一种纯化蓖麻毒素的新方法

该文介绍了一种新的提取、纯化蓖麻毒素的方法,首次将P-苯胺基-1-巯基-β-D-吡喃半乳糖苷（P—aminobenzyl-1-thoi-β-D-galactopyranoside）琼脂糖凝胶作为亲和层析介质,结合凝胶层析介质Sephcaryl S-200,通过两步层析纯化,获得了高纯度的蓖麻毒素。MALDI—TOF测得分子量为62925,LD50为12．4μg／kg。该方法可以制备高纯度蓖麻毒素。     

适配子在生化分析中的应用进展

适配子具有亲和力高、特异性强、靶分子范围广、稳定性好、制备及修饰容易、可重复利用等优点,可以作为与抗体竞争的一类分子识别物质,用于亲和PCR、生物传感器、适配子信标、色谱法、质谱法、毛细管电泳、流式细胞分析及荧光偏振等分析领域,显示出广阔的应用前景。     

大肠杆菌ppsA和tktA基因的串联表达

ppsA和tktA是芳香族氨基酸生物合成中心途径的两个关键酶基因,在大肠杆菌中,ppsA基因编码磷酸烯醇式丙酮酸合成酶A（PpsA）,该酶催化丙酮酸合成磷酸烯醇式丙酮酸;tktA基因编码转酮酶A,该酶在磷酸戊糖途径中生成4-磷酸赤藓糖起主要作用。采用PCR方法从大肠杆菌K-12株中扩增到ppsA和tktA,并实现了两基因的高效表达,其中ppsA活性提高了10.8倍,tktA活性提高了3.9倍,当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌进行表达时,PpsA的活性变化较大（2.1～9.1倍）,TktA的活性相对稳定（3.9～4.5倍）,且这两个基因单独表达和串联表达都能使芳香族氨基酸生物合成共同途径中关键中间产物DAHP的产量提高,且串联表达比单独表达较高。     

Cristria plicata肝脏、肌肉组织提取物的生化性质与抗肿瘤活性比较

选取一种水生贝类软体动物Cristria plicata,分别提取其肝脏、肌肉组织中的亲水成分,并对其进行了比较研究。结果表明,两种组织提取物中5kD以下的成分经HPLC分析基本相似,均无抗肿瘤活性,主要抗肿瘤成分是一些相对分子质量大于30kD的蛋白质;蛋白质、糖含量及SDS－PAGE分析结果均表明二者主要抗肿瘤成分的性质基本相似;Cristria plicata肝脏提取物与肌肉组织提取物的最大区别是前者在Sephadex G-25柱层析中比后者多一个相对分子质量约5－15kD的抗肿瘤活性级分。这些研究结果表明Cristria plicata抗肿瘤物质不仅存在于肝,也存在于于肌肉组织中,由于肌肉组织来源丰富,从而为开发利用这种抗肿瘤药物资源提供了可能性。     

槲寄生蛋白抗癌活性研究及新成分鉴定

目的评价槲寄生蛋白的抗癌活性,鉴定其中的新成分。方法以H22肝癌移植瘤为模型,评价槲寄生蛋白对肿瘤生长的抑制作用。采用CMSepharoseF．F．弱阳离子交换色谱,分离出一种低含量的槲寄生蛋白。基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其分子量。蛋白电泳后转印PVDF膜,采用Edman降解,测定该成分A,B两链的N端序列。结果槲寄生蛋白对H22的抑制率达80．2％,其中的CMO为未见报道的新成分。结论槲寄生总蛋白主要含有3种成分,且具有显著的抗癌活性。     

大肠杆菌ppsA和tktA基因的串联表达

ppsA和tktA是芳香族氨基酸生物合成中心途径的两个关键酶基因,在大肠杆菌中,ppsA基因编码磷酸烯醇式丙酮酸合成酶A(PpsA),该酶催化丙酮酸合成磷酸烯醇式丙酮酸;tktA基因编码转酮酶A,该酶在磷酸戊糖途径中生成4-磷酸赤藓糖起主要作用。采用PCR方法从大肠杆菌K-12株中扩增到ppsA和tktA,并实现了两基因的高效表达,其中ppsA活性提高了10．8倍,tktA活性提高了3．9倍,当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌进行表达时,PpsA的活性变化较大(2．1～9．1倍),TktA的活性相对稳定(3．9～4．5倍),且这两个基因单独表达和串联表达都能使芳香族氨基酸生物合成共同途径中关键中间产物DAHP的产量提高,且串联表达比单独表达较高。