PEI介导的大规模基因瞬时转染研究进展

基因重组蛋白具有巨大的商业和科研价值。近年来,大规模基因瞬时表达(large scale transient gene expression,TGE)技术的出现提供了一种相较于传统筛选稳定细胞株重组蛋白生产工艺而言更加高效(high efficient)和更加节约人力(labor consuming)、物力(cost effective)和时间(time consuming)的解决方案。通过基因瞬时表达技术,可以在短时间内获得毫克至克级别的在分子结构、理化特性和生物学功能等方面都接近于原始存在的蛋白质分子,可以满足细胞信号转导、新药筛选和临床前研究等药物研发前期的阶段对重组蛋白的巨大需求。因此,该技术成为当前研究的热点。阳离子聚合物-聚乙烯亚胺(PEI)是目前报道的工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白领域最广泛使用的基因载体和转染试剂。本文就近年来PEI介导的大规模瞬时转染的转染机理、宿主细胞选择以及转染优化措施等各方面的最新研究进展作一综述。     

超声重复辐照孕鼠对子代海马NMDA神经损伤的影响

摘要 目的：探讨超声重复辐照孕鼠对子代海马N-甲基-D天冬氨酸(N-methyl-D aspartic acid,NMDA)神经损伤的影响。方法：孕12~14 d昆明种小鼠27只随机平分为三组-对照组、短时间辐照组、长时间辐照组。用超声探头在各组孕鼠进行辐照0 min、10 min与20 min,让母鼠自然分娩哺育幼仔,将各组仔鼠随机挑选12只,检测仔鼠海马组织NMDA表达与神经损伤情况。结果：辐照过程中无孕鼠死亡,短时间辐照组、长时间辐照组仔鼠第30 d与60 d的总路程、中央路程、中央时间都少于对照组(P<0.05),长时间辐照组低于短时间辐照组(P<0.05)。短时间辐照组、长时间辐照组仔鼠第60 d的神经元细胞凋亡指数、海马组织乙酰胆碱酯酶含量都高于对照组(P<0.05),NMDA蛋白相对表达水平低于对照组(P<0.05),长时间辐照组与短时间辐照组对比差异也都有统计学意义(P<0.05)。结论：超声重复辐照孕鼠能抑制仔鼠海马组织NMDA蛋白表达,促进神经元细胞凋亡与提高乙酰胆碱酯酶含量,从而降低仔鼠的自主记忆活动能力。     

医学高校实验室建设问题的探讨

高等学校实验室是教学、科研的重要场所,是培养具有创新能力和发散思维的科学研究与应用型人才的实验平台。高校实验室建设情况和管理水平,直接影响到学校教学质量和科研水平的高低。要建设高水平实验室,在重视设备投入的同时,必须重视实验技术队伍的同步建设,除此之外合理的实验室结构和资源配置、高水平的实验教学质量和高效率的管理工作等软件条件也不可或缺。只有大力加强实验室建设,才能更好应对医学教育领域呈现的综合化、一体化发展趋势,形成利于实验教学效益发挥的良性运行机制,实现实验室的可持续发展。     

一种新型助滤剂在血液制品生产中的应用研究

目的:探讨新型硅藻土用于血液制品组份分离过滤的适用性。方法:对比新型硅藻土与传统硅藻土的电镜扫描物理结构、金属离子含量、比表面积、离心湿密度等物理表征数据,并考察其在血浆蛋白分离阶段各组份过滤效果及最终产品的质量。结果:新型硅藻土与传统硅藻土比较,具有颗粒孔隙致密、金属离子含量低、比表面积大和离心湿密度小的特点;在血浆蛋白分离阶段的过滤过程中,按照传统硅藻土用量的70%左右使用新型硅藻土时,过滤时可得到理想的滤液浊度、较快的过滤速率、更小的过滤压力和均匀的滤饼分布;所得最终产品的质量符合《中国药典》及公司内控标准。结论:新型硅藻土可替代传统硅藻土用于血液制品的规模化生产,同时降低使用量。该应用研究对于降低血液制品的生产成本和提高产品质量具有一定的实际应用价值和参考意义。     

不稳定动脉粥样硬化斑块的研究进展

不稳定斑块破裂及继发血栓形成是导致急性心血管事件发生的主要病理基础。不稳定斑块的形成与炎症反应、细胞凋亡等有密切联系,新近研究表明,组织蛋白酶-S、生长相关基因蛋白-α和内质网应激在动脉粥样硬化斑块趋向不稳定的过程中发挥至关重要的作用。本文就相关研究进展进行综述,为深入了解不稳定斑块的形成机制提供依据。     

奶牛产后感染性子宫疾病对子宫和卵巢的影响研究进展

微生物入侵是引起奶牛产后子宫疾病的主要因素,产后子宫能检出丰富的微生物种群,主要包括公认的致病菌如大肠杆菌、隐秘脓杆菌、坏死梭杆菌等,机会病原菌如产气荚膜梭菌、肺炎克雷伯菌、微球菌等和潜在致病菌如消化链球菌、金黄色葡萄球菌等。近年来,运用分子微生态技术发现子宫中的微生物属于变形菌门、梭杆菌门、厚壁菌门、拟杆菌门和软壁菌门5个已知的门和一类未被培养的种群,其中拟杆菌属、梭菌属等种群与子宫疾病密切相关。细菌侵入子宫后,以大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌和以化脓隐秘杆菌为代表的革兰氏阳性菌可被子宫内膜细胞上的Toll样受体识别引起炎症反应,改变子宫前列腺素分泌类型,影响卵泡发育、黄体大小,降低血清中雌激素和孕激素浓度,造成奶牛不发情、不排卵,导致产犊间隔延长、产奶量和产犊数量下降,严重影响奶业经济效益。本文从产后奶牛子宫内主要病原菌的种类及其与子宫健康状态的关系、子宫内膜对病原菌的识别与先天免疫、子宫疾病对子宫和卵巢功能的影响等方面对国内外研究进展进行了综述。