TUNEL 法检测抑郁模型大鼠海马细胞凋亡的改进及应用

目的:探讨TUNEL法检测抑郁模型大鼠海马神经元细胞凋亡的改良方法。方法:20只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组。复制孤养加慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型(21天)。分别采用TUNEL试剂盒标准法和改良法观察大鼠海马区凋亡细胞的变化。结果:改良法与试剂盒标准法比较,非特异性染色明显减轻,背景清晰,差异明显。结论:改良的TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡结果更真实可靠。     

固相化学发光免疫分析技术在乙型肝炎IgM检测中的应用

据以往的实验,急性乙型肝炎的抗—HBc IgM可100％的阳性,其滴度也高,慢性患者和HBsAg携带者阳性率分别为77％和11％,其滴度也低。为此,我们认为在病毒性肝炎分型检测特异性IgM时,引进标准曲线定量的概念,将有助于新患     

QHS法检测抗体的产生及其与PFC法的比较

空斑技术(plaque forming cell-PFC)于1963年由杰尼氏(Jerne)介绍问世以来,已广泛用于抗体形成细胞的检测。PFC测定不仅可作为机体免疫状态的指标,而且也可采用进行细胞动力学的观察。该法特点是反应特异性高。检测能力强并可直观,特别适用于免疫学的基础研究,它是利用经SRBC免疫的小鼠脾脏制成脾细胞悬液,在半固体凝胶介质中与靶细胞SRBC混合,在补体参加下使靶细胞溶解,形成肉眼可     

血管性痴呆小鼠海马神经元ERK的表达变化

目的：观察血管性痴呆（VD）小鼠海马神经元中细胞外信号调节激酶（ERK）的表达变化,探讨其在VD发病中的作用机制。方法：采用双侧颈总动脉反复缺血／再灌注法制备小鼠VD模型,设立假手术组作为对照。术后第29、30d,经跳台试验和水迷宫试验对两组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察两组小鼠海马神经元中ERK的表达变化。结果：VD模型小鼠学习、记忆成绩较假手术组显著下降（P〈0．05）.模型组小鼠海马CA1区ERK1、ERK2的表达及海马CA3区p-ERK的表达较假手术组减少,均有显著性差异（P〈0．05）。结论：海马神经元内ERK的表达减少可能参与了血管性痴呆的发病机制,因此,应用能促进ERK表达的药物可能成为治疗VD的有效方法之一。     

颅脑创伤后大鼠脑组织脑红蛋白表达变化及其与神经元凋亡的关系研究

目的：研究大鼠弥漫性颅脑创伤后脑组织中脑红蛋白的表达变化情况,探究创伤后脑红蛋白表达变化及其与神经元凋亡的关系。方法：采用雄性SD大鼠50只,随机分为10组（n=5）空白对照组、伤后30min、1h、2h、6h、12h、24h、48h、72h和5d组。以Marmarou’s自由落体打击装置复制颅脑创伤模型,采用免疫组化技术检测伤后不同时间脑组织中脑红蛋白的表达情况及神经元凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达情况,并对所得数据进行统计学分析。结果：致伤区皮层神经元脑红蛋白表达分别于伤后2h、72h呈现出两次高峰表达;伤后30min～1h、48～72h期间大脑皮层区脑红蛋白表达的上调均伴随着Bax/Bcl-2比值上升趋势减缓甚至呈现下降趋势。结论：弥漫性颅脑创伤后脑组织中脑红蛋白的高表达在一定程度上可以拮抗创伤应激及伤后继发缺血、缺氧性损伤所导致的神经元凋亡,在颅脑创伤的超早期（〈3h）、急性期（〈72h）可能具有一定的神经保护作用。     

人肌型特异烯醇化酶放免分析法及初步应用

建立了人肌型特异烯醇化酶(hMSE)的放免分析法,抗血清的亲和常数为5.1×10⁹L/mol,采用改良的BHR法制备了 ¹²⁵I-hMSE,后者非特异结合率为3%,与抗血清(1∶10³)结合率达50.16%;批内和批间CV分别为8.6%和13%.回收率为95%-105%.标准曲线范围为5-320μg/L.最小检出率为5μg/L.最佳反应条件:0.1mol/LpH7.4PBS(含5mmol/L MgSO₄,0.1%吐温-20,0.1%NaN₃);反应温度和时间:37℃反应0.5h和4℃,0.5h,作为快速测定;或选用4℃反应24h.65例健康人血清hMSE浓度为23.9±10.9μg/L(x±s).hMSE超过57μg/L(x+3s).为阳性值.测定了AMI和肌病患者,血清hMSE明显升高.