宿根福禄考的组织培养与再生植株

植物名称:宿根福禄考(Phlox paniculate),又名天蓝绣球、锥花福禄考、草夹竹桃等。材料类别:茎段、幼嫩叶片。培养条件:基本培养基MS。诱导分化及生长培养基均采用MS BA0.5～1.0mg/L(单位下同) NAA0.01。生根培养基采用1/2MS NAA0.01～0.1或1/2MS IAA0.01～0.2。培养温度20～25℃。光照12小时。光照度为1500～2000lx。蔗糖2～3％。pH为5.6～5.8。琼脂0.6～0.8％。     

28例急性巨核细胞白血病实验室检查结果分析

目的:分析急性巨核细胞白血病(AMKL)患者实验室检查特点。方法:4管用8色抗体组合对28例AMKL患者的骨髓有核细胞进行免疫表型分析,同时结合分析患者骨髓细胞形态学、融合基因和染色体核型等检查结果。结果:28例AMKL患者中阳性表达率较高的是巨核细胞相关抗体:CD41a、CD61、CD42b、CD36,阳性率分别为81. 48%、92. 86%、72. 00%、70. 83%,其中,CD41a、CD61、CD42b三种抗体共表达的患者占53. 57%,至少表达两种抗体的患者占82. 14%。髓系祖细胞相关标志:CD117、CD34、CD38、HLA-DR阳性表达率分别为64. 29%、42. 86%、64. 29%和46. 15%,与非APL的AML患者相比表达率均较低(P 0.01);髓系全程抗原CD13、CD33在AMKL中阳性表达率与非APL的AML之间无统计学差异。髓系中后期抗原CD15及单核系抗原CD64、CD14、CD300e和胞浆抗原MPO、cCD79a和cCD3均阴性。与非Down综合征相关AMKL(non-DS-AMKL)相比,CD7与CD11b的表达在Down综合征相关AMKL(DS-AMKL)中较高(P 0.05)。AMKL患者中17例(65.4%)为复杂染色体核型,5例为+21染色体异常;仅5例患者核型正常。25例行白血病融合基因筛查,24例(96%)患者WT1基因表达增高(40.24±59.14%),12例患者(70.58%) EVI1基因表达增高(53.93±37.98%),4例患者融合基因阳性(2例MLL-AF9阳性,1例TLS-ERG,1例P210 BCL/ABL)。结论:AMKL中82.14%患者表达至少两种巨核细胞相关标志,髓系祖细胞标志表达相对较低,多为复杂染色体核型异常,WT1及EVI1异常表达率较高。     

流式检测PNH克隆的方法学探讨及临床筛检和意义

目的:探讨流式细胞仪高敏感方法检测PNH克隆的必要性和血细胞减少患者PNH克隆的发生率及临床意义。方法:采用CD59检测红细胞及FLAER联合CD24或CD14检测粒细胞和单核细胞的方法检测了20例健康志愿者和1 095例血细胞减少患者的PNH克隆比例,同时对31例患者采用传统的CD59方法检测粒细胞和单核细胞中CD59~-细胞比例。结果:根据健康志愿者正常背景和患者获取的细胞数,确定粒细胞、单核细胞和红细胞PNH克隆的最低检测限(LOD)分别为0.04%、0.10%和0.05%;827例患者FLAER~-CD24~-粒细胞、FLAER~-CD14~-单核细胞和CD59~-红细胞的中位比例分别为0.02%、0.02%和0.03%;318例(38.45%)患者粒细胞PNH克隆高于LOD,180例FLAER~-CD24~-粒细胞1.00%,粒红和粒单细胞的一致性只有43%～45%。138例FLAER~-CD24~-粒细胞≥1.00%,粒红、粒单和粒单红细胞的一致率分别为91.30%、97.83%和89.86%;比较CD59~-和FLAER~-CD24~-粒细胞、CD59~-和FLAER~-CD14~-单核细胞比例,CD59~-细胞比例明显更低(P0.000 1和P=0.000 9);26.85%和24.54%患者因出现FLAER~-CD24~+粒细胞与FLAER~-CD14~+单核细胞,导致FLAER单阴比例高于FLAER和锚连蛋白双阴比例,对PNH克隆比例低于0.10%的患者影响更大;36例PNH患者和50例MDS或AA患者PNH克隆比例分别为90.30%(44.49%～99.05%)和1.30%(0.10%～96.07%)(P0.000 1);PNH克隆比例等于41.81%时,诊断PNH的敏感度和特异度分别为100.0%和96.0%。结论:在本实验条件下根据正常背景值,确定粒细胞、红细胞的LOD分别为0.04%和0.05%。粒细胞PNH克隆比例≥1.00%,与单核和红细胞诊断PNH克隆阳性结果更一致,PNH克隆比例高于41.81%时PNH疾病可能性更大。     

成人t(8;21)急性髓系白血病患者初诊Ki-67的表达特征及预后意义

目的:研究成人t(8; 21)急性髓系白血病(AML)初诊Ki-67抗原的表达特征及预后意义。方法:采集2012年7月至2019年2月本院57例成人初诊t(8; 21) AML患者的新鲜骨髓标本,采用流式细胞术(FCM)检测CD34和Ki-67抗原,分析Ki-67表达与患者初诊生物学特征、疗效及复发的关系。结果:全部患者中,CD34~+Ki-67~+细胞比例的中位值为30. 5%(范围:10. 0%～65. 8%);通过受试者工作特征(ROC)曲线确定CD34~+Ki-67~+细胞比例的最适分界阈值,CD34~+Ki-67~+细胞高比例与初诊c-KIT基因突变阳性及WT1转录本低水平均明显相关(P=0. 001; P=0. 042)。随访的36例患者中,CD34~+Ki-67~+高比例比低比例患者具有明显更高的1年累积复发(CIR)率(P=0. 035);此外,初诊WT1转录本低水平和微小残留病(MRD)高水平(2个疗程巩固治疗后RUNX1-RUNX1T1转录本水平下降3-log)均与更高的1年CIR率明显相关(P 0. 0001;P=0. 041),初诊c-KIT基因突变阳性和白细胞计数 10×109/L的患者分别有较高的1年CIR率趋势(P=0. 091; P=0. 054)。联合分组显示,MRD高水平同时CD34~+Ki-67~+细胞高比例的患者比其他患者具有明显更高的1年CIR率(P 0. 0001)。结论:初诊骨髓高比例的CD34~+Ki-67~+可能是成人t(8; 21) AML患者预后不良因素,MRD联合初诊CD34~+Ki-67~+细胞比例可能比单纯MRD更好地预测复发。