斐豹蛱蝶的繁殖生物学研究

在重庆进行了斐豹蛱蝶Argyreus hyperbius(L.)室内饲养和繁殖生物学研究。在自然光照条件下,室内温度22～25℃,相对湿度50%～80%,成虫喂10%的蜂蜜溶液,幼虫食堇菜科的植物,在此条件下,可进行自然交配、产卵;幼虫在盒内能正常生长发育并化蛹、羽化;同时在自然变温条件下,对斐豹蛱蝶蛹的发育起点温度和有效积温进行了研究,结果表明,发育起点温度为(14.10±0.19)℃,有效积温为68.33日·度。     

幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位的克隆和序列分析

幽门螺杆菌是消化道疾病的主要致病菌。其有效抗原成份热休克蛋白B亚单位（HspB)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用高保真PCR扩增系统扩增出HspB基因片段,将其克隆至质粒PUC19中,对其全序列进行了测定。克隆的HSpB基因序列与报道的序列完全一致。这一研究获得了序列正确的HspB基因,为将来以HspB分子为抗原的疫苗研制工作打下了良好的基础。     

交感神经调节外周血淋巴细胞再分布的机制

免疫细胞在机体各部位之间不停地迁徙,对于抗原识别和启动快速有效的免疫应答至关重要.大量研究表明:心理和身体应激可引起外周血免疫细胞亚群分布改变,而交感神经在调节应激引起的外周血淋巴细胞再分布的过程中扮演了重要角色.神经和免疫相互调节机制研究表明,交感神经活化时通过释放儿茶酚氨类神经介质,一方面通过引起血流动力学改变和对免疫细胞表面黏附分子表达的调节,引起外周血白细胞分布改变;另一方面通过诱导淋巴细胞凋亡参与调节慢性应激时淋巴细胞数目下降.     

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的克隆和序列分析

幽门螺杆菌是消化道疾病的主要致病菌。其有效抗原成份尿素酶B亚单位(UreB)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用高保真PCR扩增系统扩增出UreB基因片段,将其克隆至质粒pUC19中,对其全序列进行了测定。克隆的UreB基因序列与报道的序列完全一致。这一研究获得了序列正确的UreB基因,为将来以UreB分子为抗原的疫苗研制工作打下了良好的基础。     

普通Taq DNA聚合酶扩增幽门螺杆菌尿素酶基因长片段

ＰＣＲ反应扩增较长的ＤＮＡ片段比较困难。本实验对幽门螺杆菌染色体ＤＮＡ上的２７Ｋｂ尿素酶基因用普通ＴａｑＤＮＡ聚合酶进行扩增,扩增结果以琼脂糖凝胶电泳证实,得到所需的２７Ｋｂ的片段。该实验为今后幽门螺杆菌工作的进一步研究提供了经济,有效,简捷的条件。     

宋内氏痢疾菌无毒株S7表达Vi抗原工程菌的构建

将含有编码Ｖｉ抗原ＶｉａＢ基因片断的质粒转导进入宋内氏痢疾菌无毒株Ｓ７中,组建了重组菌株Ｓ７Ｖｉ。质粒电泳图谱显示重组菌株Ｓ７Ｖｉ中存在被转入的外源质粒带。重组株的生化特性没有改变。菌体凝集及Ｖｉ抗血清标记的ＳＰＡ菌液凝集反应证明在重组株的菌体表面,同时表达了Ｖｉ抗原和宋内氏毒菌的Ｏ抗原。以５×１０~８ＣＦＵ、１０×１０~８ＣＦＵ的重组株免疫近交系的ＬＩＢＰ小鼠,免疫小鼠对宋内氏毒株Ｓ６３攻击的保护率为６０％至９０％,对伤寒毒株Ｔｙ２攻击的保护率为２５％至４０％。     

痢疾结合疫苗LPS制备条件的优化研究

通过对痢疾杆菌LPS提取过程中主要制备环节的优化和改进,确立最佳提取条件和纯化过程,并应用优化后的工艺路线分别制备八批次福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌LPS;福氏2 a痢疾杆菌LPS批平均产量为1.633g,宋内氏痢疾杆菌LPS批产量平均为1.251g,批产量相对稳定,平均产量比优化改进前提高20%以上。LPS经过酸水解、柱层析纯化获得目标O-SP,福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌O-SP的得率分别为20%和28%。检测结果证明,LPS和O-SP各项指标均符合规程(草案)相关要求。实验为今后痢疾结合疫苗大规模制备工艺的改进和提高打下了基础。     

重组铜绿假单胞菌外毒素A工程菌的高密度发酵与表达

高密度培养表达大肠杆菌生产重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)。用上海高机公司的30L自控发酵罐,采用分批补料培养技术,维持葡萄糖的浓度始终处于较低的水平,并分批补加氮源,同时溶氧控制在30%～40%,pH自动调控至7.0,培养至对数中期进行诱导。重组菌最终发酵液光密度(A600)未诱导时达到44,诱导时达到36,在上清液中表达的rEPA蛋白的含量占总蛋白的28.1%,在菌体中表达蛋白含量占总蛋白的4.7%。本实验为rE-PA的大规模生产奠定了基础。     

番茄虽小用途很大——生物一轮复习《生物育种》

在江苏省高考的生物考纲中,生物变异在育种中的应用属于C等级,在进行一轮复习时,这一章节是每一个老师关注的重点,同样我也不例外。在复习这部分内容时,我选用番茄将这部分复习内容串联在一起,本文是将复习过程的叙述。     

毕赤酵母表达重组人白细胞介素11的纯化与鉴定

报道了毕赤酵母表达人白细胞介素11的下游工艺研究,并对其产物进行了分析鉴定。所用工艺流程为离心收集上清、超滤浓缩脱盐、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤。所得产物经SDSPAGE电泳、RPHPLC分析、N端和C端序列分析、质谱、等电点分析和生物学活性分析,结果表明：产品纯度大于97%,结构和性质与E.coli融合表达的Neumega完全一致。