中国维吾尔族人群MSY1(DYF155S1)基因座多态性及其结构特点

应用荧光标记MVR-PCR、Amp-FLP与DNA序列分析技术等检测106例中国维吾尔族人群无关男性个体血纱样品,揭示了中国维吾尔族人群Y特异的小卫星MSY1 (DYF155S1)基因座5′和3′端多态性及其基因结构特点。DYF155S1基因座的多态性表现为3个方面：（1）长度多态性;（2）5′端多态性;（3）3′端多态性。106例无关个体共检出37个不同长度的片段,5′端检出68个类型,3′端检出23个类型。综合这3方面多态性,106例个体间没有相同,其基因多样性（h）超过0.9999。DNA序列分析发现该基因座5′端表现有7种模块结构,3′端有2种模块结构。DYF155S2片段缺失率约为4.7%。MVR-PCR、Amp-FLP与DNA序列分析技术结合起来可以更充分地揭示人群Y染色体特异的小卫星MSY1（DYF155S1）基因座多态性,并提出命名方式,从而为人类遗传学及法医学研究提供了有用的方法和基础资料。 Abstract:The study is to reveal the diversity and gene structure of 5′ and 3′ end of DYF155S1 locus in Y-chromosome minisatellite among Chinese Uygur population.Fluorescent MVR-PCR（minisatellite variant repeat by PCR）,Amp-FLP(Amplified fragment length polymorphism) and DNA sequencing methods were used repectively to detect 106 unrelated males among Chinese Uygur population.The polymorphisms of DYF155S1 locus could be revealed in three aspects:(1) polymorphic length:the sizes of amplified fragments ranged from 1405 to 2505bp.There are 37 types found among the 106 unrelated males.(2) polymorphism at 5′ end of DYF155S1 locus,68 types found among the 106 unrelated males.(3) polymorphism at 3′ end of DYF155S1 locus,23 types found among the 106 unrelated males.In combination of these three aspects of polymorphism,none of the 106 unrelated males tested had the same allele,and the gene diversity(h) was over 0.9999.Seven and two types of modular structure were founded in the 5′ and 3′ end of DYF155S1 locus,respectively,by DNA sequencing.The alleles at DYF155S2 locus showed yes/no dimorphism and the rate of deletion was 4.7%.The polymorphisms of DYF155S1 locus were fully revealed by using combination of MVR-PCR, Amp-FLP and DNA sequencing methods, and we suggested the nomenclature for alleles of MVR loci.These methods are useful tools and provide basic data for the study of human genetics and forensic medicine.     

随机引物PCR技术在个体认定及亲权鉴定中的应用

随机引物ＰＣＲ技术（ＡＰ－ＰＣＲ）检测人ＤＮＡ指纹图用于法医学个体认定及亲权鉴定是一个非常有效和经济的方法。应用该技术对１００例无关个体ＡＰ－ＰＣＲ的ＤＮＡ指纹进行分析和１０个肯定亲生关系的家庭进行亲权鉴定,结果该技术的个体识别力非常高,亲权鉴定时的非父排除率也很高,且操作简便、快速,是一个值得推广的方法。     

云南白族人群Y染色体DYF155S1基因座多态性研究

揭示云南白族136例无关男性个体Y染色体小卫星DYF155S1基因座多态性。用已建立的AmpFLP和MVRPCR方法分析DYF155S1基因座长度多态性、5′端多态性、3′端多态性。DYF155S1基因座具有高度多态性,基因多样性（h）达09996。研究表明将AmpFLP和荧光MVRPCR结合起来更能充分揭示DYF155S1基因座多态性,可为遗传学、人类学及法医学的研究提供有效的工具和基础资料。     

7个Y-STR基因座荧光标记复合分型及在中国汉族群体中遗传多态性的研究

建立了FAM（蓝色荧光）标记的DYS456、DYS464a/b/c/d和DYS527a/b和JOE(绿色荧光)标记的DYS531、DYS709、DYS448和DYS522 7个Y染色体STR基因座(相当于11个位点)复合扩增分型体系。利用ABI3100遗传分析仪调查中国广东汉族151例和河南106例汉族无关男性个体的遗传多态性分布, 并探讨在法医学中的应用价值。结果显示, 此方法能作出正确分型的最低基因组DNA量为0.02 ng; 在女性成份为男性成份150倍的混合DNA样本(总DNA量为160 ng)中能正确检出全部7个Y-STR基因座的基因型。 广东和河南2个汉族男性群体中, 观察到的单体型分别有150、105种, 其中仅观察到1次的单体型分别有149、104种, 单体型多样性(HD)分别为0.999912、0.999820; 这组Y-STR单体型在两个群体中的分布差异有统计学显著意义(秩和检验: P<0.001)。此7个Y-STR基因座多态性分析适用于法医学实践和人类进化的研究。     

用荧光标记MVR-PCR方法研究中国汉族人群DYF155S1基因座多态性

建立简便、实用的DYF155S1基因座基因分型的银染和荧光标记半自动分析方法,对中国汉族155个无关男性个体血样本DNA进行分型,两种方法分型结果一致。155人共检出66种等位基因,有38个等位基因仅出现1次。根据图谱中第一条DNA片段及DNA条带数从小至大命名,频率最高的为18和22号等位基因,其第一条DNA片段大小为180bp,DNA条带数为连续的16和17个,频率均为0.065。这一位点的基因多样性（h）为0.9789。155人中有25人表现为连续DNA谱带中有1个或2个DNA条带的丢失（mull repeat）,序列分析证明丢失的DNA条带位置对应于3型核心序列。结果表明,本文建立的分析方法能很好地揭示DYF155S1基因座5′端多态性,是目前仅作1次PCR能获得个体Y染色体多态信息较高的技术。用本方法建立的中国汉族人群DYF155S1基因座等位基因频率资料,为群体遗传学研究及法医学应用提供了基础资料。     

线粒体DNA高变区hν1快速测序方法及应用

本研究目的是使线粒体DNAhv1区的测序更加简单、快速和准确,以利于法医学检案。将线粒体DNAhv1高变区分别用三对重叠的引物进行全序列扩增,对这三对引物的扩增产物进行测序分析。用经过大量实验反复摸索得到的稳定的实验条件,对已确定为同一母亲所生的兄弟二人的样品进行分析,结果完全一样;对待确定姐弟关系的样品进行分析,结果是认定的;操作时间较原方法缩短一半。结果表明该方法是可替代原法的快速测序法。     

线粒体DNA高变区hv1快速测序方法及应用

本研究目的是使线粒体DNA hv1区的测序更加简单、快速和准确,以利于法医学检案。将线粒体DNA hv1高变区分别用三对重叠的引物进行全序列扩增,对这三对引物的扩增产物进行测序分析。用经过大量实验反复摸索得到的稳定的实验条件．对已确定为同一母亲所生的兄弟二人的样品进行分析,结果完全一样;对待确定姐弟关系的样品进行分析,结果是认定的;操作时间较原方法缩短一半。结果表明该方法是可替代原法的快速测序法。     

混合DNA样品池扩增法及其应用

将个体 DNA提取出来后 ,按一定方式进行混合 ,构成混合 DNA样品池。这种混合 DNA样品可用于病因未明的遗传性及遗传易感性疾病的研究。在研究常染色体隐性遗传性耳聋致病基因时 ,发现与染色体 9q的 D9S92 2和 D9S30 1位点有相关性。此方法比通常的连锁分析法省时省力。在肿瘤相关基因或责任基因的研究、法医学的个体认定、基因突变的检测等方面均显示出实用性 ,值得推广     

一种改良的从银染的聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的方法

ＣｌｉｎＣｈｅｍ,１９９８,４４（９）报道了Ｓｔｅｖｅｎ等介绍的从聚丙烯酰胺凝胶上将ＤＮＡ转移到ＤＥＡＥ膜上的技术。此技术能同时进行多个样品的处理和纯化,被纯化的差异显示法（ＤＤＡ）产物电泳条带单一,分离的范围为１００～７００ｂｐ的ＤＮＡ,回收的ＤＮ...     

中国云南白族和新疆维族7个Y-STR基因座的遗传多态性

利用AB I3100遗传分析仪, 我们调查了7个Y-STR基因座构成的单体型在中国云南白族133例和新疆维族105例无关男性个体中的分布。7个Y-STR基因座包括DYS456、DYS464 a/b/c/d、DYS527 a/b、DYS531、DYS709、DYS448和DYS522。结果显示,云南白族和新疆维族2个民族男性群体中,分别观察到133、105种单体型, 均为仅观察到1次的单体型,单体型多样性(HD)均趋近于1, 比较这种单体型在两个群体中的分布差异,显示有统计学显著意义(秩和检验: P<0.001)。中国云南白族和新疆维族7个Y-STR基因座具有较高的多态性, 为法医学实践和群体遗传学的研究提供了有用的基础资料。