纳豆芽孢杆菌Bna05菌株产抗霉脂肽的鉴定

【目的】分析枯草芽孢杆菌纳豆菌亚种Bna05菌株代谢产物中脂肽类物质的存在情况,并探讨它们在抗霉功能中所发挥的作用。【方法】利用特异性引物对Bna05菌株进行脂肽合成酶类基因片段扩增、测序和BLAST比对分析;通过平板抑菌圈区域取样法获得Bna05菌株的高抗霉活性代谢产物,对该产物进行反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离;用琼脂微稀释法测定分离物的抗霉活性,并对活性分离物进行质谱鉴定。【结果】Bna05菌株含有sfp和srf AA基因,未检测到itu C、itu D、fen D、fen ACE、bym B、bym C基因;RP-HPLC分离得到3组抗霉活性物质F_2、F_3和F_4,F_2中未检测到脂肽类物质,从F_3和F_4中分别鉴定出两类Surfactin同系物:V_7-surfactin和I/L_7-surfactin。两类Surfactin分别与F_2组合使用时,均表现出抗霉协同作用;此外,与Surfactin单独使用相比,两类Surfactin混合物与F_2组合后的协同抗霉活性得到进一步增强。【结论】Bna05菌株所产脂肽类物质主要是V_7-surfactin和I/L_7-surfactin,Surfactin与Bna05菌株所产其它活性物质之间存在抗霉协同作用,而V_7-surfactin和I/L_7-surfactin的同时存在,对于增强这种协同抗霉作用是有利的。     

不同地区草乌种子中生物碱含量的测定与分析

测定不同产地野生草乌（Aconitum kusnezoffii Reichb.）种子中生物碱类含量，并与草乌入药部分（块根、叶）生物碱含量做对比。采用HPLC法测定了内蒙古通辽市扎鲁特旗、赤峰市阿鲁科尔沁旗和赤峰市巴林右旗野生草乌的种子，色谱柱Supersil ODS2 5 μm（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1：三乙胺（75：25），流速为0.8 mL·min^-1，检测波长为235 nm，柱温为35℃。草乌种子中检测到生物碱类，以苯甲酰新乌头原碱含量最高。通辽市扎鲁特旗种子含量为7.647 9 mg·g^-1；赤峰市阿鲁科尔沁旗种子含量为8.256 3 mg·g^-1；赤峰市巴林右旗种子含量为7.512 6 mg·g^-1，双酯型生物碱含量较低。不同产地的总乌头碱含量通辽市的高于赤峰市的，同为赤峰市含量之间显著差异。相关文献报道草乌药材（块根）中双酯型生物碱的含量明显高于单酯型生物碱，本研究实验表明，不同地区草乌种子中单酯型生物碱的含量明显高于双酯型生物碱，为草乌种子的综合利用开发及筛选不同含量种质材料提供理论依据。