磁性纳米磁珠在微生物学检测中的应用

磁性纳米材料因具有磁响应性和可修饰等特点,被广泛地应用于生物技术各领域。本文介绍了磁性纳米材料的主要合成方法和表征,对其在生物医学领域的应用,特别是在微生物检测中的应用进行了综述。     

红车轴草中(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷对马铃薯腐烂茎线虫的麻醉活性研究

从红车轴草(Trifolium pratense L.)根乙醇提取物中分离得到了黄酮苷类化合物(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷,并运用核磁共振波谱学技术鉴定了其化学结构。采用实验室活体生物试验方法,研究了(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷对马铃薯腐烂茎线虫的麻醉活性。结果表明,该化合物对马铃薯腐烂茎线虫二龄幼虫有一定的麻醉活性,麻醉作用的强度与其浓度及作用时间密切相关。     

过氧化氢刺激RAW264.7巨噬细胞促炎细胞因子和趋化因子基因表达

免疫反应细胞经呼吸瀑布作用产生的活性氧是巨噬细胞促炎细胞因子和趋化因子表达的信号分子,但目前缺乏过氧化氢(H2O2)刺激巨噬细胞表达促炎细胞因子和趋化因子的直接证据．本研究以离体培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究体系,探讨外源H2O2对RAW264.7巨噬细胞促炎因子和趋化因子基因表达和生成的影响．MTT法结合实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,RAW264.7细胞在H2O2浓度低于40 μmol/L时不影响RAW264.7细胞的增殖活力．20 μmol/L和40 μmol/L H2O2显著增强RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因转录和蛋白质生成,并存在剂量依赖效应;而200 U/mL过氧化氢酶预处理则可减弱由H2O2刺激的TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因表达和蛋白生成．这些结果提示,H2O2是刺激巨噬细胞促炎因子和趋化因子表达或生成的重要因子,对机体炎症反应的发生具有重要作用．     

瑞香狼毒地上部分化学成分的研究

采用多种色谱技术,对瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)地上部分脂溶性部位的化学成分进行了研究,分离得到11种化合物,结合理化性质和波谱分析,其结构分别鉴定为:1-亚油酸-棕榈酸-甘油酯(1),亚麻酸(2),亚油酸(3),β-谷甾醇(4),亚麻酸乙酯(5),西瑞香素(6),异新狼毒素A(7),丙二酸单乙酯(8),伞形花内酯(9),新狼毒素B(10)和龙胆酸(11)。其中,化合物1、8和11为首次从该植物中分离得到。     

绿原酸对莴苣生长的化感作用及其机理研究

酚酸类化合物是一类重要的化感物质,广泛存在于农作物等植物体内以及耕作土壤中,与植物的化感效应以及连作障碍密切相关。该研究以蔬菜类植物莴苣为受体,采用植物细胞和生理学方法,分析酚酸类化感物质绿原酸抑制莴苣生长的活性效应及其作用机理,以揭示绿原酸介导的化感作用及连作障碍机制。结果显示:(1)绿原酸对莴苣的根长、茎长以及鲜重等生长指标均表现出低浓度(0.1和1.0μmol/L)促进、高浓度(10、100和1 000μmol/L)抑制的活性作用模式,其在10μmol/L及以上浓度时对根长和鲜重具有显著抑制作用,但在各浓度下对莴苣茎长无显著影响。(2)绿原酸处理后,莴苣根尖细胞分裂指数明显下降,随处理浓度的升高,各分裂时期的细胞比例也显著降低,导致细胞分裂过程受阻。(3)较低浓度(0.1、1.0和10μmol/L)绿原酸对莴苣根尖细胞活力无明显影响,较高浓度绿原酸(100和1 000μmol/L)使莴苣根尖死细胞显著增多,根尖端绝大部分细胞失去活力。(4)DHE荧光染色显示,与对照相比,低浓度(0.1和1.0μmol/L)绿原酸对莴苣根部的活性氧积累无明显影响,当绿原酸处理浓度大于10μmol/L时,随处理浓度升高莴苣根部的活性氧积累明显大量增多。研究表明,绿原酸能够诱导莴苣体内活性氧产生并积累,从而导致莴苣细胞分裂受阻、细胞活力降低,最终影响莴苣幼苗的生长发育。     

前列腺细胞REGⅣ基因功能的初步研究

目的:探讨人再生基因Ⅳ(REGIV)在前列腺细胞中的表达及意义.方法:构建REGIV基因的全序列过表达质粒.将全序列过表达质粒采用脂质体转染的方式转入前列腺细胞系PC-3中.应用Real-time-PCR方法检测REGIV基因mRNA表达,Westembloting检测REGIV基因蛋白质表达,MTT法分析细胞增殖活性.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染成功.REGIV基因的全序列过表达使REGIV基因mRNA的表达,蛋白表达提高,细胞增殖能力增强.结论:应用全序列过表达技术可以使前列腺癌REGIV表达水平特异性增高.前列腺癌增值能力的增强说明REGW可能与肿瘤快速增长有关.     

瑞香狼毒根中异新狼毒素A和新狼毒素B对松材线虫和拟松材线虫的触杀活性研究

从瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)根乙醇提取物中分离得到了两个二氢黄酮类化合物,结合核磁共振波谱学数据解析,确定其结构为异新狼毒素A(isoneochamaejasmin A)和新狼毒素B(neochamaejasmin B)。并采用实验室活体生物试验方法,研究了这两个化合物对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)和拟松材线虫(Bursaphelenchus mucronatus)二龄幼虫的触杀活性。结果表明,异新狼毒素A和新狼毒素B对两种线虫均具有一定的触杀活性,且在相同的处理时间和浓度下,新狼毒素B对两种线虫的触杀活性均强于异新狼毒素A。     

下丘脑室旁核胃动素对消化功能影响的研究

目的：研究下丘脑室旁核注入胃动素及其拮抗剂对大鼠消化功能和体重增长的研究。方法：将剂量为0.005-5nmol的motilin和GM109注入大鼠下丘脑室旁核,1小时后可观察到大鼠摄食量显著增加并持续到两小时后。进食量的计算是通过预先称量好的鼠粮和应用药物20分钟、1小时、两小时后剩余数量比较而得出。实验持续一周。将实验组和对照组的进食量和体重进行比较。结果：室旁核注入胃动素5nmol的实验组和合并应用GM1090.005nmol的实验组在应用药物后1小时和2小时,可观察到摄食量显著增加（p〈0.01）,一周后体重也增加（p〉0.05）,然而摄食量的增加有显著性差异,体重的增加并无显著性差异。其他实验组也没有观察到显著性差异。结论：胃动素有调节消化运动,促进胃肠排空,促进食欲的作用。可能由于胃肠排空是频繁的,没有充裕的时间消化吸收,从而体重增加无显著性差异。     

下丘脑室旁核胃动素对消化功能影响的研究

目的:研究下丘脑室旁核注入胃动素及其拮抗剂对大鼠消化功能和体重增长的研究。方法:将剂量为0.005-5nmol的motilin和GM109注入大鼠下丘脑室旁核,1小时后可观察到大鼠摄食量显著增加并持续到两小时后。进食量的计算是通过预先称量好的鼠粮和应用药物20分钟、1小时、两小时后剩余数量比较而得出。实验持续一周。将实验组和对照组的进食量和体重进行比较。结果:室旁核注入胃动素5nmol的实验组和合并应用GM1090.005nmol的实验组在应用药物后1小时和2小时,可观察到摄食量显著增加(p<0.01),一周后体重也增加(p>0.05),然而摄食量的增加有显著性差异,体重的增加并无显著性差异。其他实验组也没有观察到显著性差异。结论:胃动素有调节消化运动,促进胃肠排空,促进食欲的作用。可能由于胃肠排空是频繁的,没有充裕的时间消化吸收,从而体重增加无显著性差异。     

瑞香狼毒根中活性物质的分离鉴定及作用机理

以瑞香狼毒根为研究材料,模式植物拟南芥为受体,采用实验室活体生物实验方法研究了瑞香狼毒根提取物及不同极性溶剂萃取物对7 d龄拟南芥幼苗的生长抑制作用;采用活性跟踪的化合物分离方法,分析了其中的活性化合物成分,并通过拟南芥DR5-GUS转基因株系,研究了单体化合物对拟南芥生长发育及根系生长素分布的影响.结果显示,瑞香狼毒根乙醇提取物对拟南芥有很强的生长抑制作用,其乙酸乙酯和氯仿萃取物的抑制活性最为显著,从氯仿萃取物中分离得到两种香豆素类化合物伞形花内酯(1)和西瑞香素(2),其中化合物1能够显著抑制拟南芥幼苗生长及根系发育,且明显降低了根部内源生长素的分布水平;化合物2也有较为明显的抑制活性.研究表明,氯仿和乙酸乙酯萃取物是瑞香狼毒植物毒活性的主要有效部位;伞形花内酯(1)和西瑞香素(2)是瑞香狼毒植物毒活性的有效成分,化合物1对拟南芥生长发育的抑制作用与生长素途径密切相关.