从蚯蚓中联合提取抗氧化酶SOD、CAT的方法研究

本研究采用闪式提取技术,固液比为1:4(m/V)的2.5 mmol/L pH 7.0磷酸缓冲液,提取转速5500 rpm,提取时间2 min,从蚯蚓体内提取出SOD、CAT,并通过羧甲基纤维素CM-22离子交换层析实现SOD和CAT的联合提取分离,SOD、CAT的活性回收率分别达到88.23%和69.5%。在纯化工艺中经过丙酮沉淀和柱层析技术得到蚯蚓SOD纯品,比活达到9352 U/mg,产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为17 kD;通过柱层析纯化了蚯蚓CAT,比活达到22606 U/mg。     

闪提技术提取罗汉果甜甙

通过比较超声法、微波法及闪提法提取罗汉果甜甙的效率,发现闪提法具有较好的提取效果。通过正交试验优选得到罗汉果甜甙的最佳闪提条件为:料液比1∶20、转速6000 r/min、常温下提取4 min。最佳条件下甜甙提取率为10.057%,说明闪式提取技术是一种高效和低成本的提取方法。     

联合提取铁皮石斛中生物碱及多糖的研究

为提高铁皮石斛有效成分的综合利用效率,本研究利用闪式提取法对其中的生物碱、结合多糖与游离多糖进行了联合提取,并对酶解条件进行了优化。通过单因素试验所确定的最佳酶解条件为:料液比1∶30、纤维素酶添加量32 U/g、木瓜蛋白酶添加量39200 U/g、酶解时间2.5 h。生物碱、结合多糖及游离多糖的得率分别为0.136%、4.2%及19.3%;纯度分别为78.2%、81.3%及90.6%。利用GPC测定所提取的结合多糖及游离多糖的重均分子量分别为2373 Da、17987 Da。本研究确定了利用铁皮石斛联合制备生物碱及多糖的工艺,本工艺方法简便、成本低廉,适于工业化生产。     

蚯蚓GSH-Px提取与纯化的研究

以蚯蚓为原材料提取纯化了GSH-Px,通过比较超声波提取法、组织匀浆法和闪式提取法,得出闪式提取法提取效果最佳.通过正交实验优选得到蚯蚓GSH-Px的最佳闪式提取条件为:料液比1:6(m/V)、提取液pH值8.0、提取时间1min.在最佳条件下锝到的粗提液经硫酸铵沉淀、选择性酸碱变性、DEAE-cellulose和Sephadex-G100柱层析,最终得到纯化的GSH-Px,比活达到157.08 U/mg,活性回收率达到12.32％.产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为26 kD.