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昆虫保幼激素促进家蚕杆状病毒系统的基因表达 总被引:9,自引:0,他引:9
杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression VecterSvstem,BEVS)的一个最大优点是外源基因的高效表达(Hy-perexpression).但是,不同的外源基因在BEVS系统中的表达水平相差很大,较低的如α-干扰素,表达量为1~5mg/L培养细胞;高的如β-半乳糖苷酶,表达量可达600mg/L培养细胞.外源基因在BEVS系统中表达量受到诸多因素的影响,如细胞的类型与质量,外源基因蛋白的性质,启动子序列的完整性,是否为融合蛋白等[1].如何使外源基因在BEVS系统中高效表达,是近年来该领域中研究最活跃的方向之一.已证实家蚕杆状病毒的表达量受宿主遗传型的影响,最低和最高的遗传型相差达7倍以上[2].林水中等发现家蚕饲料中添食适当浓度的硫酸铜可提高外源基因单位表达量10%左右[3].杆状病毒在复制循环中表现出两种类型:芽生病毒和包涵体病毒,其中芽生病毒引起宿主体内不同组织间的感染,包涵体病毒则引起宿主之间感染[1].杆状病毒基因组中蜕皮激素尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(egt)基因影响激素在宿主体内的平衡[4],egt基因通过糖基化作用使蜕皮激素失活,打破宿主体内的激素平衡,延长幼虫期,以利于病毒的增殖[5].家蚕血淋巴中保幼激素(Juvenile hormone,JH)的滴度同样决定着幼虫发育的进程[6],本文通过体表使用保幼激素,以研究保幼激素对家蚕核型多角体病毒和宿主之间的相互关系及对外源基因表达量的影响. 相似文献
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采用稀释分离法和小液滴分离法, 从丹江口水库水样中分离了一株硅藻。通过形态学观察和18S rDNA、SSU rDNA、rbcL的序列分析, 将其鉴定为谷皮菱形藻。以NaNO3、NH4Cl和尿素为氮源, 研究了不同氮素对其生长特性的影响。结果表明, 谷皮菱形藻在铵态氮、硝态氮和有机氮中均可正常生长, 但生长特性对不同氮素形态的响应有所不同。在NaNO3和尿素的培养条件下, 谷皮菱形藻的生长速率随氮素浓度的增加而相应增加, 而在NH4Cl培养基中, 生长速率随氮素浓度的增加表现出先增加后降低的趋势。在NH4Cl 350 μmol·L-1时达到最高, 最大比生长速率和细胞密度分别为0.2920 d-1和189×104 个·mL-1, 表明高浓度铵态氮对其生长有抑制作用。本研究可为谷皮菱形藻的分子鉴定提供依据, 也可为保护丹江口水库的水质安全提供基础资料。 相似文献
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喜旱莲子草MSAP分析技术反应体系的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立一个适于研究喜旱莲子草DNA甲基化的MSAP分析体系。方法:以喜旱莲子草为材料,采用改良CTAB法提取基因组DNA,并对影响MSAP分析的关键步骤包括基因组DNA酶切反应时间、模板DNA连接产物稀释倍数、预扩增产物稀释倍数等进行了优化。结果:改良CTAB方法提取的DNA质量较好,酶切反应时间5h,酶切连接产物稀释10倍进行预扩增,预扩产物稀释10倍进行选择性扩增,所得PCR产物经6%聚丙烯酰胺电泳,条带清晰可辨,并能有效检测喜旱莲子草基因组DNA甲基化的程度和状态。结论:为研究喜旱莲子草表观遗传适应机制奠定了基础。 相似文献
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免疫反应细胞经呼吸瀑布作用产生的活性氧是巨噬细胞促炎细胞因子和趋化因子表达的信号分子,但目前缺乏过氧化氢(H2O2)刺激巨噬细胞表达促炎细胞因子和趋化因子的直接证据.本研究以离体培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究体系,探讨外源H2O2对RAW264.7巨噬细胞促炎因子和趋化因子基因表达和生成的影响.MTT法结合实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,RAW264.7细胞在H2O2浓度低于40 μmol/L时不影响RAW264.7细胞的增殖活力.20 μmol/L和40 μmol/L H2O2显著增强RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因转录和蛋白质生成,并存在剂量依赖效应;而200 U/mL过氧化氢酶预处理则可减弱由H2O2刺激的TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因表达和蛋白生成.这些结果提示,H2O2是刺激巨噬细胞促炎因子和趋化因子表达或生成的重要因子,对机体炎症反应的发生具有重要作用. 相似文献
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中国对虾PC-Ⅲ系列抗菌肽的分离纯化及活性 总被引:4,自引:0,他引:4
以我国主要经济海产品中国对虾(Penus chinensis)为研究对象,通过Sephadex G-50、RP-HPLC等技术分离纯化到PC-Ⅲ系列中国对虾天然抗菌肽。经初步鉴定,该系列抗菌肽对革兰氏阴性和革兰氏阳性菌都表现出程度不一的抑菌活性,且不同程度地影响小白鼠离体回肠肌收缩,但无丝氨酸蛋白酶抑制剂活性。用MALDI-TOF质谱对样品进行分析,检测到分子量分别为1071Da和1311Da的两种抗菌肽。这些抗菌肽对对虾抵御微生物的侵袭具有重要的作用。 相似文献
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磁场作用对猕猴和兔眼形态及生化组分的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
磁场作用对猕猴和兔眼形态及生化组分的影响赵晓进张红绪李卫国宛霞(河南师范大学生物系,新乡453002)本实验通过对猕猴和兔眼部穴位施加较强磁场刺激,观察对眼形态的影响及测定其生化组成,为磁疗用于临床的可靠性和安全性提供实验资料。1材料和方法动物:猕猴... 相似文献
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鲤鱼年生殖周期斯坦尼氏小体重量和超微结构的变化 总被引:6,自引:0,他引:6
对鲤鱼 (Cyprinuscarpio)性腺指数 [GI ,(性腺重 /体重 )× 10 2 ]和斯坦尼氏小体 (corpuscleofStannius ,CS)指数 [CSI ,(CS重 /体重 )× 10 6],以及CS超微结构的变化做了一个年周期的跟踪观察。CSI与GI呈正相关 ;按囊泡和分泌细胞超微结构的变化 ,CS的生长期、分泌期和萎缩期在年周期中逐步演替。这种演替与光镜观察结果一致 ,提示与鲤鱼的繁殖周期密切相关。 相似文献