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乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁, 而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段, 乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后, 对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法, 探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10 L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明, FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基, 溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响, 甲醇诱导最佳终浓度为1% (V/V), 发酵的最适pH值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后, ELISA和 SDS-PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达, 最终菌体生物量达到310 OD600, 表达量达到27 mg/L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22 nm类病毒颗粒, 为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。 相似文献
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为探讨大豆蛋白复合酶解产物在促微生物生长和发酵中的可行性,利用2709碱性蛋白酶和中性纤维素酶复合酶解大豆蛋白,酶解产物经干燥、粉碎后添加到培养基中,通过接种微生物观察其生长状况和发酵情况表征效果。研究发现,大豆蛋白复合酶解产物可以促进微生物生长和发酵产酶,试验结论为微生物培养提供了新的代谢资源。 相似文献
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【目的】分析枯草芽孢杆菌纳豆菌亚种Bna05菌株代谢产物中脂肽类物质的存在情况,并探讨它们在抗霉功能中所发挥的作用。【方法】利用特异性引物对Bna05菌株进行脂肽合成酶类基因片段扩增、测序和BLAST比对分析;通过平板抑菌圈区域取样法获得Bna05菌株的高抗霉活性代谢产物,对该产物进行反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离;用琼脂微稀释法测定分离物的抗霉活性,并对活性分离物进行质谱鉴定。【结果】Bna05菌株含有sfp和srf AA基因,未检测到itu C、itu D、fen D、fen ACE、bym B、bym C基因;RP-HPLC分离得到3组抗霉活性物质F_2、F_3和F_4,F_2中未检测到脂肽类物质,从F_3和F_4中分别鉴定出两类Surfactin同系物:V_7-surfactin和I/L_7-surfactin。两类Surfactin分别与F_2组合使用时,均表现出抗霉协同作用;此外,与Surfactin单独使用相比,两类Surfactin混合物与F_2组合后的协同抗霉活性得到进一步增强。【结论】Bna05菌株所产脂肽类物质主要是V_7-surfactin和I/L_7-surfactin,Surfactin与Bna05菌株所产其它活性物质之间存在抗霉协同作用,而V_7-surfactin和I/L_7-surfactin的同时存在,对于增强这种协同抗霉作用是有利的。 相似文献
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为降低微生物培养基制备成本和实现冷榨花生粕蛋白质的深加工,本试验以双酶协同酶解（胃蛋白酶+碱性蛋白酶）冷榨花生粕蛋白质制备植物蛋白胨,从一般性状检查和化学指标两个方面对冷榨花生粕蛋白胨进行了质量分析。参考《微生物培养基的制造与应用》和《中国生物制品主要原辅材料质控标准》对蛋白胨进行了质量评价,并以枯草芽胞杆菌为试验菌进行了冷榨花生粕蛋白胨对细菌的增殖培养试验以评价其质量优劣。结果表明,双酶协同酶解制备得到的冷榨花生粕蛋白胨各项指标均满足生化蛋白胨的质量标准,与标准蛋白胨（胰蛋白胨）的对照试验发现两者差异不显著（p>0.05）,冷榨花生粕蛋白胨可完全替代胰蛋白胨用于枯草芽胞杆菌的增殖培养。 相似文献
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