18-甲基三烯炔诺酮对离体培养的人蜕膜细胞的影响

18-甲基三烯炔诺酮(R_(2323))作为具有多种生物学活性的避孕药物,在整体动物和临床试验中都显示出明显的抗着床作用。蜕膜细胞是胚泡着床的一个重要组成     

中华大蟾蜍输卵管促受精因子的实验分析

在孕酮作用厂,切除卵巢的中华大蟾蜍输卵管上皮细胞不仅能够使外源移植的卵母细胞在输卵管中正常运行,还保证卵母细胞正常受精。根据输卵管卷曲部分泌物的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,存在依赖孕酮的３３ｋＤ蛋白质。经兔抗３３ｋＤ蛋白抗体处理具输卵管分泌物的卵母细胞,受精率受到显著抑制·提示该蛋白有促受精活性。输卵管分泌物介入受精涉及复杂的多种因子。     

药物对病毒感染培养心肌细胞Ca~（2＋）内流及CVB_3－RNA复制的影响

应用放射性同位素￣（４５）Ｃａ￣（２＋）示踪技术及光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针杂交方法,观察了维拉帕米、黄芪、地塞米松等药物对感染柯萨奇Ｂ＿３病毒（ＣＶＢ＿３）的大鼠培养心肌细胞Ｃａ￣（２＋）内流及细胞中ＣＶＢ＿３－ＲＮＡ复制的作用。结果发现：在病毒感染４８ｈ,上述三药均可显著减少感染细胞及正常对照的心肌Ｃａ￣（２＋）内流（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）;若在病毒感染后即加入上述药物,经４８ｈ培养后,黄芪组细胞中的ＣＶＢ＿３－ＲＮＡ含量显著少于病毒对照组（Ｐ＜０．００１）,维拉帕米则显著增加（Ｐ＜０．０１）．而地塞米松对其无影响。提示黄芪与地塞米松具有一种与维拉帕米相似的减少病毒感染心肌Ｃａ￣（２＋）内流的作用,有可能减轻感染细胞的继发性Ｃａ￣（２＋）损伤;但三种药物对感染细胞中病毒核酸的复制有不同作用,可作为临床治疗病毒性心肌炎时的参考。     

垂体浸出液诱发蟾蜍卵球成熟的实验分析

冬眠蟾蜍的长足卵母细胞,只需要与垂体促性腺激素作短暂的接触,在其细胞核尚未破裂以前,转入生理水培养,即可恢复成熟分裂,由第一次成熟分裂前期,发育到第二次成熟分裂中期。在垂体浸出液作用下,有核或去核的卵母细胞的细胞质中,都会出现促成熟的活性物质(MPF)。含有这种促成熟因子的微量卵质,一旦注入未经激素处理的卵球,即能诱发后者正常成熟。可是,在同一激素的作用下,卵母细胞细胞核(胚泡)的内含物,却不能诱发未经激素处理的卵球胚泡破裂,继续进行成熟分裂。卵母细胞的细胞质,既然可以不依赖于其细胞核的存在而形成促成熟的活性物质,而蛋白质合成的抑制剂又能妨障此活性物质的产生,这说明,激素导致卵母细胞胚泡破裂和继续减数分裂,所涉及的主要是翻译水平上的蛋白质合成问题。激素对卵母细胞细胞核的作用是间接的,是通过细胞质的活动予以调控的。     

中华大蟾蜍卵母细胞成熟过程中膜电位变化的实验分析

The full-grown oocytes obtained from toad (bufo bufo gargarizans) submitted in hibernation state or reared at 25-30 degrees C for several months, named hibernation oocyte or high temperature oocyte, had a membrane potential of -41.51 +/- 0.77 mV and -43.83 +/- 1.39 mV in Ringer's solution respectively. The hibernation oocytes underwent GVBD (germinal vesicle breakdown) and membrane depolarization at 19 +/- 1 degree C after progesterone stimulation. The membrane potential was about -20 mV at the period of GVBD, and -10 mV or so at 20 hours after the hormone treatment. However, the high temperature oocytes did not undergo GVBD, their membrane potential decreased before the fourth hour after treatment with progesterone and then recovered. If the hibernation oocytes were preincubated at 37-38 degrees C for 13 hours prior to the culture in the medium containing progesterone (10(-6)M, 37-38 degrees C), no GVBD was observed and the membrane depolarized before the fourth hour after treatment with progesterone then recovered, but MPF was detectable in the cytoplasm (unpublished). Both GVBD and membrane depolarization appeared in the hibernation oocytes and high temperature oocytes after injection of MPF. The time required for the hibernation oocytes injected MPF to attain the membrane potential about -20 mV was 4 hours earlier than that of progesterone treatment. It was just the time required for the appearance of MPF in the cytoplasm of oocytes treated with the hormone. It was noticed in our precedent article that a factor which appeared in the cytoplasm of high temperature oocytes differed from MPF. The factor was called Hibernation Oocyte Mature Promoting Factor (HOMPF).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

中华大蟾蜍卵母细胞成熟过程中膜电位变化的实验分析

中华大蟾蜍冬眠卵和高温卵的静息膜电位分别为-41.51±O.77 mV和-43.83±1.39mV。孕酮作用后,冬眠卵发生GVBD,膜逐渐去极化,至第二次成熟分裂中期,膜电位甚至可降至-10 mV;高温卵不发生GVBD,在早期(前4小时左右)出现膜去极化,之后恢复。高温休克(37-38℃)卵虽然亦不发生GVBD,膜去极化的情况与高温卵的相似,然而,卵质中却出现MPF。将孕酮作用后的冬眠卵核液转移注入未经任何处理的冬眠卵中,未能激起受体卵GVBD ??和膜去极化。接受MPF或促冬眠卵成熟因子的冬眠卵,均发生GVBD和膜去极化。接受MPF的冬眠卵的GVBD时间较孕酮诱发的提前约4小时,膜去极化的进程也相应提前4小时左右。蛋白质合成抑制剂嘌呤霉素能抑制由孕酮诱发的冬眠卵成熟效应,而不能抑制由MPF诱发的卵成熟效应。接受MPF的高温卵发生GVBD和膜去极化,而高温卵本身无能产生MPF,也不具备扩增MPF的能力。上述实验结果说明,冬眠卵质膜去极化与GVBD之前的核液无关,与MPF的出现亦无直接关系,该逐渐去极化的全过程可分二阶段,前阶段的去极化与孕酮诱发的早期蛋白质合成活动有关,后阶段与含MPF的卵质引起的生物学效应有关。     

用实验条件改变离体高温卵巢卵对孕酮的应答能力

高温蟾蜍的卵母细胞经孕酮刺激不显示GVBD。降温能提高高温卵对孕酮的应答能力。15℃是中华大蟾蜍长足卵母细胞的孕酮应答能力发生转折的上限温度。在含血清的任氏液或199培养液中离体低温(4℃)培养一个月以后的高温蟾蜍卵巢块,经孕酮作用,卵母细胞由无能力转变为有能力GVBD。细胞学切片观察表明,这些卵可抵达第二次成熟分裂中期。培养两个月左右,孕酮作用下的卵母细胞GVBD百分率可达100%,卵母细胞内蛋白质~(32)P的参入量增加近3倍。培养液内加胰岛素(1μg/ml),或17 β-雌二醇,或甾体生物合成抑制剂Aminoglute-thimide(1 mmol/L),或清除含血清培养液内的甾体激素,均对培养中的高温卵的孕酮应答能力的转变没有明显影响。实验结果表明,离体低温培养条件下卵母细胞的孕酮应答能力的转变,可能是一种不依赖于其外周滤泡细胞的自主变化过程。     

中华大蟾蜍输卵管分泌物在受精过程中作用的探讨

未曾包被输卵管分泌物的卵球,即无胶膜卵球,在授与高浓度精液(0.9—3.8×10~8个精子/毫升)条件下,并不能受精,从而进一步证实,输卵管分泌物是卵球受精的必要因素。透射电镜观察表明,未曾接触输卵管分泌物的体腔卵球和体外排出卵球的卵黄膜中,有许多纤维束(直径1200—1500A),纵横交织。在输卵管中运行时,卵球外周包被输卵管分泌物。输卵管各部分(直部、卷曲前部和卷曲部)分泌物中,都含有松散卵黄膜纤维束的因子,经其作用,卵黄膜纤维束松散成微纤维(直径50一70A)。卵黄膜纤维束松散程度与胶膜作用时间的长短呈现正的相关性;卵黄膜纤维束松散程度与卵球受精率可能亦具有正的相关性。