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HAU3是寄主范围很广的放线菌噬菌体。Southern杂交实验表明,HAU3可以整合到吸水链霉菌应城变种10-22和变铅青链霉菌66的突变体ZX1的染色体中,形成溶原,其溶原菌自发释放HAU3,不受热激和紫外线照射的诱导。通过比较HAU3衍生噬粒pIJ8300的DNA酶切片段在加热前、后电泳带谱的区别,将HAU3的cos位点在pIJ8300的图谱上得到了定位。还利用Southern杂交的方法定位了HAU3与宿主形成溶原时附着位点(attP),并利用脉冲电泳技术定位了在变铅青链霉菌ZX7和吸水链霉菌应城变种10-22中形成溶原的附着位点(attB)。这些信息均有利于以HAU3为基础的载体的发展和优化。 相似文献
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质粒在大肠杆菌和链霉菌和FR-008之间的属间接合转移 总被引:5,自引:1,他引:4
tIJ8154是由链枪菌一大肠杆菌双功能穿梭载体pGM160衍生而来的.本文报道这个质粒从携带RP4的大肠杆菌细胞中向革兰氏阳性细菌一链霉菌FR-008中的转移.从两种宿主中分别提取质粒DNA,进行琼脂糖凝胶电泳,发现pIJ8154的结构在两种亲缘关系甚远的宿主中均是稳定的,这种接合转移的方法已经成为向链霉菌FR-008中转移基因的一种手段. 相似文献
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大线性质粒pHZ1000,pHZ1001在链霉菌种间的接合转移 总被引:1,自引:0,他引:1
从1979年首先在娄彻氏链霉菌(Streptomycesrochei)中发现第一例原核生物线性质粒pSLA2[1]至今,人们已在多种链霉菌中发现了线性质粒,大小12kb到640kb不等[2]。从红球菌[3]和诺卡氏菌中[4],在硫杆菌属和螺旋体属中,以及酵母、丝状真菌等真核生物中也都陆续发现了线性质粒的存在[5],大肠杆菌噬菌体N15的原噬菌体也是一种特殊的线性质粒[6]。线性质粒存在的生物学意义引起了人们的浓厚兴趣。然而20多年以来,链霉菌线性质粒,尤其是大线性质粒的研究始终进展不快。目前有关链霉菌线性质粒复制机理、端粒结构的阐明,都… 相似文献
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ΦHAU3R是变铅青链霉菌66中对噬菌体ΦHAU3显示抗性的基因,已从基因组中获得分离。将基因组中邻近于该基因两侧的一个3.5kb和另一个3.8kb的DNA片段分别以其在染色体上的天然取向插入到一个由pIJ101衍生的质粒pIJ653上,构建成pHZ806。然后在pHZ806上对应于pIJ101复制子的区域中插入一个spc/str抗性基因,同时在3.5kb和3.8kb片段之间插入一个潮霉素抗性基因(hyg),衍生出一个新质粒pHZ808。由于pHZ808中不具有完整的pIJ101复制功能区,所以它不能在链霉菌中复制。然而,在该质粒3.5kb和3.8kb片段之间插入的任何DNA片段,在导入到变铅青链霉菌中后都可借助于3.5kb和3.8kb两个片段与内源染色体的同源区域所发生的双交换而稳定地整入到内源染色体的特定区域(3.5kb和3.8kb片段之间),同时置换出染色体上的ΦHAU3-R基因。发生了这种基因置换的重组子菌株会对噬菌体ΦHAU3变得敏感,这种反选择方法可用来浓缩和初选携带定域插入片段的重组子。已利用潮霉素抗性基因(hyg)作为一个模式基因片段阐明了这种载体和这种在染色体上定域克隆外源基因片段的方法学和适用性。同时,用pHZ808作载体克隆另外的基因片段时还有另一个优越性:hyg可作为报告基因一同参与外源基因片段的定域整合,携带插入片段的重组子除了对噬菌体ΦHAU3显示敏感性以外,还对潮霉素显示抗性。 相似文献
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本文报道利用抗生素产生菌吸水链霉菌应城变种Leu-SmR。90-11菌株(Leu’smr)和庆丰链霉菌A553-1菌株(Pro-SmR)为亲株,以42%的PEG4000为助融剂,进行了种问原生质体融合,用间接法检出融合重组子38株,其重组频率约为4.5×10-4。重组子除孢子丝形态外,孢子堆颜色、抗药性、抗菌活性和抗生素生物合成能力方面与亲株均有一定差别,而且不同重组子之间也不相同,特别在抗菌活性方面,其中重组子FL-42和FL-48不仅具有两个亲株所产生的4种抗生素的活性,而且还产生两个亲株不具有的活性物质。通过纸层析谱表明,这种活性物质,两个重组子之间也不相同。 相似文献
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变铅青链霉菌对噬菌体ψHAU3抗性与异常修饰之间的相互关系 总被引:1,自引:0,他引:1
变铅青链霉菌异常修饰突发菌株ZX1同时丧失了对噬菌体ψHAU3的抗性。遗传学杂交结果揭示,DNA降解和对ψHAU3抗性这两种表型从不发生分离。以ZX1为宿主和链霉菌低拷贝质粒SCP2衍生的载体pIJ922为载体,构建了变铅青链霉菌JT46的基因组文库。在8000多个转化子中获得了一个能使ZX1对ψHAU3显示抗性的杂合质粒,命名为pIJ8310。它除了含有完整的pIJ922外,还携带了大约11kb 相似文献