜0.01）。与对照组相比,干预组血红蛋白和红细胞计数指标均提高,差异显著（P＜0.01）。与对照组相比,干预组妊娠期高血压发生率降低差异显著（P=0.01）,妊娠不良结局发生率无显著差异（P＞0.05）。结论：妊娠期个性化饮食干预有助于改善缺铁性贫血孕妇贫血相关指标,对妊娠期高血压发病风险有保护作用。     

冷适应减毒B型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变．构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为：pAB121-PB1, pAB122-PB2, pAB123-PA, pAB124-HA, pAB125-NP, pAB126-NA, pAB127-M和pAB128-NS．在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B．该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006～2007年当年流行株B/Malaysia/2506/2004．rMDV-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64～1∶512．实验结果暗示：从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型．     

MDCK单克隆细胞库的建立及检定

目的:建立甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应MDCK单克隆细胞库,用于培养生产流感病毒疫苗,为细胞代替鸡胚制备流感病毒疫苗提供保证。方法:用有限稀释法将MDCK细胞进行单克隆化,通过血凝和TCID50筛选甲型H1N1流感病毒疫苗株的高适应性单克隆化细胞株,扩大培养建立细胞库并进行检定。结果:共制备了97株单克隆化MDCK细胞,筛选到甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应性MDCK单克隆细胞株,扩大培养建立了细胞库,经检定符合《中华人民共和国药典.三部》(2010版)对细胞库的要求。结论:建立了甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应性MDCK单克隆细胞库,为细胞培养生产流感病毒疫苗奠定了基础。     

F1-V重组亚单位疫苗对鼠疫耶尔森氏菌141强毒株皮下攻毒保护性的研究

在此实验中, 设计了一种包含2种成分的重组融合蛋白作为疫苗成分来防护鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia)可能产生的生物威胁. 重组F1-V蛋白与铝佐剂结合, 分别以10, 20, 50 mg剂量免疫BALB/C小鼠, 周期为2个月. 检测小鼠血清抗体水平和T辅助细胞的亚型. 免疫后小鼠以25~600 LD₅₀剂量的鼠疫耶尔森氏菌141强毒株进行皮下攻毒实验. 结果证明, F1-V重组蛋白在 小鼠体内诱导产生足够保护的免疫应答. 血清IgG水平是产生最终保护力的一个重要因素. 20 μg的免疫剂量可以诱导血清抗体效价高达51200, 使小鼠对400 LD50的鼠疫耶尔森氏菌产生100%的保护. F1-V重组蛋白引发的抗体亚型主要为IgG1类, 说明抗体反应趋向Th2型反应. 流式细胞分析表明, 铝佐剂主要帮助F1-V重组融合蛋白诱导强烈的体液免疫而不是CTL细胞免疫应答.表明F1-V重组亚单位疫苗株有希望成为一种新型的鼠疫疫苗候选株.     

小鼠鼻粘膜痢疾杆菌感染/免疫模型的建立

用福氏Za野生株及同型疫苗株,建立厂小鼠痢疾杆菌满鼻感染／免疫模型。10～12周龄Balwc雌性小鼠随机分成3组,以滴鼻方式在0、14、28d分别给予FZa—12,ThZ及PBS。剂量为2X10‘;4X10‘;IX10’菌,第56d用同型毒株攻击。分别于免疫前、1克后1周、3免后1周采集血清及肺灌洗液。结果：（1）副反应：满鼻免疫后,rya－12及ThZ组动物呈现不同程度的病态体征,FZa－12组持续2～4d’ThZ组回～ZdPBS无明显变化。五免后24h肺病理检测表明：FZa－lZ组小鼠肺明显实变,肺泡间质充满大量的炎性细胞,／J‘支气管卜皮细胞部分脱落。ThZ组…