人胚肝甲胎蛋白多聚核糖体的免疫沉淀分离法

作者用超离心法分离人胚肝的总polysome。通过免疫电镜的观察表明,总polysome 中不仅含有合成人AFP 的polysome,而且在AFP polysome 的新生肽链上已具有AFP 的免疫决定簇。用~(125)I 体外标记的总polysome,按Shapiro 法,Innis 法和Schütz 法进行免疫沉淀,来分离AFP polysome,所得产物的纯度约在30～40%之间。在进行免疫沉淀反应时,控制抗人AFP 抗体的用量是很重要的。使用较低量的抗体不仅可以提高产物的纯度,而且AFPpolysome 也沉淀得比较完全。     

免疫吸附亲和层析法提纯抗原、抗体——甲种胎儿蛋白的純化

亲和层析法是利用生物高分子化合物特有的功能专一性,使可逆地与其相对应的固相配基结合,而将生物高分子从其它杂质中分离出来的一种方法。目前已应用于蛋白质、酶、核酸、病毒、抗原和抗体等的提纯。把抗原或抗体用共价键联结到固相载体上,用以分离和纯化相应的抗体或抗原的方法称为免疫吸附法。例如,血清甲种胎儿蛋白(AFP)与白蛋白     

人胚肝甲胎蛋白多聚核糖体的免疫沉淀分离法

作者用超离心法分离人胚肝的总polysome。通过免疫电镜的观察表明,总polysome中不仅含有合成人AFP的polysome,而且在AFP polysome的新生肽链上已具有AFP的免疫决定簇。用~(125)I体外标记的总polysome,按Shapiro法,Innis法和Schutz法进行免疫沉淀,来分离AFP polysome,所得产物的纯度约在30～40%之间。在进行免疫沉淀反应时,控制抗人AFP抗体的用量是很重要的。使用较低量的抗体不仅可以提高产物的纯度,而且AFPpolysome也沉淀得比较完全。     

甲胎蛋白(AFP)对巨噬细胞的作用

巨噬细胞是一类重要的免疫活性细胞,在机体免疫防御方面起着重要作用,不仅与B 细胞的抗体形成、T 细胞的激活等有密切联系,而且还能合成和释放大量具有重要生理功能的生物高分子以及直接作用于肿瘤细胞等,因此本文选择人和大鼠巨噬细胞为材料,观察了人体AFP(HAFP)对巨噬细胞的作用。(1)HAFP 具有抑制人巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,并改变巨噬细胞的电泳迁移率,HSA 没有这种作用。(2)AFP 阳性肝癌血清同样显示上述抑制作用,当去除AFP 后,抑制作用得到不同程度的解除。(3)大鼠腹腔渗出细胞与HAFP 的结合能力远远超过与HSA 的结合能力,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力受HAFP 的抑制率远较受HSA 的抑制率高。(4)HAFP 浓度与大鼠腹腔渗出细胞(巨噬细胞占70～80%)的结合率曲线、结合量曲线显示:(a)当HAFP<1毫微克/200微升时,K_D～2.5×10~(-12)M,HAFP 与腹腔细胞的作用符合正协同效应的变化规律;(b)当HAFP>1毫微克/200微升时,HAFP 的结合较松弛。(5)过氧化物酶标记免疫电镜定位观察到HAFP 滞留在大鼠腹腔巨噬细胞的表面。(6)置换实验证明HAFP 与腹腔细胞的结合有一定的特异性。根据以上结果,本文认为巨噬细胞的表面可能有HAFP 受体,HAFP 通过与巨噬细胞的结合抑制巨噬细胞的吞噬能力,推测在胚胎体内和正常成年个体内HAFP 起免疫调节作用,在肝癌患者体内起免疫抑制作用。     

甲胎蛋白(AFP)对巨噬细胞的作用

巨噬细胞是一类重要的免疫活性细胞,在机体免疫防御方面起着重要作用,不仅与B细胞的抗体形成、T细胞的激活等有密切联系,而且还能合成和释放大量具有重要生理功能的生物高分子以及直接作用于肿瘤细胞等,因此本文选择人和大鼠巨噬细胞为材料,观察了人体AFP(HAFP)对巨噬细胞的作用。(1)HAFP具有抑制人巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,并改变巨噬细胞的电泳迁移率,HSA没有这种作用。(2)AFP阳性肝癌血清同样显示上述抑制作用,当去除AFP后,抑制作用得到不同程度的解除。(3)大鼠腹腔渗出细胞与HAFP的结合能力远远超过与HSA的结合能力,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力受HAFP的抑制率远较受HSA的抑制率高。(4)HAFP浓度与大鼠腹腔渗出细胞(巨噬细胞占70～80%)的结合率曲线、结合量曲线显示:(a)当HAFP<1毫微克/200微升时,K_D～2.5×10~(12)M,HAFP与腹腔细胞的作用符合正协同效应的变化规律;(b)当HAFP>1毫微克/200微升时,HAFP的结合较松弛。(5)过氧化物酶标记免疫电镜定位观察到HAFP滞留在大鼠腹腔巨噬细胞的表面。(6)置换实验证明HAFP与腹腔细胞的结合有一定的特异性。根据以上结果,本文认为巨噬细胞的表面可能有HAFP受体,HAFP通过与巨噬细胞的结合抑制巨噬细胞的吞噬能力,推测在胚胎体内和正常成年个体内HAFP起免疫调节作用,在肝癌患者体内起免疫抑制作用。