从全血中提取基因组DNA方法的对比研究

目的:建立从全血中提取基因组DNA的方法,并评价提取DNA的产量和质量.方法:分别采用传统酚-氯仿抽提法和试剂盒法制备基因组DNA,比较这两种方法提取DNA的产量、纯度、稳定性以及方法本身的优缺点、费用等.结果:试剂盒法简单快速,但其制备的DNA产率、纯度、稳定性低于酚-氯仿抽提法.结论:采用酚-氯仿抽提法可以提取较高质量的基因组DNA,适用于下游的分子生物学实验.     

人类8型疱疹病毒的研究进展

人类8型疱疹病毒（human herpesvirus-8,HHV-8）又称卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（Kapo- si's sarcoma- associated herpesvirus,KSHV）,是一种新的肿瘤病毒,目前被认为是卡波氏肉瘤（Kaposi's sarcoma,KS）致病因子,并且与primary effusion lymphoma （PEL）和multicentric Castleman's disease（MCD）相关。该病毒编码许多蛋白,包括潜伏感染相关蛋白,裂解感染相关蛋白和HHV-8特有基因表达蛋白,在KS和HHV-8相关疾病的发病中起到关键作用。     

中等强度有氧运动联合弹力带抗阻训练对稳定性冠心病患者血管内皮功能、心肺功能及运动耐力的影响

摘要 目的：探讨弹力带抗阻训练、中等强度有氧运动联合应用对稳定性冠心病患者心肺功能、血管内皮功能、运动耐力的影响。方法：选择2020年9月~2022年4月期间我院收治的稳定性冠心病患者70例,按照随机数字表法分为对照组（35例,中等强度有氧运动）和联合组（35例,对照组的基础上接受弹力带抗阻训练）。对比两组运动耐力、血管内皮功能指标[超声颈动脉内膜-中层厚度（IMT） 、内皮依赖性血管舒张功能（FMD）值、Crouse斑块积分]、心肺功能指标[左心室射血分数（LVEF）、心脏每搏输出量（SV）、最大摄氧量（VO₂max）和氧脉搏（O₂pulse）]、生活质量和心血管不良事件发生率。结果：干预后,两组6分钟步行试验（6MWT）升高,且联合组高于对照组（P<0.05）。干预后,两组LVEF、SV、VO₂max、O₂pulse升高,且联合组高于对照组（P<0.05）。干预后,两组生理/社会功能、躯体疼痛、生理/情感职能、精力、总体/精神健康各维度评分升高,且联合组高于对照组（P<0.05）。干预后,两组IMT缩小,FMD升高,Crouse斑块积分下降,且联合组的变化程度大于对照组（P<0.05）。两组心血管不良事件发生率对比无差异（P>0.05）。结论：稳定性冠心病患者采用弹力带抗阻训练和中等强度有氧运动联合干预可改善心肺功能和血管内皮功能,提高运动耐力及生活质量,具有较好的临床应用价值。     

新疆卡波西肉瘤组织中MT1-MMP和ARHGDIB蛋白的表达

目的:探讨新疆卡波氏肉瘤组织中膜型1型基质金属蛋白酶(Menberane 1 Matrix metalloproteinases,MT1-MMP),Rho蛋白解离抑制因子β(Rho GDP dissociation inhibitor GDI beta,ARHGDIB)的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测新疆17例卡波氏肉瘤和17例健康人正常皮肤组织内MT1-MMP和ARHGDIB的表达水平.结果:免疫组化显示MT1-MMP和ARHGDIB在卡波氏肉瘤组织阳性表达率为82.4%和100%,在正常皮肤组织中阳性率为6.9%和17.7%,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:新疆卡波西肉瘤组织中MT1-MMP和ARHGDIB蛋白呈异常表达,有可能在KS的发展过程中发挥了重要作用.     

阿魏酸酯酶A的基因克隆与表达及其水解产物的纯化

为在毕赤酵母中表达来源于米曲霉Aspergillus oryzae的A型阿魏酸酯酶并研究其水解功能,探讨大孔树脂对其水解产物阿魏酸的纯化条件及纯化效果,以米曲霉A.oryzae CICC 40186总RNA为模板,通过RT-PCR技术克隆出了米曲霉阿魏酸酯酶A(AorFaeA)成熟肽的编码基因AorfaeA,并借助pPIC9K质粒实现了其在毕赤酵母GS115中的异源表达。SDS-PAGE分析结果显示纯化后的重组阿魏酸酯酶(reAorFaeA)为单一条带,其表观分子质量约39.0 kDa。以阿魏酸甲酯为底物,经高效液相色谱法测得该酶的最高酶活为58.35 U/mg。利用reAorFaeA和木聚糖酶复合酶水解去淀粉麦麸制备阿魏酸,用大孔树脂纯化小麦麸皮阿魏酸粗提液,所测树脂中HPD-300型大孔树脂的吸附量和解吸率较高,以50%的乙醇为洗脱液,当流速为1.0 mL/min时洗脱效果较好。在该纯化条件下,阿魏酸的回收率为92%,质量分数由原材料中的0.13%富集提高到10.55%。这些研究为阿魏酸的酶法"绿色生产"及应用奠定了坚实的理论基础。