小鼠胚胎神经干细胞的分离培养及其鉴定

且的探索小鼠胚胎神经干细胞的体外培养方法,并获取高纯度的神经干细胞,为神经干细胞的深入研究提供实验材料。方法无菌条件下分离E15天小鼠胚脑皮质,制成单细胞悬液,在bFGF和B27存在的培养基中培养扩增,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果培养的部分细胞在B27和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤出B27和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和胶质细胞分化。结论小鼠胚脑皮质存在具有多向分化潜能的神经干细胞,这些细胞可以在体外稳定培养、传代并自然分化,为细胞替代治疗提供了理想的细胞来源。     

动情周期中大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的表达

目的初步鉴定大鼠输卵管中存在与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白,并研究其在输卵管中的定位和不同动情周期中糖蛋白的表达变化.方法根据阴道涂片检查将大鼠分为:间情期(DE)组、动情前期(PE)组、动情期(E)组和动情后期(ME)组.用冰冻切片法、荧光组化技术和共聚焦显微镜技术观察大鼠输卵管中与BS-1结合糖蛋白的分布及表达变化.结果大鼠输卵管中存在与BS-1结合的糖蛋白,并呈节段性分布,即峡部＞壶腹部.动情周期中大鼠输卵管糖蛋白的表达:动情期＞动情前期＞动情后期＞间情期.结论大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白在动情期(E)峡部上皮表达最明显,具有雌激素依赖性.     

抗坏血酸对IL-1β体外诱导中脑神经干细胞分化为酪氨酸羟化酶阳性神经元作用的实验研究

目的体外观察抗坏血酸(ascroid acid,AA)对IL-1β诱导神经干细胞向酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元分化的作用,为帕金森病的细胞移植治疗提供实验资料.方法体外培养中脑神经干细胞并传代分组,在有血清条件下分别予以IL-1β及AA IL-1β诱导分化,TH免疫细胞化学鉴定分化结果并细胞计数阳性比例.结果有血清条件下IL-1β、AA IL-1β诱导中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元比例约为12.6%和14.3%,明显高于对照组(约2.6%,P<0.01);两实验组间相对无统计学差异(P>0.05);联合诱导组TH阳性神经元细胞形态更成熟.结论 IL-1β可以明显促进中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元,AA能够加强IL-1β诱导的TH阳性细胞的表型成熟,但在我们的实验条件下二者联合未能增加TH阳性细胞诱导率.