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为了全面验证研制的牛血清蛋白(BSP)酶联免疫试剂盒的性能,由3个部门6人协作进行了验证。结果表明,,6人进行的18次试验全部满足BSP-ELISA试剂盒的质控标准,达标率100%;6名实验人员对3、4、5、10、20ng/ml浓度的BSP标准品进行测定,结果变异系数在1.96%~6.24%之间,精密度较好;回收率在94.8%~98.7%之间,准确度理想,测量限量为3ng/ml。该试剂盒与人血白蛋白、卵清蛋白等均无交叉反应,对BSA、B-IgG特异性蛋白的检测回收率为101.2%和94.7%;与牛血清白蛋白试剂盒对比测定11种疫苗总计108批,符合率为96.3%,针对不同疫苗,BSP残余量约为BSA的1.12~3.13倍,验证结果表明,该试剂盒可检测疫苗中BSP而不仅是BSA,能更全面客观地反映疫苗中牛血清的真实情况,有利于疫苗生产的严格质量监控。 相似文献
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对虾白斑综合症病毒重组cDNA克隆的构建与分析 总被引:4,自引:1,他引:3
取经人工注射感染了对虾白班综合症病毒40-45h的凡纳对虾鳃组织,分离mRNA,以mRNA为模板合成双链cDNA,并克隆于PUC质粒的Not I/Sal I位点,构建了1000余株对虾感染后期鳃细胞的重组cDNA克隆,重组质粒经PCR鉴定插入片段,DNA斑点杂交分析目的片段,测定了20株对虾白斑综合症病毒的重组cDNA克隆的末端DNA序列,并对其进行了包含存在的开放阅读框架,启动区上游序列、编码产物的特性等分析。结果显示,PCR产物在0.3-1.6kb之间;大于1kb的克隆中有31.8%的克隆为白斑综合症病毒的重组cDNA克隆。已测序的不包含同源序列的13株克隆中含有14个开放阅读框,其中11个上游可检出启动子基序,4个可检出启动子调制元件,ORF转译产物的特性基序分析显示,有2个ORFs可检出锌指基序,3个ORFs可检出亮氮酸拉链基序,2个ORFs可检出NTP结合基序,未检定核定位信号基序。 相似文献
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为适应进口鲜活贝类的快速检验需求,有必要建立快速检测多种病原生物的方法.针对进口鲜活水产品中常见的细菌、病毒和原生动物等不同种类的病原生物,设计了退火温度相近的特异PCR引物,建立了能够同时定性检测不同种类病原生物的方法.在此基础上,针对不同病原生物设计了特异的荧光引物,建立了检测贝类中不同病原生物的荧光定量PCR体系,并进行了特异性与重复性试验.与传统的检测方法相比较,该方法检测贝类中的病原生物更为快速准确,结果直观,可以满足口岸进口水产品快速检测的需要. 相似文献
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一种经济快速提取丝状真菌基因组DNA的方法 总被引:2,自引:0,他引:2
以螺旋木霉(Trichoderma SpiraleXX)、小克银汉霉(Cunninghamella phaeospora MK)和卵形孢球托霉(Gongronella butleri XT)3种丝状真菌为材料,采用改进的CTAB法提取基因组DNA.方法改进后无需液氮、聚乙烯砒咯烷酮(PVP)和NaAc等试剂,过程简洁,且所需菌体量少,提取的DNA纯度较好,适用于一次微量提取多个样品的基因组DNA.此方法得到的基因组DNA可用于PCR扩增. 相似文献
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报道产自贵州省的中国藓类植物一新记录种———芒果树生藓( Erpodium mangiferae)。树生藓科( Erp-odiaceae)隶属于变齿藓目( Isobryales)木灵藓亚目( Orthotrichinales),该科全世界共有5属24种,主要分布在热带地区。中国报道有3属4种。该科的树生藓属( Erpodium),在我国曾经有过2种的记录,被认为是细鳞藓[Solmsiella biseriata (Austin) Steere.]和钟帽藓[Venturiella sinensis (Vent.) C. Müll.]的异名。2004年熊源新等人在贵州省罗甸县红水河谷采到1号树生藓科标本,最终鉴定为芒果树生藓( E. mangiferae C. Muell.)。此次发现也为树生藓属在中国的新分布记录。至此,我国的树生藓科共有4属5种。该文根据对标本的显微观察提供了详细的形态描述和各部分细节线条图,并对该种的分布状况进行了简要的讨论。根据资料,该种主要分布于印度南部、中部、北部和东北部,该种的发现地“贵州罗甸县红水河谷”从经纬度上看,与此前报道的最北分布地印度阿萨姆邦基本在同一纬度上,仅在经度上相差约10°,距离上相差约1400 km。该种与Erpodium glaziovii的外形相似,但根据雌苞叶与营养叶的尺寸比较,以及叶片细胞中是否存在原始小囊( primordial utri-cle)等可将两者区分开。 相似文献
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为研制酶联免疫试剂盒以检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白(BSP)含量,制备高效价高纯度的兔抗BSP多克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体,建立了ELISA双抗体夹心法并组建试剂盒,通过标准剂量曲线可对样品中所含BSP、BSA及B-IgG进行定量,经验证该方法标准曲线线性范围内r≥0.98,对BSP的检测限量为3ng/ml;分别检测5、10、20ng/ml含量的BSP时,试验内(n=12)和试验间(n=3)测定的变异系数在3.71%到7.29%之间,回收率在93.4%~106.3%,未见该方法与人血清白蛋白、卵清蛋白以及疫苗复合保护剂之间有交叉反应。该法敏感度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于疫苗牛血清残余蛋白的质量控制。 相似文献
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壳聚糖抑制植物病害的研究进展 总被引:32,自引:1,他引:31
壳聚糖是一种用途十分广泛的具有生物活性的高分子化合物,本文论述了壳聚糖在抑制作物病害方面的作用。壳聚糖和为土壤改良防治土传病害、用作种衣制防治种传丰、用于果蔬保鲜控制收获后病害,还可作为植物生长调节剂、病害剂促进植物生长、诱导提高植物的广谱抗生。壳聚糖抑制植物病害具有多重机制。文章对壳聚糖等甲壳糖素衍生物在农业上的应用剪影进行了讨论。 相似文献
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乳糖诱导重组多价人精子表位肽在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
旨在研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组多价人精子抗原表位肽的表达及诱导表达的优化条件.在摇瓶发酵条件下,通过改变培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间和诱导方式等条件,利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,研究以上条件改变对GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白表达量的影响,并与IPTG诱导结果相比较.结果显示,在摇瓶试验中,最优表达条件为选用TB培养基,在菌体对数生长的中期进行诱导,诱导温度37℃、乳糖诱导终浓度3 mmol/L、诱导时间6 h.GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.5%,且主要以可溶形式表达,与IPTG的诱导结果相同.分批流加乳糖和一次性加入乳糖诱导,效果一样.乳糖可以替代IPTG作为诱导剂诱导GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达,优化条件下可获得与IPTG相同的诱导表达效果. 相似文献
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夜间增温对冬小麦根系生长和土壤养分有效性的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
气候变暖存在明显的昼夜不对称性,夜间气温升高幅度显著高于白天.本研究采用夜间被动式增温系统,于2009-2010年在我国冬小麦主产区(石家庄、徐州、许昌和镇江)进行全生育期田间增温试验,研究了土壤pH值、速效养分和抽穗期冬小麦根系对夜间增温的响应.结果表明:与不增温对照相比,夜间增温显著降低了土壤pH值和速效养分含量,并在一定程度上提高了根系干质量和根冠比.冬小麦整个生育期,夜间增温分别使石家庄、徐州、许昌和镇江试验点土壤pH值平均降低0.4%、0.4%、0.7%和0.9%,碱解氮含量平均降低8.1%、8.1%、7.1%和6.0%,速效磷含量平均降低15.7%、12.1%、19.6%和25.8%;速效钾含量平均降低11.5%、7.6%、7.6%和10.1%.增温处理下,石家庄、徐州和镇江试验点抽穗期冬小麦根系干质量分别平均增加31.5%、27.0%和14.5%;石家庄、许昌和镇江试验点抽穗期冬小麦根冠比分别平均提高23.8%、13.7%和9.7%.夜间增温可能通过改变土壤化学特性影响土壤养分供应和冬小麦生长. 相似文献