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HAU3是寄主范围很广的放线菌噬菌体。Southern杂交实验表明,HAU3可以整合到吸水链霉菌应城变种10-22和变铅青链霉菌66的突变体ZX1的染色体中,形成溶原,其溶原菌自发释放HAU3,不受热激和紫外线照射的诱导。通过比较HAU3衍生噬粒pIJ8300的DNA酶切片段在加热前、后电泳带谱的区别,将HAU3的cos位点在pIJ8300的图谱上得到了定位。还利用Southern杂交的方法定位了HAU3与宿主形成溶原时附着位点(attP),并利用脉冲电泳技术定位了在变铅青链霉菌ZX7和吸水链霉菌应城变种10-22中形成溶原的附着位点(attB)。这些信息均有利于以HAU3为基础的载体的发展和优化。 相似文献
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大线性质粒pHZ1000,pHZ1001在链霉菌种间的接合转移 总被引:1,自引:0,他引:1
从1979年首先在娄彻氏链霉菌(Streptomycesrochei)中发现第一例原核生物线性质粒pSLA2[1]至今,人们已在多种链霉菌中发现了线性质粒,大小12kb到640kb不等[2]。从红球菌[3]和诺卡氏菌中[4],在硫杆菌属和螺旋体属中,以及酵母、丝状真菌等真核生物中也都陆续发现了线性质粒的存在[5],大肠杆菌噬菌体N15的原噬菌体也是一种特殊的线性质粒[6]。线性质粒存在的生物学意义引起了人们的浓厚兴趣。然而20多年以来,链霉菌线性质粒,尤其是大线性质粒的研究始终进展不快。目前有关链霉菌线性质粒复制机理、端粒结构的阐明,都… 相似文献
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Tn4556是在弗氏链霉菌UC8592中发现的一个类似于Tn3的转座子,在它转坐的非必需区中间插入紫霉素抗性基因vph所组成的复合体(Tn4556::vph),称为Tn4560.把Tn4560克隆到一个温敏性质粒pMT660(由PIJ702衍生而来)构建的重组质粒(pMT660::Tn4560)称为pUC1169.pUC1169不能直接转化吸水链霉菌应城变种1O-22,但可以以一定的频率转化其衍生菌株Q105(至少丧失了一个内源质粒的受体菌株.)从转化子中检测DNA,可以观察到完整的PUC1169的存在(仍为高拷贝).将携带了pUC1169的Q105菌株的孢子悬液以一定的稀释度涂布到无抗生素的平板上获得单个分散的菌株,把平板放在39℃下培养,待菌落长出丰满的孢子后,再分别影印到含有紫霉素和硫链丝菌素的培养基平板上,分离紫霉素抗性(vio~r)和硫链丝菌素敏感(thio~s)的菌落,即为pMT660“自杀”,而Tn4560在细胞中发生了转座的个体.从18个这类菌落中提取总DNA,经PvuⅡ酶解后,在琼脂糖凝胶上电泳,把电泳后的DNA转移到硝酸纤维膜上,与非放射性方法标记的pUC1169探针杂交揭示,每一个衍生菌… 相似文献
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质粒在大肠杆菌和链霉菌和FR-008之间的属间接合转移 总被引:5,自引:1,他引:4
tIJ8154是由链枪菌一大肠杆菌双功能穿梭载体pGM160衍生而来的.本文报道这个质粒从携带RP4的大肠杆菌细胞中向革兰氏阳性细菌一链霉菌FR-008中的转移.从两种宿主中分别提取质粒DNA,进行琼脂糖凝胶电泳,发现pIJ8154的结构在两种亲缘关系甚远的宿主中均是稳定的,这种接合转移的方法已经成为向链霉菌FR-008中转移基因的一种手段. 相似文献
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变铅青链霉菌ZX1,是由变铅青链霉菌JT46经NTG诱变后产生的一株修饰基因突变株,与其亲本JT46相比,ZX1除了与DNA降解有关的基因发生了突变(Dnd-,即该突变株的DNA在含有Fe2+的缓冲液中电泳不受到降解,而野生型变铅青链霉菌在同样条件下则遭到降解)以外,对噬菌体 HAU3的抗性也随之消失,这项特征主要表现在噬菌斑大小和成斑单位(效价)上的显著变化。研究结果表明,噬菌体 HAU3以同等的频率吸附野生型变铅青链霉菌及其突变菌株ZX1,从 HAU3基因组中没有克隆到被变铅青链霉菌识别的特异性靶位点;噬菌体HAU3的DNA也可以转染野生型变铅青链霉菌原生质,但其释放的噬菌体粒子只能感染突变菌株ZX1,而不能感染野生型变铅青链霉菌。噬菌体HAU3在突变株ZX1中的繁殖遵循一步生长曲线,单菌释放量大约为100,而 HAU3感染野生型变铅青链霉菌后,则检测不到噬菌体的释放。 相似文献
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变铅青链霉菌对噬菌体ψHAU3抗性与异常修饰之间的相互关系 总被引:1,自引:0,他引:1
变铅青链霉菌异常修饰突发菌株ZX1同时丧失了对噬菌体ψHAU3的抗性。遗传学杂交结果揭示,DNA降解和对ψHAU3抗性这两种表型从不发生分离。以ZX1为宿主和链霉菌低拷贝质粒SCP2衍生的载体pIJ922为载体,构建了变铅青链霉菌JT46的基因组文库。在8000多个转化子中获得了一个能使ZX1对ψHAU3显示抗性的杂合质粒,命名为pIJ8310。它除了含有完整的pIJ922外,还携带了大约11kb 相似文献