大足黑山羊性激素结合球蛋白基因的克隆与多态性分析

性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白,血清SHBG可结合与转运性激素,从而在一定程度上控制血清性激素浓度,血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素/促卵泡激素比率,最终影响排卵性能。以大足黑山羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增,克隆测序等方法获得SHBG基因序列,经DNAMAN软件与BLAST比对分析其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果发现,SHBG基因内含子4中有两处突变(A215G、G607A),外显子5中有一处无义突变(A733G),外显子7中也有两处无义突变(A371G、A380G)。通过染色体步移获得了1 190 bp的SHBG基因5′端调控区序列,启动子预测分析显示此基因没有TATA盒和CCAAT盒,也没有发现人SH-BG基因多态性研究中发现的TAAAA重复序列。本研究结果有望为大足黑山羊SHBG基因多态性与繁殖力的关系提供科学依据。     

抑制消减杂交法分离紫花苜蓿幼苗铝胁迫诱导表达的cDNA

利用抑制消减杂交(SSH)技术分离铝胁迫诱导紫花苜蓿差异表达的基因,以水培试验获取的中苜一号幼苗为材料,以80μmol/L铝离子胁迫的紫花苜蓿作为试验组,未胁迫的为驱动组,构建了一个包含456个克隆的SSH文库。对构建的文库进行鉴定,随机选取20个阳性克隆测序,共获得15条有效EST序列,然后将测序结果提交到GenBank进行Blastn比对,获得了3条未知基因的序列,推测它们可能与植物的抗铝作用有关。检测结果表明,构建的文库质量较好,可以进行进一步深入研究,为揭示植物耐铝性的分子机理提供理论基础。