一种DHFR介导的可调控的腺嘌呤碱基编辑器的构建

摘要 目的：单碱基编辑器作为一种高效、精确、低脱靶的编辑系统,目前被广泛应用于生物体中。然而,Cas核酸酶本身的免疫原性具有引发机体免疫反应的潜在风险,可能阻碍其在基因治疗中的有效和安全使用。因而本研究旨在构建一种由DHFR介导的可调控腺嘌呤碱基编辑器（adenine base editor,ABE）。方法：将大肠杆菌来源的不稳定结构域-二氢叶酸还原酶（ dihydrofolate reductase,DHFR）的一种突变形式,融合于ABE的不同相对位置,构建数种DD-ABE载体。从已发表的内源基因靶点中挑选三个高效位点检测DD-ABE编辑水平。转染四种DD-ABE表达载体,用不同浓度TMP处理,通过Western Blot检测DD-ABE融合蛋白的表达水平。共转染DD-ABE与sgRNA质粒,通过基因组PCR扩增以及Sanger测序检测基因的编辑水平。结果：在构建的四种DD-ABE编辑器中,缺乏TMP的诱导,各组仅有非常少量的DD-ABE融合蛋白表达。TMP最佳工作浓度为10 μmol/L。DD-ABE载体加药组的蛋白表达水平以及基因编辑水平均高于未加药组。ABECD未加药组的碱基编辑效率最低,加药组的蛋白表达水平和编辑效率与ABEmax无明显差异。结论：本研究成功构建ABECD作为可调控的ABE,为其体内应用提供了新的技术依据。     

开普蛛科(蛛形纲,蜘蛛目)在越南的新纪录

报道了越南蜘蛛1新纪录科,开普蛛科Caponiidae。描述了越南1新纪录种:刚毛老挝蛛Laoponia saetosa Platnick & Jager,2008和1新种:拟刚毛老挝蛛L.pseudosaetosa sp.nov.。这2个种的雄性触肢器的形状基本相同,但是触肢器生殖球的大小差异十分显著,该结构在拟刚毛老挝蛛中显著小于刚毛老挝蛛(P<0.05)。标本采集于越南北部的3个国家公园:库风国家公园(Cuc Phuong National Park),吉婆岛国家公园(CatBa National Park)和三岛国家自然公园(Tam DaoNational Park)。拟刚毛老挝蛛,新种Laoponia pseudosaetosa sp.nov.(图6～8,10,13)正模♂,副模20♂♂,越南永丰省三岛国家公园,2007-04-01至2008-03-31,范鼎飒采。词源:新种因生殖器结构与刚毛老挝蛛Laoponiasaetosa Platnick & Jager,2008相似而得此名。     

越南幽灵蛛属一新种记述(蜘蛛目,幽灵蛛科)(英文)

记述采自越南菊芳国家公园的幽灵蛛属1新种,黎氏幽灵蛛Pholcus lexuancanhi sp.nov.,模式标本保存于中国科学院动物研究所。黎氏幽灵蛛,新种Pholcus lexuancanhisp.nov.(图1～15)新种与棒斑幽灵蛛P.clavimaculatus Zhu&Song,1999相似,但新种具短的附器,钩状突的形状和跗前突端部结构的形状可与后者相区别。正模♂,越南,菊芳国家公园,天宫洞(20°18’N,105°40’E;海拔256m),2008-07-21,李枢强采。词源:新种种名源自越南科学院LEXuan-Canh博士的姓名;名词。     

口服营养补充研究进展

疾病相关营养不良是住院病人一个重要的不良预后因素,影响病人的生活质量,除去吞咽困难及消化道不健全,当患者摄入不能满足机体的需求时建议给予口服营养补充(ONS)。越来越多的证据证明口服营养补充在营养不良治疗中的重要有利作用,尤其对急性病、老年人及低营养状态的病人效果显著。口服营养补充符合人体生理特点,安全、经济、易于吸收且依从性较好,可以有效改善患者的能量及营养元素的摄取,提高患者的生活质量。ONS越来越多的在临床应用,但其应用时间,具体方法以及临床效果的评价还存在争议,本文从以下几方面对ONS的研究进行综述,介绍ONS的起源与发展,完善ONS的定义,准确评估其临床疗效,具体阐明ONS在肿瘤疾病中的应用,为ONS更好的应用于临床提供比较好的理论依据。     

越南硬皮地蛛一新种(蜘蛛目,地蛛科)(英文)

报道越南地蛛科硬皮地蛛属1新种,三岛硬皮地蛛Calommata tamdaoensis sp.nov.。模式标本保存在中国科学院动物研究所。三岛硬皮地蛛,新种Calommata tamdaoensissp.nov.(图1～8)新种近似于梅氏硬皮地蛛Calommata megae Fourie,Haddad & Jocqué,2011,但新种触肢胫节极度膨大,而梅氏硬皮地蛛正常,无膨大;新种引导器粗壮,梅氏硬皮地蛛引导器开始狭窄过半后慢慢变宽;引导器远侧端具有1个很大的齿,但梅氏硬皮地蛛具1个小齿。正模♂,越南永福省三岛国家自然公园,2003年6月7日,范鼎飒采。词源:新种种名源自模式产地。     

硅纳米针阵列抗菌材料的制备及其抗菌性能研究

本文以简易经济的金属辅助化学刻蚀技术制备了具有高效杀菌性能的硅纳米抗菌材料并研究其形貌与结构,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为代表菌株,研究了纳米针抗菌材料的抗菌活性。实验证明,该抗菌材料对在其表面培养3 h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效率分别为85.12%,76.40%,表明该材料对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌均有高的杀菌效果,所制备的抗菌材料有望为医疗卫生系统在抵抗细菌污染方面提供解决方案。     

广西扶绥岩亮洞与巨猿伴生的鼠亚科及其动物群的层序对比

本文系统研究了产自广西扶绥岩亮洞与步氏巨猿下颌骨伴生的鼠亚科化石,包括：锡金小鼠（相似种）（Mus cf. M. pahari）、小巢鼠（Micromys minutus）、亚洲姬鼠（Apodemus asianicus）、细狨鼠（Hapalomys gracilis）、原始笔尾树鼠（Chiropodomys primitivus）、先社鼠（Niviventer preconfucianus）、安氏白腹鼠（Niviventer andersoni）、拟爱氏巨鼠（Leopoldamys edwardsioides）和始家鼠（相似种）（Rattus cf. R. pristinus）,共计8属9种,其中包括了6个绝灭种,鼠亚科绝灭种的比例高达67%。研究表明,岩亮洞鼠亚科动物群的性质比重庆巫山龙骨坡的相关鼠类显得稍进步,但比湖北建始龙骨洞以及广西崇左泊岳山巨猿洞和三合大洞的鼠亚科组合都要原始,因此推测其时代为早更新世早期（可能距今约200万年）。此外,依据主要属种的形态差异和演化水平,本文还初步建立了广西左江流域更新世鼠亚科动物群的层序,从早到晚依次为：扶绥岩亮洞（距今约200万年）—崇左泊岳山巨猿洞（距今约180万年）—崇左三合大洞（距今约160-120万年）—木榄山智人洞（距今约11万年）,这对于深入研究我国南方早更新世巨猿—中华乳齿象动物群的系统演化,以及探讨我国南方第四纪生物地层的划分具有积极的意义。     

两种鯻科鱼类线粒体16S rRNA基因片段序列分析

利用PCR技术成功扩增了高体革鯻(Scortum barcoo)和厚唇弱棘喇(Hephaestus fuliginosus)的线粒体16S rRNA基因序列.通过序列测定,得到791 bp的基因片段,碱基A、T、G、C平均含量分别为31.4％、21.2％、20.5％和26.9％,序列中的A+T含量明显高于G+C的含量,这与其他鱼类的16S rRNA基因片段研究结果相一致.通过序列分析发现,高体革鯻和厚唇弱棘喇两序列共存在23处碱基变异,其中碱基转换位点20个,碱基颠换位点3个,转换与颠换比率为6.7,没有发现碱基插入与缺失.与从GenBank中查到的3种蜊科鱼类的同源序列比对,邻接法(neighbor-joining)构建亲缘关系树,结果显示,5种蜊科鱼类聚在一起,分为独立的2支,匀蜊和单色匀鯻及花身蜊聚成1支,高体革鯻和厚唇弱棘鯻聚为1支,说明高体革鯻与厚唇弱棘蜊的亲缘关系比较近,而与其他另外3种鯻科鱼类亲缘关系比较远.     

澳洲宝石鲈线粒体DNA COI基因的克隆与序列分析

对澳洲宝石鲈线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(cytochrome oxidase subunit Ⅰ,COI)基因进行了扩增、克隆和测序,并对COI序列进行了分析.结果显示,澳洲宝石鲈COI基因序列长度为631 bp,其中A、T、G和C 4种碱基的含量分别为27.7%,23.6%,29.8%和18.9%.与从GenBank中查到的其他4种蜊科鱼类的同源序列比对,邻接法(neighbor-joining)构建系统进化树.结果显示,5种蜊科鱼类聚在一起,分为两个大的支系,其中花身蜊与条纹蜊首先聚成一支,然后与詹氏弱棘鯻和银锯眶鯻聚成的一支共同组成一个支系;而高体革鯻单独聚为一个支系,所得的聚类结果与传统的分类结果基本一致.     

越南蜘蛛区系的初步研究(蛛形纲:蜘蛛目)

依据镜检标本和已知文献, 初步研究了越南的蜘蛛区系。包括本文报道的 21 种新记录在内, 越南蜘蛛目前已知 320 种及 1 亚种。