大鼠脑片中细胞内游离钙动态变化的研究

目的：探索大鼠急性脑片中电刺激诱发的细胞内钙的动态变化规律。方法：采用表面灌流的急性脑片模型,结合电生理和激光共聚焦技术,利用细胞内钙荧光探针进行细胞内游离钙标记,观察电刺激诱发的脑片中神经细胞内游离钙的变化情况。结果：急性脑片组织中,钙标记染料的神经细胞内钙探针荧光强度,电刺激后出现显著增强,且具有波样特征,而Suramin明显抑制此反应,表现为钙探针荧光强度下降和钙反应时间出现延迟,两组之间差异具有统计学意义（P〈0．05）.结论：刺激诱发的大鼠急性脑片中瞬时动态钙信号变化具有一定的时空发生特征,且这种钙信号的时空变化过程可能与嘌呤能信号的作用有关。     

云南高背鲫鱼不同组织同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了滇池中云南高背鲫鱼(Carassius auratus)的脑、眼睛、肝脏、心脏、肌肉5种组织中的酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶的表达模式,并对各种酶的同工酶酶谱表型进行了分析。结果表明,云南高背鲫鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性,且同工酶的种类与活性变化与其功能相适应。     

五种豆科药用植物种子超低温保存技术研究

以豆科药用植物降香檀、决明、含羞草、灰毛豆和猪屎豆的成熟种子为材料,探讨含水量对其发芽率的影响,以及超低温冷冻方式对种子超低温保存的影响。结果表明,降香檀、决明、猪屎豆和灰毛豆种子发芽率均随含水量的下降而从80%左右降至20%以下,而含羞草种子含水量低于10%时,其发芽率仍在75%以上。经超低温冷冻后,五种豆科药用植物种子发芽率较对照组均有显著差异;适宜的含水量下,种子经过超低温冷冻后其发芽率与对照组差异不显著,甚至高于对照组。三种冷冻方法中,玻璃化冷冻法更适合降香檀种子的超低温保存,缓慢冷冻法更适合猪屎豆种子的超低温保存,快速冷冻法适合于决明种子、灰毛豆种子和含羞草种子的超低温保存。由此可知,液氮超低温冷冻法保存降香檀等五种豆科药用植物种子是可行的。     

氮磷钾营养水平对观赏向日葵生长发育及光合特性的影响

以观赏向日葵品种'富阳'为材料,采用3因素3水平的盆栽正交试验研究了氮磷钾用量配比对向日葵生长发育及光合作用的影响,以筛选最适宜的营养液配方.结果显示:在试验条件下,氮对观赏向日葵营养生长影响最大,尤其对株高有显著影响;磷对其生殖生长有显著影响,在120 mg/L磷水平下最早进入开花期;钾对其生长无显著影响.氮对观赏向日葵光合特性的影响最大,对净光合速率、胞间CO2浓度、蒸腾速率、气孔限制值的影响均达到显著水平,在试验条件下以280 mg/L氮施用量促进作用最为明显;磷对向日葵叶片光合参数无显著影响;钾对叶片气孔导度、叶绿素a、叶绿素总量影响显著,并以200 mg/L钾水平最为明显.研究表明,氮、磷、钾营养合理配施能有效改善观赏向日葵光合特性,提高光合速率,本试验条件下促进观赏向日葵生长发育及光合效率的最佳氮、磷、钾配比为N3:P2:K2＝14:3:10.     

大鼠p75NTR荧光真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的:构建大鼠p75神经营养素受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)cDNA序列的绿色荧光真核表达载体并鉴定其在人胚肾293(human embryo kidney 293,HEK293)细胞中的表达.方法:采用PCR方法从含野生型大鼠p75NTR的pDC316-RP75质粒中扩增目的片段,经EcoRⅠ和SaⅡ双酶切,定向克隆于pEGFP-N1质粒中,构建绿色荧光真核表达栽体pEGFP-N1-RP75,经酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,激光共聚焦及免疫组织化学法鉴定大鼠p75NTR的表达.结果:重组质粒经酶切鉴定和序列分析证实含有大鼠p75NTR的编码序列,转染后经激光共聚焦显微镜及免疫组织化学染色观察表明重组质粒能够在HEK293细胞中表达出具有活性的大鼠p75NTR片段.结论:大鼠p75NTR绿色荧光真核表达栽体构建成功并可在HEK293细胞中表达,为进一步研究奠定了基础.     

向日葵单子叶和三子叶突变体的形态特征

Phyllotaxis and morphological characteristics of monocotyledonous and tricotyledonous mutants ( found during cultivation process) and dicotyledonous plants of Helianthus annuus Linn. were observed. The results show that numbers of monocotyledonous, dicotyledonous and tricotyledonous plants are 8, 339 and 3, respectively in 350 cultivated plants of H. annuus, accounting for 2. 3%, 96. 9% and 0. 9% of total individual number, respectively, and their corresponding phyllotaxis is alternate, opposite and whorled types, respectively. Monocotyledonous plant has the fewest leaf number, the most leaf layer number, and the largest flower diameter; tricotyledonous plant has the most leaf number, the fewest leaf layer number, and the smallest flower diameter. There is no obvious difference in plant height of individuals with different cotyledon types. It is suggested that cotyledon number of H. annuus is obviously correlated with phyllotaxis type.     

超低温冷冻对羯布罗香种子结构和生理生化特性的影响

为长期、稳定、有效地保存羯布罗香(Dipterocarpus turbinatus Gaertn.F.)种子,探讨了低温冷藏对种子活力、结构和生理生化指标的影响。结果表明,45%的含水量是种子的安全储藏含水量;玻璃化冷冻和缓慢冷冻对种子结构损害较大,且冷冻后的种子活力下降幅度大;快速冷冻法是种子超低温保存的最佳冷冻方式;液氮冷冻降低了种子过氧化物酶、过氧化氢酶和脱氢酶活性,提高了α-淀粉酶活性,而对丙二醛含量无显著影响。因此,超低温保存羯布罗香种子是科学可行的。     

胰岛素对阿尔茨海然病大鼠血浆血小板活化因子及海马突触可塑性的影响

目的：探讨胰岛素对阿尔茨海默病（AD）大鼠血浆血小板活化因子（PAF）及海马突触可塑性的影响。方法：将30只SD大鼠随机分为治疗组（10只）、模型组（10只）、假手术组（10只）,采用侧脑室注射链脲霉素（STZ）建立AD大鼠模型。治疗组大鼠皮下注射胰岛素（0．1U／kg）,模型组及假手术组大鼠皮下注射等体积的生理盐水（1mL／kg）。通过Morris’s水迷宫实验评估各组大鼠的认知功能,酶联免疫吸附法测定各组大鼠的血浆PAF含量,免疫印迹法检测大鼠海马突触素的表达。结果：治疗4周后,模型组大鼠连续4天水迷宫的潜伏期均显著长于假手术组大鼠（P〈0．05）,而治疗组大鼠第2、3、4天水迷宫潜伏期均较模型组显著缩短（P〈0．05）,但仍长于假手术组大鼠（P〈0．05）;模型组大鼠的血浆PAF含量和海马突触素的表达均显著高于假手术组,而治疗组大鼠的血浆PAF含量和海马突触素的表达均显著低于模型组（P〈0．05）,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：皮下注射胰岛素可改善AD大鼠的认知功能,这可能与其下调AD大鼠血浆PAF水平以及保护突触的可塑性有关。     

超低温冷冻对益智种子生理生化特性的影响

益智(Alpinia oxyphylla)是我国四大南药之一,其种子为顽拗性种子,不耐干燥和低温,无法常规保存。为解决益智种子长期稳定保存的问题,该研究以益智种子为材料,从种子含水量以及冷冻方式方面优化益智种子超低温保存方法,并对比液氮冷冻前后种子发芽率、α-淀粉酶活性、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性、脱氢酶活性、丙二醛含量等活力指标,分析液氮超低温冷冻对益智种子生理生化特性的影响。结果表明:直接液氮冷冻含水量13.92%~14.38%范围的种子是益智种子超低温保存的最佳条件。液氮冷冻后,随着超低温冷冻时间的延长,益智种子发芽率先由76.76%下降至52.5%,再上升至65%,最后下降并稳定在50%以上。其种子α-淀粉酶活性先下降后上升,然后又下降,最后上升并稳定至冷冻前的水平。丙二醛含量则是先上升后下降,最后趋于平稳状态。过氧化物酶活性是先下降,然后稳定在恒定水平。超氧化物歧化酶活性是随着冷冻时间的延长而持续上升,脱氢酶活性则是持续下降。以上结果说明,液氮冷冻时间对益智活力有一定的影响,但对种子有些性能具有一定的促进作用。无论是发芽率,还是生理生化指标,都不同程度表明液氮超低温保存益智种子是可行的。     

有髓轴突横断损伤后钠通道聚集状态研究

目的:研究有髓轴突横断损伤后郎飞结区钠通道聚集状态的变化.方法:用雪旺细胞-背根神经元髓鞘化共培养系统复制周围神经髓鞘形成和郎飞结发育,于髓鞘化培养基中共培养第14天用前房角切开刀造成有髓轴突横断损伤,在损伤后1、2、3、4、5、6、7、14天进行髓鞘碱性蛋白和钠通道免疫荧光染色,损伤前共培养作为对照.利用SPOT图像分析软件测量钠通道聚集簇的直径、长度和直径/长度比.结果:损伤前钠通道蛋白在有髓轴突郎飞结区形成直径/长度比略大于1的聚集簇;有髓轴灾横断损伤后钠通道蛋白沿轴突纵向扩散,钠通道聚集簇的直径/长度比逐渐减小,损伤后第14天已无法检测到钠通道表达.损伤区出现节段性脱髓鞘.结论:轴突横断损伤可造成钠通道聚集簇扩散、消失,导致郎飞结结构破坏.