一种新的麻疹(AIK-C株)、腮腺炎(Hoshino株)和风疹(Takahashi株)三价联合活疫苗

<正>在实际应用中,接种麻疹—腮腺炎—风疹三联疫苗有明显的简化儿童免疫程序、降低费用和减少医生病人间接触等优点,并经证实安全有效。美国实际使用三联疫苗已有十多年,受试者的抗体应答并未提示一种疫苗与另一种疫苗间有相互干扰,接种联合疫苗也未增加副反应发生率和严重程度。但也有研究者报告,将腮腺炎活疫苗与其它活疫苗同时接种与单独接种单价疫苗相比,前者导致较低的腮腺炎血清阳转率。     

微载体培养中不同感染剂量的麻疹病毒对病毒产量的影响

用微载体培养法在搅拌瓶和生物反应罐中小规模培养麻疹病毒,以探索在可能实现的大规模工业化麻疹生产中不同感染剂量ＭｕｌｔｉｐｌｙｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｎ（ｍ．ｏ．ｉ）的麻疹病毒对病毒产量的影响。增加ｍ．ｏ．ｉ可以将病毒的高峰期提前两到三天,但病毒产量却并不因此而提高,还有可能引起微载体上贴附的细胞层损坏加剧,从而被迫过早终止培养,导致病毒总产量下降。     

牛血清蛋白酶联免疫试剂盒性能的验证

为了全面验证研制的牛血清蛋白(BSP)酶联免疫试剂盒的性能,由3个部门6人协作进行了验证。结果表明,,6人进行的18次试验全部满足BSP-ELISA试剂盒的质控标准,达标率100%;6名实验人员对3、4、5、10、20ng/ml浓度的BSP标准品进行测定,结果变异系数在1.96%~6.24%之间,精密度较好;回收率在94.8%~98.7%之间,准确度理想,测量限量为3ng/ml。该试剂盒与人血白蛋白、卵清蛋白等均无交叉反应,对BSA、B-IgG特异性蛋白的检测回收率为101.2%和94.7%;与牛血清白蛋白试剂盒对比测定11种疫苗总计108批,符合率为96.3%,针对不同疫苗,BSP残余量约为BSA的1.12~3.13倍,验证结果表明,该试剂盒可检测疫苗中BSP而不仅是BSA,能更全面客观地反映疫苗中牛血清的真实情况,有利于疫苗生产的严格质量监控。     

微载体系统中采用不同感染方法对麻疹病毒产量的影响

微载体系统培养麻疹的一个关键参数是病毒感染方式,实验采用间接感染、33℃直接感染、4℃直接感染等三种方式以比较病毒产量的影响。实验结果表明间接感染和33℃直接感染方式所得收获液的滴度和收获量基本相同,而4℃直接感染方式在滴度和收获量方面均比前两种感染方式高。     

麻疹疫苗生产用毒株沪191增殖的动力学研究

通过延长麻疹病毒生产中感染的基质细胞培养时间并连续收获病毒,获得麻疹病毒生产的动力学曲线;通过工艺放大阶段的病毒增殖动力学研究,提高麻疹病毒产量。采用直接接种和间接接种法,接种不同感染量(MOI)的病毒,将转瓶培养单次收获改为转瓶培养多次收获,滴定整个培养期间每次收获液的病毒滴度,观察感染的细胞培养维持状况并计算病毒产量。结果表明,直接接种病毒培养期为20~25d,共收获病毒14~17次;间接接种病毒培养期24d,共收获病毒29次。通过延长感染细胞培养时间和连续收获病毒,获得病毒繁殖的动力学曲线。通过麻疹毒株的增殖动力学研究获得了麻疹疫苗生产毒株沪191增殖动力学相关参数。     

牛血清蛋白酶联免疫检测试剂盒的研制及验证

为研制酶联免疫试剂盒以检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白(BSP)含量,制备高效价高纯度的兔抗BSP多克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体,建立了ELISA双抗体夹心法并组建试剂盒,通过标准剂量曲线可对样品中所含BSP、BSA及B-IgG进行定量,经验证该方法标准曲线线性范围内r≥0.98,对BSP的检测限量为3ng/ml;分别检测5、10、20ng/ml含量的BSP时,试验内(n=12)和试验间(n=3)测定的变异系数在3.71%到7.29%之间,回收率在93.4%~106.3%,未见该方法与人血清白蛋白、卵清蛋白以及疫苗复合保护剂之间有交叉反应。该法敏感度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于疫苗牛血清残余蛋白的质量控制。     

ELISA法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究

为了验证ELISA法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性,用牛血清蛋白ELISA测定法与牛血清白蛋白ELISA测定法、牛血清IgG-ELISA测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定。结果显示,麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次为IgG含量的70.5倍、65倍、84.3倍,洗涤后病毒收获液中两者比值分别为4.2、1.8和8.1;牛血清白蛋白ELISA法和牛血清蛋白ELISA法均能检测出疫苗中牛血清白蛋白,但前者测不出牛血清IgG,而后者可准确检测牛血清IgG。牛血清蛋白ELISA测定法可同时检测牛血清白蛋白和牛血清IgG,更适用于疫苗残余牛血清蛋白含量的测定。     

应用微量滴定法测定天花疫苗效力

微量滴定法代替血球吸附法测定天花疫苗效力。通过对Vero细胞接种浓度和细胞病变判定时间的优化,确定了微量滴定法测定天花疫苗效力的方法,用Vero细胞微量滴定法和血球吸附法测定14批天花疫苗。两种滴定方法的检测结果差异有显著意义(P<0.05),二者存在正相关(r=0.76,0.001相似文献   

抗卵清蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备

为制备分泌抗卵清蛋白的杂交瘤细胞,以高纯度的卵清蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞,用ELISA间接法检测上清液中的抗卵清蛋白抗体效价,经3次单克隆化筛选,获得5株分泌抗卵清蛋白抗体的杂交瘤细胞株。