讨论一种放射免疫测定的标准曲线——T/B～[Ag]直线方程

放射免疫测定已发展成为临床化学、生物化学及其他许多学科的重要测试手段,关于放射免疫反应过程虽已有些描述,但所述反应过程的免疫化学含意还有待进一步阐明。在常规放射免疫测定中,人们可以发现取[Ag]对T/B作图时(Ag为外加的非标记抗原,T为标记抗原总脉冲数,B为被结合标记抗原的脉冲数),可以得到一条很好的直线,但对其内在联系却了解很少。本文试图探讨这一直线方程内各参数的内在联系,并对其应用进行了讨论。     

固相探针DNA圆点滤膜杂交法对大鼠肝和卵黄囊中甲胎蛋白及白蛋白基因表达的定性定量测定

甲胎蛋白和白蛋白是二个分子大小相近的血清蛋白,两者除在氨基酸及核苷酸顺序上有很高的同源性(分别为34％和50％)外,二级结构也很相似,表明它们在进化上有密切的关系.目前普遍认为它们来源于一个共同的祖先基因,并组成一个基因家族.但在发育过程中,它们的表达却很不相同.在哺乳动物的正常发育中,甲胎蛋白首先由卵黄囊,随后由胚肝合成.它的含量在胎儿血清中很高,临近出生时开始降低,出生后急剧下降,很快即达很低水平.成年动物的肝脏细胞仅合成很微量的甲胎     

快速放射免疫定量技术——改良放射对流免疫定量电泳

改进后的放射对流免疫定量电泳不仅具有简易、快速和灵敏度高等优点,而且重复性好。本文选用胰岛素、人血清白蛋白、人胎儿AFP 和HBsAg 四种抗原-抗体系统对这一技术进行了考验,均获得了满意的结果。对HBsAg 的定量测定只需6～7小时,另三种抗原需时更短,约3～5小时。因此认为这一技术有可能发展成为适合临床、科研需要的快速、精确的超微量定量手段。     

快速放射免疫定量技术——改良放射对流免疫定量电泳

改进后的放射对流免疫定量电泳不仅具有简易、快速和灵敏度高等优点,而且重复性好。本文选用胰岛素、人血清白蛋白、人胎儿AFP和HBsAg四种抗原-抗体系统对这一技术进行了考验,均获得了满意的结果。对HBsAg的定量测定只需6～7小时,另三种抗原需时更短,约3～5小时。因此认为这一技术有可能发展成为适合临床、科研需要的快速、精确的超微量定量手段。     

免疫吸附亲和层析法提纯抗原、抗体——甲种胎儿蛋白的純化

亲和层析法是利用生物高分子化合物特有的功能专一性,使可逆地与其相对应的固相配基结合,而将生物高分子从其它杂质中分离出来的一种方法。目前已应用于蛋白质、酶、核酸、病毒、抗原和抗体等的提纯。把抗原或抗体用共价键联结到固相载体上,用以分离和纯化相应的抗体或抗原的方法称为免疫吸附法。例如,血清甲种胎儿蛋白(AFP)与白蛋白     

应用T/B～[Ag]线性方程式求抗原决定簇数目

本文根据作者曾报道的放射免疫定量测定的线性方程式,采用经改良过的放射对流免疫定量电泳法,可在较短的时间内直接测定出抗原参加免疫化学反应的平均抗原决定簇数目n。实验测得猪胰岛素n_(InS)=1.5,人血清白蛋白n_(HSA)=16,人甲胎蛋白n_(AFP)=6,乙型肝炎病毒表面抗原n_(HBsAg)=145。并对所测得的n值结合各自的物理化学性质进行了讨论。     

甲种胎儿蛋白(AFP)结构与功能研究进展

甲种胎儿蛋白(简称AFP)是一种单链糖蛋白。在过去20年中,由于它作为胚胎、肝癌和胚源性肿瘤的特征性蛋白而受到了人们的广泛重视。AFP临床应用、物化性质、生物合成、基因调控等方面的研究均取得很大进展。近几年来,在分子水平上又发现AFP是不均一的,这种不均一性不但表现在其肽链的一级结构上,同样也表现在其寡聚糖单位结构上,这一发现推动了对AFP变种及其精细结构的研究。本文拟从蛋白质结构和糖基结构的差异来叙述     

甲胎蛋白(AFP)对巨噬细胞的作用

巨噬细胞是一类重要的免疫活性细胞,在机体免疫防御方面起着重要作用,不仅与B 细胞的抗体形成、T 细胞的激活等有密切联系,而且还能合成和释放大量具有重要生理功能的生物高分子以及直接作用于肿瘤细胞等,因此本文选择人和大鼠巨噬细胞为材料,观察了人体AFP(HAFP)对巨噬细胞的作用。(1)HAFP 具有抑制人巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,并改变巨噬细胞的电泳迁移率,HSA 没有这种作用。(2)AFP 阳性肝癌血清同样显示上述抑制作用,当去除AFP 后,抑制作用得到不同程度的解除。(3)大鼠腹腔渗出细胞与HAFP 的结合能力远远超过与HSA 的结合能力,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力受HAFP 的抑制率远较受HSA 的抑制率高。(4)HAFP 浓度与大鼠腹腔渗出细胞(巨噬细胞占70～80%)的结合率曲线、结合量曲线显示:(a)当HAFP<1毫微克/200微升时,K_D～2.5×10~(-12)M,HAFP 与腹腔细胞的作用符合正协同效应的变化规律;(b)当HAFP>1毫微克/200微升时,HAFP 的结合较松弛。(5)过氧化物酶标记免疫电镜定位观察到HAFP 滞留在大鼠腹腔巨噬细胞的表面。(6)置换实验证明HAFP 与腹腔细胞的结合有一定的特异性。根据以上结果,本文认为巨噬细胞的表面可能有HAFP 受体,HAFP 通过与巨噬细胞的结合抑制巨噬细胞的吞噬能力,推测在胚胎体内和正常成年个体内HAFP 起免疫调节作用,在肝癌患者体内起免疫抑制作用。