缘何细胞周期调控研究获得新千年第一个诺贝尔奖

今年是诺贝尔科学奖设立一百周年。这一奖项就象科学皇冠上的一颗璀璨的明珠 ,是对全世界最高科学成就的奖励。众所周知 ,生命科学是自然科学中的重要领域 ,其中细胞的生命活动越来越受到广泛关注。细胞分裂是一切生物机体生长、发育、生殖和遗传的基础。一个世纪以来 ,通过无数生物学家的拼搏、奋斗 ,作为细胞分裂基础的细胞周期调控的神秘面纱终于被揭开了。今年１０月 ,三位有世界声望的科学家因对此项研究做出的卓越贡献而共享了诺贝尔生理学或医学奖 ,这也是意料之中的事。他们是美国西雅图弗莱德·哈钦森 (ＦｒｅｄＨｕｔｃｈｉｎｓｏ…     

Studies of the Kinetochore Proteins of the Regenerating Liver and the Liver Cells of Rats at Different Stages of Development

The kinetochore composition of rat liver cells was studied by indirect immunofluorescence andimmunoblotting using human anti-kinetochore/centromere autoantibodies(ACAs).Besides threemajor antigens(50kD,42 kD and 34 kD),ACAs used in this study could also identify those of 32-30 kD and 20 kD in newborn rat liver cells,90 kD in old rat liver cells,37 kD and 32-30 kD inregenerating liver cells.These results indicate that some kinetochore antigen(s)may be related to cellproliferation or specific for different stages of development.     

抑制PKCα对乳腺癌细胞特性及cyclin E和CDK2基因表达的影响

将构建的表达PKC_α反义RNA的质粒,转入人乳腺癌细胞Bcap-37中,通过筛选与检测获得PKC_α表达受到抑制的细胞。随后分析了细胞生长的血清依赖性、软琼脂成集落和致瘤性的变化,以及cyclin E和CDK2基因表达所受到的影响。结果显示PKC_α表达受到抑制后,乳腺癌细胞生长的血清依赖性增加,软琼脂成集落能力下降,细胞致瘤性被强烈抑制,说明PKC_α表达下降或活性降低伴随着乳腺肿瘤细胞恶性程度的减弱。同时,结果还表明PKC_α表达受到抑制后,导致细胞周期调控系统中的cyclin E及CDK2表达水平下降,说明PKC_α参与的信号转导系统与cyclin/CDK参与的细胞周期调控系统在功能上有着较为密切的联系。     

应用RT-PCR检测基因的体外转录活性

体外转录分析已广泛应用于分子生物学领域．由于体外转录所产生的ＲＮＡ的量极少,需有灵敏的方法检测生成的ＲＮＡ．本研究发展了一种基于ＲＴ－ＰＣＲ技术鉴定体外转录产物的方法．将待研究基因的启动区与任何一段已知的含转录起始位点的编码序列相连,制备成体外转录的模板．体外转录后,用ＤＮａｓｅⅠ将ＤＮＡ模板完全降解;生成的ＲＮＡ经反转录合成ｃＤＮＡ;再以ｃＤＮＡ为模板,用相应的引物进行ＰＣＲ扩增,产物用琼脂糖凝胶电泳检测．该法灵敏度高,操作简便,无需同位素,且体外转录模板制备方便．还可结合其他技术,如Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析,能获得更高的灵敏度．     

抗肿瘤药物三尖杉酯碱对HeLa细胞增殖的影响及其与CenpB基因的关系

以人子宫颈癌细胞株HeLa为对象,采用免疫印迹、流式细胞光度术和间接免疫荧光．流式细胞光度术等方法,分析三尖杉酯碱对细胞增殖周期、凋亡等的影响,并检测着丝粒蛋白CenpB基因表达的水平,进一步分析它与细胞增殖的关系及三尖杉酯碱的作用效应。结果表明：0．2μg/mL三尖杉酯碱作用时间的延长带来HeLa细胞G1期缩短、S期延长的时相变化趋势,与之相关的是G2期向G1期过渡的缓慢延迟;凋亡率呈现增加的趋势;相对于未处理的对照细胞,0．2μg/mL三尖杉酯碱的作用使CenpB蛋白表达水平降低,但不呈简单的时间函数关系,这可能是细胞周期检验点应对药物诱导作用的反馈调节的体现,而重要着丝粒结构蛋白CenpB的基因表达调节与之可能有明显的相关性。     

间期和有丝分裂期HeLa细胞中核仁蛋白B23的分布和含量的差异

B23蛋白是真核细胞核仁的两种主要蛋白成份之一。已往的工作表明,细胞内B23蛋白的分布与rRNA合成速率和细胞的生长状况密切相关。本工作利用抗B23蛋白单克隆抗体,研究了被两种作用于微管的药物秋水仙酰胺(colcemid)和紫杉酚(taxol)阻断的有丝分裂期和间期HeLa细胞内B23蛋白的分布和含量的差异。结果发现有丝分裂期细胞内B23蛋白含量明显高于间期细胞,而且B23蛋白在两类细胞中的分布也有明显的不同。     

硬皮病抗血清为赤麂和小麂间的演化关系提供新证据

赤麂(Muntiacus muntjak vaginalis)是一种小型的亚洲麂,在形态上和另一种小麂(Muntiacus reevesi)形态相似,但赤麂分布更广,更靠南方。核型研究发现,赤麂的染色体数目是哺乳类动物中最少的,二倍体染色体数为6(♀)和7((?)),而小麂的二倍体染色体数为46条。过去有人根据染色体G带的形态和DNA的碱基序列等资料认为,小麂的46条染色体在长期生物演化过程中,经过染色体的融合而演     

哺乳类细胞中周期蛋白依赖激酶抑制因子

近两年,人们相继发现了一组能结合性抑制周期蛋白依赖激酶（ＣＤＫｓ）活性的蛋白因子──ＣＤＫ抑制因子（ＣＫＩｓ）。它们分别是：ｐ２１、ｐ１６、ｐ１５、ｐ２７和ＣＤＩｌ。ｐ２１和ｐ２７有一定同源性,能抑制多种ＣＤＫｓ的活性;ｐ１６和ｐ１５则同源性更高,能特异地与ＣＤＫ４、ＣＤＫ６结合;ＣＤ１１的结合特异性还有待进一步的研究。ｐ２１的表达受ｐ５３的正调控;ＴＧＦ－β则上调ｐ１５的表达以及ｐ２７的抑制活性。以上表明ＣＫｌｓ不仅是ＣＤＫｓ活性的调控者,而且还是抑癌因子与细胞周期调控之间的直接联系者。     

小鼠精子发生过程中泛素的表达

小鼠精子发生过程中泛素的表达@于晖$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学院!　中国 北京100875 @费仁仁$中国医学科学院药物研究所!　中国　北京100050 @陈晖$中国医学科学院药物研究所!　中国　北京100050     

核仁抗原的研究进展

核仁内含有大量的蛋白质成份,在rRNA 合成,RNP成熟、组装、运输的过程中起重要作用。本文论述了近年来对核仁抗原研究的概况,特别对与细胞增殖相关的多种抗原和银染蛋白进行了详尽的介绍。