能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性

摘要 目的：探讨能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性。方法：回顾性分析2018年6月-2021年6月我院经手术或穿刺活检病理证实为甲状腺肿瘤性病变的患者96例，其中29例为甲状腺癌局部浸润组（A组），34例为甲状腺癌无浸润组（B组），33例为甲状腺腺瘤组（C组）。另取56例甲状腺另一侧叶正常组织作为对照组（D组）。所有患者均完善能谱CT检查，采集图像后在能谱CT Viewer分析软件上测量病变区碘浓度，计算能谱曲线斜率。采用免疫组织化学染色分析Ki-67、VEGF、CD34、EGFR的表达情况。采用Spearman秩相关分析评价碘浓度、能谱曲线斜率与甲状腺癌肿瘤组织中Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达的相关性。结果：在平扫、动脉期、静脉期，A组、B组、C组和D组的碘浓度逐渐增大，两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。甲状腺癌局部浸润组织能谱曲线呈"低平型"，斜率为较小负值，正常甲状腺组织能谱曲线为下降型，斜率为负值；在平扫、动脉期、静脉期，A组、B组、C组和D组的能谱曲线斜率逐渐变小，差异均有统计学意义（P＜0.05）。A组中Ki-67、VEGF、CD34和EGFR的阳性表达率均高于B组和C组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。碘浓度在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关（P＜0.05），碘浓度在平扫与Ki-67表达呈正相关（P＜0.05），碘浓度在平扫与VEGF、CD34、EGFR表达无相关性（P＞0.05）。能谱曲线斜率在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关（P＜0.05），能谱曲线斜率在平扫与VEGF表达呈正相关（P＜0.05），能谱曲线斜率在平扫与Ki-67、CD34、EGFR表达无相关性（P＞0.05）。结论：能谱CT成像检查对甲状腺癌局部浸润深度的判断具有重要的价值，其定量参数碘浓度、能谱曲线斜率与Ki67、VEGF、CD34、EGFR具有相关性，可间接反映肿瘤微血管、肿瘤血管生成、甲状腺癌分化程度、浸润程度等情况，对评价甲状腺癌生物学行为可提供有价值的信息。     

油茶良种‘华硕’的组织培养及高效生根

以油茶‘华硕’带芽茎段为外植体,研究植物生长调节剂、珍珠岩对其快速繁殖及试管苗生根的影响。结果表明：茎段腋芽萌发的最佳培养基为：MS＋2.0 mg·L^-1 6-BA＋0.1 mg·L^-1 IAA,萌发率达88.68%;最佳继代增殖培养基为：WPM＋3.0 mg·L^-1 6-BA＋0.01 mg·L^-1 IBA＋6.0 mg·L^-1 GA3,增殖系数可达11.27;最佳壮苗伸长培养基为：WPM＋0.05 mg·L^-1 IAA＋6.0 mg·L-1GA3;最佳生根培养基为：1/2MS＋1.0 mg·L^-1 IBA＋50 g·L^-1珍珠岩,生根率95.83%。炼苗后移栽到泥炭土、珍珠岩、黄土（1：1：1,V/V/V）混合基质中,成活率达85%以上。     

研究报告：骨形态发生蛋白9通过p38激酶途径调控间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化

前期研究发现骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)具有较强的诱导间充质干细胞成骨分化的能力.为进一步揭示其诱导和调控间充质干细胞成骨分化的机理,利用BMP9重组腺病毒感染间充质干细胞C3H10T1/2,通过体外细胞实验和体内动物实验,初步分析BMP9是否可通过p38激酶途径调控间充质干细胞成骨分化.结果发现,BMP9可以通过促进p38激酶磷酸化而导致其活化,p38抑制剂SB203580可抑制由BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达和钙盐沉积,而且利用抑制剂SB203580抑制p38激酶活性后,BMP9诱导的Smad经典途径的激活也相应受到抑制,RNA干扰导致p38基因沉默同样也可抑制BMP9诱导的ALP活性、OPN表达、钙盐沉积以及裸鼠皮下异位成骨.因此,BMP9可通过活化p38激酶途径调控间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化.     

丛枝菌根真菌的垂直平板定时转动培养及菌丝生长观察*

设计了垂直平板定时转动培养方法暗培养丛枝菌根真菌（Gigaspora margarita Becker ＆ Hall）孢子,发现培养基上生长的营养菌丝较少分枝,培养基转动前后生长的菌丝之间有一明显的折点,定时转动所形成的众多折点将延伸菌丝分成若干个节段,使形成的菌丝面局限在易观察的小范围内。此法是诱导菌丝定向生长、测量菌丝长度和生长速度的好方法,为菌丝理化特性和生物学特性的研究提供了实验依据。活跃生长的菌丝,每天生长7.7±0.9mm。试验证明：丛枝菌根真菌菌丝延伸生长部位是菌丝尖端,其生长的向地性是对地心引力的感应,感应的敏感部位也在生长菌丝的尖端。     

GPC3对肝癌细胞糖酵解的调控作用研究

目的:探讨GPC3(glypican 3)在肝癌细胞糖酵解中的调控作用。方法:采用si RNA(small interfering RNA)干扰肝癌细胞中GPC3的表达后,采用q PCR(quantitative PCR)与Western blot实验检测肿瘤糖酵解关键调控分子Glut1(glucose transporter-1)、HK2(hexokinase 2)与LDH-A(Lactate Dehydrogenase A)的表达,通过检测培养液中葡萄糖的减少量分析GPC3对细胞葡萄糖摄取情况,通过检测培养液中乳酸含量与PH值分析GPC3对细胞乳酸产生的影响,通过检测细胞的氧耗速率,分析GPC3对线粒体氧化磷酸化功能的影响。结果:干扰肝癌细胞中GPC3的表达可抑制糖酵解关键调控分子Glut1、HK2与LDH-A表达,降低肝癌细胞葡萄糖摄取速率和细胞氧耗速率,且细胞培养液PH升高,乳酸产生减少。结论:肝癌细胞中GPC3高表达通过上调糖酵解关键调控分子Glut1、HK2与LDH-A表达而促进肝癌细胞糖酵解效应,同时抑制线粒体氧化磷酸化活性。这些结果进一步提示糖代谢重编程可能是GPC3促进肝癌增殖与转移的重要机制。     

黄曲霉Ste50衔接子蛋白对生长发育及致病性的影响

[目的] Ste50是真菌中重要的衔接子蛋白,在多个MAPK级联通路中起重要的信号衔接与传递作用。本研究鉴定出了黄曲霉AflSte50蛋白,并发现了其对黄曲霉的生长、产孢、致病能力和响应渗透压胁迫等方面的影响。[方法] 首先通过生物信息学方法在黄曲霉NRRL 3357中鉴定出ste50基因,并通过同源重组的方法构建了ste50基因的敲除和互补突变体菌株。而后,对基因敲除在黄曲霉生长发育、次级代谢产物合成和胁迫响应等方面的作用进行了研究。[结果] 与野生型相比,△Aflste50菌株生长速度和AFB₁合成量降低且不能产生菌核,同时对花生、玉米种子的致病能力下降。该基因在渗透胁迫条件下正调控MAP激酶的磷酸化水平,但对细胞壁胁迫无响应。[结论] Ste50（AFLA_002340）是黄曲霉衔接子蛋白,影响黄曲霉的生长、发育和AFB₁的合成,能够响应渗透压胁迫,在HOG通路中发挥作用。     

两种粪便保存方法对肠道菌群结构研究的影响

目的比较2种粪便保存方法（室温法和Invitek公司的粪便稳定剂保存法）对菌群结构研究的影响。方法应用PCR-变性梯度凝胶电泳技术（PCR-DGGE）方法,对用2种方法保存的3位志愿者粪便样品进行菌群结构的分析。结果室温法保存粪便样品24h后,S1个体菌群结构与原始样品的菌群结构相似度为83％,S2和S3的菌群结构与其原始样品的相似度仅为77％。而使用粪便稳定剂保存1d,期间各时间点样品菌群结构与原始样品相比变化较小,相似度在80％-90％。结论粪便稳定剂具有一定的稳定样品菌群结构的作用,在新鲜粪佰样品不能寺刻讲行深冻的情况下,使用粪便稳定剂是一种较好的样品保存方法。     

肺炎链球菌溶血素黏膜免疫抗定植保护作用的研究

目的原核表达△A146Ply蛋白,评价△A146Ply黏膜免疫对肺炎链球菌（Streptococcuspneumon—ioe,5．Pn）在宿主鼻咽部定植的保护作用。方法IPTG诱导、Ni—NTA树脂纯化获得纯化的△A146Ply蛋白,经黏膜免疫BALB／C小鼠,制备其特异性抗血清;进行体内抗定植实验,观察小鼠鼻咽部灌洗液和肺部残存的细菌数量,检测△A146Ply黏膜免疫对19F型肺炎链球菌在鼻咽部定植的保护作用。为验证该保护作用是否具有广谱性,培养血清型14型、3型、6型和2型S．pn,经鼻腔感染免疫后小鼠,评价△A146Ply蛋白黏膜免疫对多株肺炎链球菌定植的保护作用。进行体外抗黏附实验,检测△A146Ply蛋白及其抗血清是否对无荚膜的肺炎链球菌R6黏附A549细胞具有抑制作用。结果获得了纯度〉90％的目的蛋白;体内实验结果显示,△A146Ply黏膜免疫可以显著降低肺炎链球菌19F在宿主鼻咽部和肺部残存的细菌数量（P〈0．01）;14型和3型肺炎链球菌在免疫后小鼠鼻咽部及肺部定植的数量均显著下降（P〈0．05）,2型肺炎链球菌在免疫后小鼠肺部定植的数量显著下降（P〈0．05）,6B型肺炎链球菌在免疫组与对照组小鼠鼻咽部及肺部均无显著差异（P〉0．05）;△A146Ply特异性抗血清△A146Ply蛋白对R6黏附A549细胞的抑制效应呈剂量依赖性。结论△A146Ply蛋白经黏膜免疫BALB／C小鼠可以对多种血清型的肺炎链球菌在宿主鼻咽部及肺部的定植提供显著保护作用,为Ply作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白的应用提供了实验依据。     

奉节脐橙果实苯丙氨酸解氨酶活性及其基因表达与果皮褐变的关系

柑橘果皮褐变严重影响果实的商品价值和耐贮性．以奉节脐橙（Citrus sinensis Osbcck）果实为材料,通过采后常温、涂蜡、低温、机械损伤等处理研究了果实果皮褐变率、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性及PAL上基因在果皮褐变过程中表达水平的变化。结果表明,涂蜡、损伤处理均极显著地提高果实的果皮褐变率,而低温贮藏可显著降低其发生率;贮藏期问各处理的PAL活性均呈上升趋势,损伤处理PAL活性显著高于对照。果实发生褐变或受到机械损伤后,PAL2、PAL6基因的表达均比对照明显增强。结果首次表明脐橙果实PAL活性变化以及PAL2基因的表达与果皮褐变具有非常密切的关系．